硅基芯片和磁納米粒子表面DNA生物傳感器的構(gòu)建及其在熒光分析中的應(yīng)用.pdf

1、近年來，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，DNA檢測技術(shù)變得越來越重要。傳統(tǒng)的凝膠電泳法勞動強(qiáng)度大，消耗時間長。在這種情況下，以堿基配對為基礎(chǔ)的DNA生物傳感器應(yīng)運(yùn)而生。其中，DNA熒光傳感器由于其高靈敏度、低成本及簡便性等特點(diǎn)受到了越來越多的關(guān)注。
　　基于此，我們構(gòu)建了四種DNA熒光傳感器。第一種是將共價連接到硅基芯片表面的嗎啉寡核苷酸作為捕獲探針，與DNA片段雜交后，利用鋯離子的配位作用，將羅丹明B連接到DNA骨架上，通過熒光成像分析的方

2、法實(shí)現(xiàn)DNA片段的檢測。
　　第二種是將共價連接到磁納米粒子表面的嗎啉寡核苷酸作為捕獲探針，與較長鏈的待測DNA片段雜交后，待測DNA的未雜交段再與生物素?；男盘柼结楧NA雜交，利用親和素-生物素相互作用，將堿性磷酸酶結(jié)合到信號探針DNA末端，堿性磷酸酶催化L-抗壞血酸2-磷酸鹽生成L-抗壞血酸，L-抗壞血酸再還原刃天青形成強(qiáng)熒光的試鹵靈，通過熒光光譜分析的方法實(shí)現(xiàn)DNA片段的檢測。
　　第三種是將嗎啉寡核苷酸固定到磁納米

3、粒子表面，與目標(biāo)DNA片段雜交后，利用鋯離子的配位作用，將1-芘丁酸連接到DNA骨架上，再利用金絲桃素與1-芘丁酸之間的π-π堆積作用引入熒光較強(qiáng)的金絲桃素。
　　第四種是將捕獲DNA的3'端固定到磁納米粒子表面，與目標(biāo)DNA片段雜交后，末端轉(zhuǎn)移酶對目標(biāo)DNA的3'端進(jìn)行加尾，生成聚胸腺嘧啶，銅離子可以與聚胸腺嘧啶相互作用，抗壞血酸鈉將二價銅還原成一價銅，一價銅再歧化形成熒光銅納米粒子附著在DNA模板上，以上幾種體系均具有較高的靈