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1、本文利用Au納米粒子優(yōu)異的光學(xué)與電化學(xué)性質(zhì),構(gòu)建了基于生長(zhǎng)Au納米粒子的生物傳感器。采用紫外-可見(jiàn)吸收(UV-vis)光譜、共振光散射(RLS)光譜、循環(huán)伏安(CV)、差分脈沖伏安(DPV)、陽(yáng)極溶出伏安(ASV)和透射電子顯微鏡(TEM)等分析技術(shù)對(duì)熱變性DNA、黃嘌呤和人IgG等生物分子進(jìn)行了分析檢測(cè)。內(nèi)容主要包括:
(1)介紹了Au納米粒子的制備及其特性,綜述了Au納米粒子在DNA、免疫傳感器中的應(yīng)用,以及生長(zhǎng)Au納
2、米粒子在生物傳感器中的分析進(jìn)展。
(2)研究了無(wú)Au納米晶種存在下,DNA堿基對(duì)Au納米粒子生長(zhǎng)的抑制作用。UV-vis和RLS光譜結(jié)果表明:DNA堿基對(duì)生長(zhǎng)Au納米粒子的抑制作用大小均為:鳥(niǎo)嘌呤(G)>腺嘌呤(A)>胞嘧啶(C)>胸腺嘧啶(T)。利用差分脈沖伏安法計(jì)算了DNA堿基與Au(Ⅲ)離子復(fù)合物的穩(wěn)定常數(shù)。與自然條件下的DNA不同,熱變性的鮭魚(yú)精DNA具有抑制生長(zhǎng)Au納米粒子的作用。本論文建立了一種抑制Au納米粒子
3、生長(zhǎng)檢測(cè)熱變性DNA的光譜方法。該方法有望在DNA損傷研究中得到應(yīng)用。
(3)對(duì)黃嘌呤抑制生長(zhǎng)Au納米粒子進(jìn)行了光譜與電化學(xué)研究。在Au納米晶種存在下,以H2O2作還原劑,建立了基于抑制生長(zhǎng)Au納米粒子檢測(cè)黃嘌呤的UV-vis和RLS光譜方法,其線性范圍分別為2×10-6~30×10-6mol/L和5×10-6~40×10-6mol/L,檢出限分別為1.05×10-6mol/L和1.82×10-6mol/L。黃嘌呤抑制生長(zhǎng)
4、Au納米粒子的作用有可能取決于生成的Au(Ⅲ)-黃嘌呤復(fù)合物。采用CV和DPV方法得到Au(Ⅲ)-黃嘌呤復(fù)合物的穩(wěn)定常數(shù)為2.22×105。
(4)制備了葡萄糖氧化酶-Au納米粒子-抗體(GOX-Au-Ab2)免疫探針,并通過(guò)夾心免疫法結(jié)合到修飾有Au納米晶種的ITO導(dǎo)電玻璃表面。利用免疫探針結(jié)合的GOX催化葡萄糖氧化生成H2O2,還原HAuCl4在晶種表面生長(zhǎng)。并利用紫外-可見(jiàn)吸收光譜、共振光散射光譜和循環(huán)伏安技術(shù)進(jìn)行檢
5、測(cè),結(jié)合抗原濃度的對(duì)數(shù)值與檢測(cè)信號(hào)成遞增的線性關(guān)系。催化生長(zhǎng)的免疫傳感器對(duì)人IgG的檢測(cè)范圍為0.31~1250.00 ng/mL,各種方法檢測(cè)限為0.16~0.22 ng/mL,采用該傳感器實(shí)現(xiàn)了人血清中IgG的光學(xué)與電化學(xué)檢測(cè)。
(5)制備了過(guò)氧化氫酶(CAT)-抗體(Ab2)標(biāo)記Au納米粒子(CAT-Au-Ab2)免疫探針,用于抑制催化生長(zhǎng)Au納米粒子光電免疫傳感器的制作。利用免疫探針結(jié)合的CAT催化分解H2O2,H
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