RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)在果蠅Dscam外顯子簇6互斥可變剪接中的調(diào)控功能研究.pdf

1、可變剪接是多細(xì)胞真核生物中RNA轉(zhuǎn)錄后加工的一種形式，是增加蛋白質(zhì)多樣性的重要途徑，在決定物種特異性及組織特異性分化方式上具有重要的作用，與許多遺傳性疾病和癌癥的發(fā)生都有著密切的關(guān)系?；コ饪勺兗艚邮强勺兗艚拥囊环N類型，它只能選擇一個(gè)可變外顯子進(jìn)入成熟mRNA;選擇不同的可變外顯子，會(huì)形成不同的mRNA，進(jìn)而形成多種蛋白質(zhì)異構(gòu)體?；コ饪勺兗艚拥陌l(fā)生是一個(gè)復(fù)雜而又精細(xì)的調(diào)控過程，大量的剪接調(diào)控蛋白和不同的RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)都參與其中，具體的調(diào)控

2、機(jī)制多種多樣，仍有待補(bǔ)充和完善。
　　黑腹果蠅的Dscam基因是互斥可變剪接的經(jīng)典案例，Dscam基因與果蠅神經(jīng)系統(tǒng)的分化和先天免疫系統(tǒng)的發(fā)生密切相關(guān)，它經(jīng)過四個(gè)外顯子簇的可變剪接可以產(chǎn)生38016種不同的蛋白質(zhì)異構(gòu)體，但Dscam基因剪接的調(diào)控機(jī)制卻不是很清楚。我們實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)用實(shí)驗(yàn)證明了錨定位點(diǎn)-選擇序列互補(bǔ)配對(duì)調(diào)控Dscam基因互斥可變剪接的假說，并發(fā)現(xiàn)和證實(shí)了LCR元件對(duì)Dscam基因外顯子簇6互斥可變剪接的調(diào)控機(jī)制。且Ds

3、cam基因含有四個(gè)可變外顯子簇，共計(jì)95個(gè)可變外顯子，其復(fù)雜而又精細(xì)的可變剪接調(diào)控機(jī)制仍有待繼續(xù)豐富和拓展。
　　該研究首先通過生物信息學(xué)方法在Dscam基因外顯子簇6的最后一個(gè)可變外顯子6.48與組成型外顯子7之間的內(nèi)含子上發(fā)現(xiàn)兩個(gè)保守的順式元件，且它們可以反向互補(bǔ)配對(duì)形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，且該二級(jí)結(jié)構(gòu)在11種果蠅中保守;再通過突變實(shí)驗(yàn)、回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)和刪除實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該二級(jí)結(jié)構(gòu)能夠正向調(diào)節(jié)Dscam基因外顯子簇6剪接的可變外顯子總體選擇比