阿魏酸鈉對(duì)新西蘭兔自體移植靜脈作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　以阿魏酸鈉為干擾因素,觀察其對(duì)兔自體移植靜脈的作用并探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法:
　　1.動(dòng)物分組和手術(shù)造模選擇健康成年新西蘭兔24只,雌雄各半,體重2.0~2.5kg。每只動(dòng)物取其右側(cè)頸外靜脈移植到同側(cè)頸總動(dòng)脈,建立自體靜脈移植模型后隨機(jī)分為空白對(duì)照組(n=12)和阿魏酸鈉實(shí)驗(yàn)組(n=12)。實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物術(shù)后第一天開始給予阿魏酸鈉100mg/kg/只/日溶于生理鹽水灌胃,至取標(biāo)本前一日,空白對(duì)照組給予

2、同等量生理鹽水灌胃做空白對(duì)照。
　　2.標(biāo)本取樣與實(shí)驗(yàn)方法分別于術(shù)后14天、28天切取移植靜脈。通過(guò)蘇木素-伊紅染色觀察組織形態(tài),并測(cè)定其內(nèi)膜厚度,分別用免疫組織化學(xué)方法和用TUNEL法檢測(cè)移植靜脈內(nèi)膜增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)情況和內(nèi)膜中原位凋亡細(xì)胞比例。
　　3.數(shù)據(jù)處理圖像使用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析。SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),兩組間比較采用t檢驗(yàn),按檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,顯著性水平P<0.05有統(tǒng)

3、計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及移植血管的大體觀察
　　所有動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成。取材時(shí)切口愈合良好,無(wú)傷口及深部感染,所有靜脈移植血管都保持通暢,兩組移植靜脈無(wú)閉塞。
　　2.組織形態(tài)
　　HE染色光鏡下觀察空白對(duì)照組移植術(shù)后14天移植靜脈內(nèi)膜中即可見(jiàn)平滑肌細(xì)胞體積增大數(shù)量增加;術(shù)后28天移植靜脈內(nèi)膜中平滑肌細(xì)胞進(jìn)一步增多,平滑肌細(xì)胞間質(zhì)及膠原纖維明顯增多。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后14天移植靜脈平滑肌細(xì)胞增多

4、不明顯;術(shù)后28天移植靜脈平滑肌細(xì)胞略有增多,分泌型平滑肌細(xì)胞有所增加。
　　3.免疫組化基因表達(dá)
　　術(shù)后14天,對(duì)照組內(nèi)膜增殖細(xì)胞核抗原陽(yáng)性細(xì)胞百分比為(37.02±1.29)％,較實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性細(xì)胞百分比(21.77±2.27)%明顯增加;術(shù)后28天兩組內(nèi)膜增殖細(xì)胞核抗原的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均增加,對(duì)照組內(nèi)膜增殖細(xì)胞核抗原陽(yáng)性細(xì)胞百分比為(57.14±1.88)%,較實(shí)驗(yàn)組(31.81±1.49)%明顯增加(P<0.05)。

5、>　　4.TUNEL法測(cè)定細(xì)胞原位凋亡
　　移植靜脈14天和28天時(shí)內(nèi)膜中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例實(shí)驗(yàn)組分別為(7.96±0.07)%和(3.40±0.17)%,對(duì)照組分別為(4.34±0.25)%和(1.95±0.10)%,實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組明顯增多,兩組間比較具有顯著意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.阿魏酸鈉不僅能減少自體移植靜脈血管平滑肌中PCNA的表達(dá)而且能增強(qiáng)自體移植靜脈平滑肌細(xì)胞的凋亡。
　　3.阿魏酸