阿魏酸鈉對(duì)大鼠肝纖維化以及LX-2細(xì)胞增殖的作用.pdf

1、【背景及目的】肝硬化是各種慢性肝病進(jìn)展的結(jié)果，其病理生理表現(xiàn)為細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生過多，降解減少，導(dǎo)致肝臟中細(xì)胞外基質(zhì)大量沉積，肝臟正常解剖結(jié)構(gòu)被破壞，引起一系列臨床表現(xiàn)及并發(fā)癥。目前認(rèn)為活化的肝星狀細(xì)胞是細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源，所以肝星狀細(xì)胞活化是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。正常情況下肝星狀細(xì)胞活化處于靜息狀態(tài)，胞漿內(nèi)富含脂滴。在各種促纖維化因素的刺激下，肝星狀細(xì)胞活化，轉(zhuǎn)變?yōu)榧〕衫w維樣細(xì)胞，獲取一系列表型：收縮性、增殖性、遷移性、分泌細(xì)胞外基質(zhì)增多

2、等。阿魏酸鈉具有抗氧化、抗炎作用，可對(duì)多種疾病產(chǎn)生治療作用，包括減少肝毒性藥物導(dǎo)致的肝損傷。而關(guān)于阿魏酸鈉對(duì)肝纖維化的作用，目前研究較少。本實(shí)驗(yàn)旨在通過研究阿魏酸鈉對(duì)膽管結(jié)扎肝纖維化大鼠肝臟病理組織學(xué)、超微結(jié)構(gòu)的作用以及對(duì)肝星狀細(xì)胞系LX-2和HSC-T6增殖的影響，來探討阿魏酸鈉對(duì)肝纖維化的作用，為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究和臨床治療提供思路和依據(jù)。
　　【方法】組織水平研究：實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為三組，分別是SHAM組、BDL+NS組、BDL+

3、SF組，膽管結(jié)扎法制作大鼠肝纖維化模型，然后分別做不同處理。處死大鼠，取出肝臟，制作切片，分別做HE染色、電鏡觀察，來說明阿魏酸鈉對(duì)大鼠肝纖維化的作用。細(xì)胞水平研究：培養(yǎng)良好的LX-2和HSC-T6各分成四組，分別為對(duì)照組、不同濃度阿魏酸鈉處理組（0.04mg/ml，0.12mg/ml，0.36mg/ml），藥物處理48h后，BrdU/PI雙標(biāo)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC-T6細(xì)胞系增殖，比較處于S期細(xì)胞的比例。CCK-8法檢測(cè)LX-2細(xì)胞系增

4、殖，比較各組OD（吸光度）值。
　　【結(jié)果】組織水平研究：BDL+NS組及BDL+SF組大鼠與假手術(shù)組相比，HE染色切片中均有不同程度肝細(xì)胞壞死及纖維化，而與 BDL+NS組相比，BDL+SF組大鼠肝細(xì)胞壞死和纖維化程度明顯降低。此外，電鏡觀察顯示 BDL+NS組肝細(xì)胞壞死嚴(yán)重、胞漿內(nèi)各細(xì)胞器損害明顯、間質(zhì)見大量纖維聚集。而相比于BDL+NS組，BDL+SF組肝細(xì)胞內(nèi)可見輕度脂肪變性，間質(zhì)偶見少量纖維聚集，肝細(xì)胞損害和間質(zhì)纖維化程

5、度明顯低于BDL+NS組。細(xì)胞水平研究：阿魏酸鈉處理組 LX-2細(xì)胞 OD值明顯低于對(duì)照組(0.27954±0.035321,0.27624±0.049625,0.17122±0.00772 vs.0.3584±0.028664，p<0.05),而且，隨著阿魏酸鈉濃度的增高，OD值逐漸下降。阿魏酸鈉處理組HSC-T6細(xì)胞系S期細(xì)胞比例與對(duì)照組相差不大（37.4％，35.9%，32.3%vs.34.4%）。
　　【結(jié)論】阿魏酸鈉顯著