基于核酸探針和雙光子探針檢測(cè)生物活性小分子的研究.pdf

1、生命體就好比是一個(gè)復(fù)雜并且精確運(yùn)行的工廠，而細(xì)胞作為完成生命活動(dòng)的基礎(chǔ)單元每時(shí)每刻都發(fā)揮著自己相應(yīng)的作用。而活躍在各個(gè)細(xì)胞內(nèi)的如活性氧化物、硫醇類物質(zhì)等活性小分子通過發(fā)生化學(xué)生物反應(yīng)過程參與了新陳代謝、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等活動(dòng)。在一定的濃度水平下，他們可以維持生物體正常生理活動(dòng);但其含量發(fā)生很大變化時(shí)，他們會(huì)導(dǎo)致新陳代謝的平衡打破，進(jìn)而使生物體內(nèi)生理功能紊亂，甚至引發(fā)重要的疾病。所以他們?cè)隗w內(nèi)濃度的高低經(jīng)常作為一些疾病的診斷依據(jù)。因此檢測(cè)這

2、些活性小分子對(duì)了解生物體運(yùn)轉(zhuǎn)的機(jī)理和一些疾病的早期診斷有著重要的意義?；谏锘钚孕》肿釉谏w的重要作用，我們結(jié)合核酸探針和雙光子探針在生命環(huán)境中檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)，主要開展了兩個(gè)對(duì)生物小分子的研究工作:
　　(1)基于時(shí)間分辨光譜的核酸探針檢測(cè)生物硫醇:核酸探針的兩端分別標(biāo)記了一個(gè)芘分子。并且核酸探針上的T堿基可以與汞離子(Hg2+)作用形成T-Hg2+-T結(jié)構(gòu)，使核酸探針的構(gòu)型發(fā)生變化從而加大了芘分子的距離并產(chǎn)生了單芘分子的熒光信號(hào)

3、。當(dāng)生物硫醇存在時(shí)，它可與核酸探針上的T-Hg2+-T結(jié)構(gòu)中的汞離子發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，破壞了T-Hg2+-T結(jié)構(gòu)，使核酸探針構(gòu)型發(fā)生變化，構(gòu)型的變化拉近兩個(gè)芘分子的距離產(chǎn)生雙芘信號(hào)。同時(shí)由于體系中還有γ-環(huán)糊精可以與雙芘分子發(fā)生主客體作用，使得雙芘分子的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)并延長(zhǎng)其熒光壽命，從而利用長(zhǎng)熒光壽命的特點(diǎn)實(shí)現(xiàn)了在復(fù)雜樣品中對(duì)生物硫醇的檢測(cè)。
　　(2)基于雙光子探針和環(huán)糊精主客體作用檢測(cè)生物體內(nèi)過氧化氫:將含有巰基的β-環(huán)糊精與金納