番茄ssr，rapd體系優(yōu)化及tm239;nv基因的scar鑒定

1、揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文番茄SSR，RAPD體系優(yōu)化及Tm-2基因的SCAR鑒定姓名：楊少軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師：朱為民;薛林寶20060501楊少軍番茄S S R ，R A P D 體系優(yōu)化及T m ．2 “基因的S C A R 鑒定 !番茄S S R ，R A P D 體系優(yōu)化及T m - 2 ”基因的S C A R 鑒定摘 要番茄( L y c o p e r m i c o ne s c u ] e n t u m

2、M i l l e r ) 是世界范圍內(nèi)廣泛種植的蔬菜之一，在世界農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)和農(nóng)業(yè)市場(chǎng)中占有重要的地位。其獨(dú)特的風(fēng)味、豐富的營(yíng)養(yǎng)、鮮艷的色彩和特殊的醫(yī)用價(jià)值吸引著越來越多的消費(fèi)者。年總產(chǎn)量己達(dá)8 0 0 0 萬噸以上。但是，長(zhǎng)期以來番茄的生產(chǎn)受到許多病害的影響，其中T M V 、C M V 、葉霉病、枯萎病、根結(jié)線蟲病等是番茄生產(chǎn)中的主要病害。篩選和培育抗病品種是防治病害最為有效的方法。開展番茄抗T M V 基因的分子標(biāo)記和品種資源的抗病

3、鑒定評(píng)價(jià)工作，有助于建立番茄分子標(biāo)記輔助選擇育種體系，獲得更多的抗源材料，從而促進(jìn)番茄抗病毒病遺傳育種水平的顯著提高。本研究的主要內(nèi)容和結(jié)論如下：1 、番茄S S R 體系的建立和優(yōu)化以部分番茄品種作為材料，對(duì)番茄S S R ．P C R 反應(yīng)體系的中的M 9 2 + 、d N T P s 、T a qD N A 聚合酶濃度以及退火溫度和循環(huán)次數(shù)進(jìn)行了探討，確立了適合番茄S S R分析的技術(shù)體系：B u f f e r1 0 ×

4、;，M 9 2 + 3 ．0 m m o l ·L ～，d N T P s 0 ．5 m m o l ·L ～，T a qD N A聚合酶濃度0 ．0 5 u ·uL 一，退火溫度5 8 。C ，循環(huán)次數(shù)3 5 次。2 、番茄R A P D 體系的建立和優(yōu)化以部分番茄品種為材料，對(duì)番茄R A P D 反應(yīng)體系的M 9 2 + 、d N T P s 、殆g D N A 聚合酶濃度，退火溫度和循環(huán)次數(shù)進(jìn)行了探討

5、，確立了適合番茄植物R A P D 分析技術(shù)體系：B u f f e r1 0 ×，M g “2 ．O m m o l ·L —I j d N T P 0 ．5 m m o l ·L ～，乃9D N A 聚合酶濃度l u ，退火溫度4 1 ℃，循環(huán)次數(shù)4 5 次。3 、番茄抗煙草花葉病毒T m _ 2 ”基因的克隆測(cè)序用抗T m 一2 ”的S C A R 標(biāo)記引物對(duì)含有抗T M V 病毒的材料擴(kuò)增分析表明，