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1、1課題3:血紅蛋白的提取和分離姓名姓名班級班級學(xué)號學(xué)號一基礎(chǔ)知識檢測一基礎(chǔ)知識檢測(要求:能準(zhǔn)確寫出關(guān)鍵詞與句,并理解并適當(dāng)記憶。以課本為準(zhǔn))(一)凝膠色譜法(一)凝膠色譜法1概念:概念:凝膠色譜法也稱做,是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。2。原理:。原理:凝膠實際上是一些由構(gòu)成的多孔球體,在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過凝膠時速度不同,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程,移動速度;而相對分子質(zhì)量的
2、蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在移動,路程,移動速度。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。(二)緩沖溶液(二)緩沖溶液1作用:作用:是。2配置配置:緩沖溶液通常由溶解于水中配制而成的。生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)反應(yīng)都是在一定的pH下進(jìn)行的,例如:血漿的pH是,要在實驗條件下準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的過程,必須保持體外的pH與體內(nèi)的基本一致。(三)電泳(三)電泳1概念:概念:電泳是指。2原理:原理:許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都
3、具有可解離的基團(tuán),在一定的pH下,這些基團(tuán)會帶上。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷的電極移動。電泳利用了待分離樣品中各分子以及分子本身的、的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。3方法:方法:兩種常用的電泳方法是和,在測定蛋白質(zhì)分子量時通常使用。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于以及等因素。二蛋白質(zhì)的提取和分離二蛋白質(zhì)的提取和分離蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:、、和。1樣品處理樣品處理血液由和組成
4、,其中紅細(xì)胞最多。紅細(xì)胞具有的特點。紅細(xì)胞中有一種非常重要的蛋白質(zhì),其作用是,血紅蛋白有個肽鏈組成,包括,其中每條肽鏈環(huán)繞一個,磁基團(tuán)可攜帶。血紅蛋白因含有呈現(xiàn)紅色。(1)紅細(xì)胞的洗滌)紅細(xì)胞的洗滌A洗滌紅細(xì)胞的目的是。B加入,緩慢攪拌,低速短時間離心,如此重復(fù)洗滌三次,直至,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。(2)血紅蛋白的釋放)血紅蛋白的釋放在和作用下,紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。(3)分離血紅蛋白溶液)分離血紅蛋白溶液將攪拌好的混合溶液離心后,
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