山楂葉總黃酮的提取

1、山楂葉總黃酮的提取,目錄,一山楂的現(xiàn)狀,二山楂葉的藥理作用,三黃酮的提取方法,四發(fā)展展望,PART.,1,山楂的現(xiàn)狀,山楂，原產(chǎn)于中國(guó)、朝鮮和俄羅斯的西伯利亞。遠(yuǎn)在2000年前已有關(guān)于山楂的記載?？墒秤弥参铩⒑斯愃?，核質(zhì)硬、果肉薄、味微酸澀； 落葉灌木、枝密生、有細(xì)刺、幼枝有柔毛、小枝紫褐色、老枝灰褐色，為薔薇科植物山楂或野山楂的成熟果實(shí)。,山楂豐產(chǎn)性好，一般栽培每公頃產(chǎn)量可達(dá)22.5t以上，果實(shí)耐貯運(yùn)，山楂在山地、平

2、原、丘陵、沙荒地、酸性或堿性土壤，均可栽培。對(duì)土壤條件要求以砂性為最好，粘重土則生長(zhǎng)較差。適于山地、沙荒地發(fā)展。,山楂多為野生，近年來(lái)有人工栽培，有南山楂和北山楂之分。其中，南山楂多為野生，果小，味酸澀，以藥用為主，分布于長(zhǎng)江以南各?。槐鄙介?，果較大，氣味香，酸甜適中可口，可鮮食和加工成山楂片、山楂餅等保健食品，主產(chǎn)于山東、遼寧、河北、河南等省。最有名的為山東的紅瓤大楂、大金星，遼寧的軟核大山楂等品種。因其果實(shí)紅色鮮潤(rùn)，酸中帶甜，既可

3、鮮食，也可藥用，而備受大眾喜愛(ài)，因此由山楂帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)日漸受到關(guān)注。其中，山楂食品加工廠，主要集中在山東的萊蕪，河北的興隆縣，山西的運(yùn)城等地；山楂藥材市場(chǎng)主要集中在山楂的主產(chǎn)區(qū)，山東的青州平邑、河北的青龍興隆、河南的輝縣等地。,近年來(lái)，隨著人類對(duì)天然食品和天然藥物的需求量不斷增加，山楂的種植面積不斷擴(kuò)大。因此，人們?cè)谘芯可介麑?shí)的基礎(chǔ)上，開(kāi)始注重葉的化學(xué)組成、藥理作用和臨床應(yīng)用方面的研究。山楂葉具有很好的藥理作用，主要功能為消食健胃行

4、氣散瘀。國(guó)內(nèi)外研究頗多，特別是自發(fā)現(xiàn)其治療心血管疾病的療效后，引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的注意。,PART.,2,山楂葉的藥理作用,山楂葉具有消食化積，活血散瘀的作用。可降低血壓和膽固醇以及血脂。它還可以去油脂，促進(jìn)胃腸消化的作用。另外它能提高人體免疫力，增強(qiáng)體質(zhì)，常喝山楂葉茶會(huì)有一定的防衰老、美容、防癌功效。降血脂現(xiàn)代研究證明,山楂不同提取部分對(duì)不同動(dòng)物造成的各種高脂模型均有較肯定的降脂作用。山楂及山楂黃酮提取物能明顯的降低實(shí)驗(yàn)性高脂血癥的

5、家兔和乳幼大鼠的血脂,并對(duì)實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化有治療作用。用菊花、雙花、山楂5∶5∶4配方代茶飲治療血流變學(xué)異常的高脂性高血壓病人、動(dòng)脈硬化癥患者,總有效率達(dá)95%。,對(duì)消化系統(tǒng)的作用近代研究表明山楂含VC、VB2、胡蘿卜素及多種有機(jī)酸,口服能增加胃中消化酶的分泌，并能增強(qiáng)酶的活性、促進(jìn)消化。有報(bào)道指出，山楂醇提液對(duì)受刺激的大鼠胃平滑肌活動(dòng)有雙向調(diào)節(jié)作用，表明服山楂對(duì)胃腸功能紊亂有明顯調(diào)整作用，達(dá)到健脾消食作用。重用山楂并配用健脾藥治療

6、小兒泄瀉可取得滿意的療效。用山楂為主藥的山楂茶葉湯治療酒精性肝病療效滿意。也可用于治療急性痢疾、腸炎等。降壓作用以較小劑量山楂的流浸膏、黃酮或水解產(chǎn)物注射于麻醉貓、麻醉兔或麻醉小鼠,均有緩慢而持久的降壓作用,其降壓原理以擴(kuò)張外周血管為主。臨床用山楂糖漿治療高血壓療效達(dá)90%以上。,對(duì)心血管的作用1 強(qiáng)心、抗心絞痛作用山楂具有增加心肌收縮力，增加心輸出量、減慢心律的作用，山楂及其葉的提取物可濃度相關(guān)地增加心肌收縮力，不影響心臟

7、自動(dòng)節(jié)律，縮短房室傳導(dǎo)時(shí)間，可濃度相關(guān)地延長(zhǎng)有效不應(yīng)期。2 抗心絞痛作用山楂具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈血管，增加冠脈流量，降低心肌耗氧量作用。山楂浸膏、水解物對(duì)家兔離體血管均有明顯解痙作用。北山楂提取物在大鼠和家兔中均有預(yù)防和減輕實(shí)驗(yàn)性心肌缺血缺氧和心肌壞死作用。山楂黃酮還能縮小心肌梗塞范圍。山楂的擴(kuò)冠機(jī)理與其Β-腎上腺能受體激動(dòng)作用有關(guān)。其標(biāo)準(zhǔn)提取物良好的藥理、臨床試驗(yàn)結(jié)果預(yù)示著它將作為合成藥物的代用品，成為慢性心衰植物治療的新選擇。

8、3 抗心律失常作用山楂提取物有對(duì)抗靜脈注射烏頭堿引起的心律不齊，且作用較強(qiáng)，起主要作用的是山楂黃酮和皂苷。靜脈注射山楂提取物可對(duì)抗家兔因注射腦垂體后葉素引起的心律失常。,抗疲勞作用 :山楂多糖能增加小鼠負(fù)重游泳時(shí)間 ,增強(qiáng)小鼠缺氧耐力 ,降低小鼠血清尿素氮、血乳酸量 ,提高肝糖原的量 ,具有顯著抗疲勞作用。 對(duì)尿液影響 : 張璐等研究表明 ,山楂總黃酮經(jīng)腹腔注射 ,對(duì)尿液的生成有抑制作用。因藥量、給藥途徑、提取方式的不同 ,也

9、有報(bào)道其有瀉下、增加尿液的作用。 　止痛和止血作用 :山楂用于瘀阻腫痛 ,可入血分 ,能通行氣血 ,化瘀散結(jié)而止痛?？芍卧陆?jīng)不調(diào)、痛經(jīng) ,如生山楂沖紅糖水熱服可治婦女月經(jīng)過(guò)期不來(lái)。山楂內(nèi)金散可用于血滯月經(jīng)量少 ,氣滯瘀經(jīng)閉腹痛。山楂肉桂紅糖湯可溫腎陽(yáng) ,通經(jīng)脈 ,溫血行痹 ,祛寒止痛。其方劑簡(jiǎn)單 ,療效良好。藥理研究證明 ,山楂有收縮子宮的作用 ,可排出宮腔內(nèi)血塊 ,促進(jìn)子宮復(fù)原 ,而奏止痛止血之效。其與活血化瘀藥配伍 ,可治產(chǎn)后惡露

10、不盡 ,少腹疼痛者 ,療效甚佳。,抗腫瘤作用山楂果總黃酮對(duì)正常細(xì)胞的生長(zhǎng)無(wú)明顯影響 ,但能使腫瘤細(xì)胞內(nèi)鈣濃度明顯升高 ,體外通過(guò)鈣超載抑制Hep22 細(xì)胞 ,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。山楂果總黃酮可通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞DNA 的生物合成 ,從而阻止瘤細(xì)胞的分裂繁殖?？咕?由山楂榨取的原液對(duì)金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、大腸桿菌等均有一定的抑制作用。臨床上用作植物消毒劑, 用鮮品或熟品外敷治療凍傷感染及潰瘍, 并取得較好的效果?！”Ｗo(hù)視網(wǎng)膜 山楂、

11、枸杞、大棗煎熬制成藥液口服可提高C S2 染毒兔對(duì)CS2的耐受力, 對(duì)視網(wǎng)膜具有一定程度的保護(hù)作用?！∫种苹?有報(bào)道證明, 山楂提取物對(duì)環(huán)磷酰胺致小鼠精子畸變有抑制作用, 可能與山楂中含有的大量亞油酸及 VC 有關(guān)。,PART.,3,黃酮的提取方法,黃酮類化合物又稱黃堿素,廣泛存在于自然界的植物中,屬植物次生代謝產(chǎn)物,。許多研究己表明黃酮類化合物安全、無(wú)毒,具有抗菌、消炎、清熱解毒、鎮(zhèn)靜、利尿等作用外,它是大多數(shù)氧自由基的清除劑,

12、對(duì)冠心病、心絞痛等疾病的治療效果顯著。特別是自由基和抗癌、防癌的作用,使黃酮類化合物的研究進(jìn)入了一個(gè)新的階段。隨著食品工業(yè)的發(fā)展與消費(fèi)觀念的改變,天然活性成分的保健食品成為現(xiàn)代人追逐的目標(biāo),其中黃酮類化合物以純天    然、高活性、見(jiàn)效快、作用廣泛等特點(diǎn)日益受到人們的關(guān)注。目前,黃酮類化合物的提取方法主要有溶劑提取法、微波提取法、超聲波提取法、酶解法、超臨界流體萃取法、雙水相萃取分離法、半仿生提

13、取法等,各種提取方法都有它的優(yōu)缺點(diǎn)。,水提法山楂葉粉碎成小塊。加入蒸餾永煮沸，冷卻后粗濾，濾液離心分離，濃縮，醇沉。離心分離。濾液濃縮，干燥。本方法操作簡(jiǎn)單，但純度較低，除雜較困難．乙醇滲漉法取山楂葉，粉碎成粗粉，用乙醇浸漬，進(jìn)行滲漉，收集漉液。減壓濃縮．加水稀釋后．用石油醚除去色素，分出水層。用乙酸乙醇振搖提取，提取液減壓濃縮至干，即得．本方法為藥典收載方法．工藝較成熟穩(wěn)定，提取物中總黃酮含量較高。可達(dá)80％以上．超聲提取法將山楂

14、葉粉碎，先加石油醚脫脂，然后加60％乙醇超聲提取，再回流提取lh，過(guò)濾，濾液減壓濃縫，得粗品，將粗品溶于乙醇中，過(guò)濾，減壓蒸餾，依次加入乙醚，乙酸乙酯萃取精制。在傳統(tǒng)提取中輔以超聲，可破壞細(xì)胞壁，利于有效成分的提取，提高產(chǎn)品收率．且這一物理過(guò)程不會(huì)使有效成分遭受破壞。不失為提取的一種有效途徑。,超高壓提取法 取一定量山楂葉粉末，加入50％乙醇．密封，壓力為400MPa，60℃下提取3min。該工藝具有提取效率高、時(shí)間短、雜質(zhì)含量少等優(yōu)點(diǎn)

15、．但超高壓技術(shù)用于中藥提取，還處于起步階段，超高壓是否影響生物小分子結(jié)構(gòu)等許多問(wèn)題有待于深入研究。微波輔助萃取法 取山楂葉粉末，50％乙醇為萃取溶劑，微波功率為240W，采用間歇式輻射方式進(jìn)行提取。微波輔助萃取是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新型提取技術(shù)，利用物質(zhì)在外加電場(chǎng)的作用下分子發(fā)生極化，快速定向轉(zhuǎn)動(dòng)而發(fā)生劇烈碰撞和相互磨擦引起發(fā)熱，從而促使有效成分的快速溶出和釋放。作為一種新的提取工藝，具有穿透力強(qiáng)、操作時(shí)間短、有效成分得率高等特點(diǎn)，可

16、節(jié)約能源、縮短生產(chǎn)周期。,大孔吸附樹脂法 山楂葉加70％乙醇加熱回流提取，藥液回收至無(wú)醇味后加入適量熱水離心．離心液通過(guò)D101型大孔樹脂柱吸附，用70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，真空干燥。大孔樹脂是20世紀(jì)70年代末發(fā)展起來(lái)的一類有較好吸附性能的有機(jī)高聚物吸附劑，近年來(lái)，大孔樹脂吸附技術(shù)已廣泛用于中草藥有效成分的分離、純化。使用本方法可富集有效成分、提高其純度。酶解法酶解法是指在黃酮類物質(zhì)的提取過(guò)程中，通過(guò)加入酶發(fā)生轉(zhuǎn)糖反應(yīng)和

17、酶解反應(yīng)，使產(chǎn)品黃酮類物質(zhì)得率和含量大大提高的新興技術(shù)。酶解法在黃酮類物質(zhì)提取工藝占主導(dǎo)地位的工業(yè)化生產(chǎn)中，具有良好的可行性，并有利于保護(hù)黃酮類物質(zhì)的活性，具有提取條件溫和、成本低、安全等優(yōu)點(diǎn)。此外，該技術(shù)對(duì)干燥或浸濕的原料皆適用。其工藝流程為：干山楂葉一破碎一酶解一保溫浸提一離心一上清液一大孔樹脂吸附一50％乙醇溶液洗脫一減壓濃縮一烘干一粉碎。,堿提法提取流程原料一加10倍原料重的水一加熱至沸一加飽和石灰水調(diào)p H值至8～9一加熱維

18、持沸騰30 min一過(guò)濾(濾渣重新提取2次)一合并3次濾液一減壓濃縮至一定體積一加HCl調(diào)p H值至5～6一加多倍量濃醇(除去蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì))一過(guò)濾(棄去濾渣)一濾液(總黃酮粗提液)一過(guò)聚酰胺柱(分別用水和95％甲醇洗脫)一醇洗脫液一減壓蒸餾(回收醇)一干浸膏(總黃酮物)堿提法提取黃酮類化合物在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用較廣泛，具有經(jīng)濟(jì)、安全、方便等優(yōu)點(diǎn)。但用堿提法時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意所用堿液濃度不宜過(guò)高，以免在強(qiáng)堿性下，尤其加熱時(shí)破壞黃酮母核；在加

19、酸酸化時(shí)，酸性不宜調(diào)至太強(qiáng)，以免生成鹽致析出的黃酮類化合物重新溶解，降低收率。,PART.,4,發(fā)展展望,研究證實(shí)，山楂葉和果含有相近的營(yíng)養(yǎng)及藥用成分，特別是總黃酮含量遠(yuǎn)高于果實(shí)，有很高的利用價(jià)值。我國(guó)盛產(chǎn)山楂，山楂葉資源豐富，價(jià)廉易得，充分利用山楂葉全面認(rèn)識(shí)其化學(xué)成分，從中尋找高效治療藥物，進(jìn)而開(kāi)發(fā)出新藥，前景廣闊。山楂葉提取物和化學(xué)藥物相比，作用溫和，毒副作用小，安全低毒。山楂葉提取物藥理作用廣泛、療效確切。值得臨床推廣應(yīng)用。

20、現(xiàn)臨床主要應(yīng)用于治療冠心病心絞痛等心血管疾病，因其成份較多，尚有許多機(jī)理不甚明確。其臨床應(yīng)用有待于深入研究，進(jìn)一步開(kāi)拓，應(yīng)引起藥物研究者和臨床工作者的重視。山楂葉總黃酮是治療心腦血管疾病和抗腫瘤的活性成分，其它化學(xué)成分的藥理作用也逐漸被闡明。,近年來(lái)隨著分離提取技術(shù)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)了大量新黃酮類化合物，也掀起了對(duì)它們的研究熱潮，開(kāi)發(fā)了數(shù)種含有黃酮類物質(zhì)的產(chǎn)品。在醫(yī)藥方面，根據(jù)其在心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、抗腫瘤方面的藥理作用，很多以黃酮類成

21、分為主的制劑已作為成藥上市。在食品中它們應(yīng)用于功能性食品添加劑和功能食品中。在獸藥、農(nóng)藥等領(lǐng)域，現(xiàn)已開(kāi)發(fā)出了一些具有特效功能的含有黃酮類化合物藥品和驅(qū)蟲、殺蟲劑等。 學(xué)者們對(duì)黃酮類化合物的積極研究為其在醫(yī)藥、食品等中的應(yīng)用提供了理論依據(jù)，以便生產(chǎn)出具有治療特異性高、高效、低毒的藥品和天然保健品，同時(shí)有利于探索發(fā)現(xiàn)研究先進(jìn)的提取分離方法，加速植物資源的有效開(kāi)發(fā)利用。,感,謝,關(guān),注,THANKYOUFOR,YOURATTE