紫外吸收光度法鑒別和測定維生素b12 注射液_第1頁
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文檔簡介

1、紫外吸收光度法鑒別和測定維生素B12注射液【實驗內(nèi)容】1.對照品溶液和樣品溶液的配制準(zhǔn)確稱取維生素B12對照品適量，加水溶解稀釋成25μgmL的溶液。精密吸取維生素B12注射液0.5ml于10ml容量瓶中，用水稀釋至刻度搖勻，得到待測樣品溶液（按標(biāo)示含量稀釋成25μgml的溶液）。2.吸收光譜的繪制與注射液的鑒別取對照品溶液進(jìn)行光譜掃描（250~600nm），得到維生素B12的吸收曲線，尋找吸收峰，掃描后可得到在278nm，361nm和

2、550nm波長處出現(xiàn)的3個吸收峰，然后在以上3個吸收峰處測量維生素B12注射液的吸光度，并計算A361A278和A361A550的比值。3.維生素B12的定量測定根據(jù)吸收曲線選擇最大吸收波長（在361nm或附近）作為測量波長，測量維生素B122.使用5聯(lián)池時要注意比色皿在樣品池中的位置，不可混淆；3.測定時不要打開儀器的樣品池蓋。【數(shù)據(jù)記錄】WLABS550.50.142550.00.141361.00.450278.00.248277

3、.50.249【數(shù)據(jù)處理】1、定性分析E(1%1cm361.0nm)E(1%1cm277.5nm)=A(361.0nm)A(277.5nm)=1.81E(1%1cm361.0nm)E(1%1cm550.5nm)=A(361.0nm)A(550.5nm)=3.172、定量分析因為，A(361nm)=E(1%1cm)cl，g100ml=106μg100ml=104μgml所以，cB12=A(361nm)E(1%cm)l=A(361nm)20

4、7104=0.450207104=21.74μgmlVitB12(%)=(cB12n)(500μgml)100%=(21.7420)500100%=87.0%(n為稀釋倍數(shù))【思考題】1采用吸光系數(shù)法直接測定樣品含量有何要求？2利用其他組同學(xué)的實驗結(jié)果，比較同一溶液在不同儀器上測得的吸收曲線的形狀、吸收峰波長以及相同濃度的吸光度有無不同，試作解釋。利用鄰組同學(xué)的實驗結(jié)果，比較同一溶液在不同儀器上測得的吸收曲線的形狀、吸收峰波長以及相同濃

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