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1、1中文 中文 2790 字出處: 出處:ARYA S. P, MAHAJAN M, JAIN P. Photometric Methods for the Determination of Vitamin C[J]. Analytical Sciences, 1998, 14(5):889-895.分光光度法測(cè)定 分光光度法測(cè)定維生素 維生素 C 的含量 的含量摘要: 摘要:維生素 C 的重要性已得到世界人們的廣泛認(rèn)可。這種維生素的不足
2、會(huì)導(dǎo)致各種疾病。鑒于其重要性,已有包括分光光度法的多種方法用于測(cè)定藥品,食品和生物樣本中的維生素 C 含量。人們普遍認(rèn)為可用分光光度法測(cè)定抗壞血酸的含量。關(guān)鍵詞: 關(guān)鍵詞:維生素 C 含量;分光光度法1.引言 .引言對(duì)于不同的自然物質(zhì),測(cè)定其中維生素 C 含量的方法亦不同。它可作為藥品的一種重要輔料,復(fù)合維生素 B 的穩(wěn)定劑并可作為一種抗氧化劑。鑒于其能產(chǎn)生良好的作用,所以被廣泛用于治療某些疾病,如壞血病、普通感冒、貧血、出血性疾病、傷
3、口愈合甚至不孕,這些功能已有案件證明。人們認(rèn)為維生素 C 對(duì)發(fā)育以及肌肉,骨骼,牙齒和皮膚的再生是至關(guān)重要的。因此,越來(lái)越多的人使用含有維生素 C 的藥品和其他自然物質(zhì),這意味著實(shí)用化學(xué)家應(yīng)制定其含量的分析方法,使操作簡(jiǎn)單、快速,結(jié)果準(zhǔn)確,具有靈敏性和選擇性。想發(fā)明一種理想測(cè)定方法的這個(gè)愿望,導(dǎo)致產(chǎn)生了許多不同的方法,它們有不同的適用條件。許多以?xún)x器為基礎(chǔ)的分析方法,包括高效液相色譜 5 - 10 , 極譜法 11 - 13 和酶 14
4、 -15 方法,已有文獻(xiàn)報(bào)道。但由于其固有的限制,這些技術(shù)不常用于常規(guī)分析。然而,分光光度法特別有前景,因?yàn)樗鼈兯俣瓤旌挽`敏度高。因此,制訂了許多類(lèi)似的方法, 用于測(cè)定抗壞血酸(AA)的含量。雖然已有一些短期的評(píng)論報(bào)道,但仍需一個(gè)嚴(yán)格的方法來(lái)檢查這些方法的突出特點(diǎn)和適用條件。這項(xiàng)審查是試圖專(zhuān)門(mén)評(píng)估現(xiàn)有的分光方法的簡(jiǎn)便性,快速性,比爾定律范圍,靈敏度,選擇性與適用性。這主要是基于從 1970 年到 1997 年期間的化學(xué)文摘所搜集的信息
5、來(lái)評(píng)估。2.結(jié)果與討論 .結(jié)果與討論 一些染料,如 DCIP,DMDQ、茚三酮,快速紅色美聯(lián)鹽和 2,7-二氯熒光素等已被用來(lái)測(cè)定維生素 C 的含量,其中 DCIP 被研究得最多。它被列入正式的滴定方法,不同國(guó)家的藥典 19 - 21 均有收載,同時(shí)也成為了各類(lèi)比色法的基礎(chǔ)。藍(lán)色染料(DCIP)在加入抗壞血酸后褪成無(wú)色,如圖 1 所示。但它在酸性溶液中呈粉紅色。使用該染料,可在人尿中和加工過(guò)的西紅柿中檢測(cè)出抗壞血3酶 33 - 35 比
6、色法測(cè)定市場(chǎng)上的維生素 C 片劑、水果和蔬菜中抗壞血酸的含量,在 358 nm 或 320 nm 處測(cè)量吸光度。結(jié)果得到的產(chǎn)物是氧化鄰苯二胺/1,4二胺,該物質(zhì)是被抗壞血酸氧化酶或過(guò)氧化物酶氧化得到的,在過(guò)氧化氫溶液中,pH 值為 5.3 ??箟难岜宦然趸⒂?DHAA 4,5 取代苯二胺 36 縮合,從而生成喹喔啉衍生物,用于吸光度的測(cè)量。該中涉及 4 - 硝基- 1 ,2 -苯二胺 37 ( λmax = 375 nm )的方
7、法非常復(fù)雜,工作量太大。因?yàn)樗婕霸S多耗時(shí)的步驟,包括用陰離子層析柱純化樣品。不久以前,對(duì)藥品、食品和生物樣本中已被氧化和稀釋的維生素 C 含量的測(cè)定已引起人們的重視。因?yàn)?AA 和 DHAA 氧化還原物是許多生物系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分。各類(lèi)研究員 38 - 45 在不同的實(shí)驗(yàn)室完成了用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定兩個(gè) AA 和 DHAA。Rose 和 Nahrwold38 確定在 254 nm 和 210 nm 紫外吸收波長(zhǎng)處測(cè)定 AA 和
8、 DHAA,可用于分析食品、生物樣品和醫(yī)藥制劑。 Graham和 Donald39,使用 62.5 毫米縮聚原磷酸離子交換柱( Aminex - HPX 87H )在波長(zhǎng) 254 nm 處對(duì)食物樣本進(jìn)行分析。這兩種方法也被用于測(cè)定蔬菜樣品 40 中的含量,即使用紫外檢測(cè)器(254 nm)。Tessier 等人已報(bào)道一種對(duì)微量測(cè)定進(jìn)行驗(yàn)證的方法,微量測(cè)定就是用高效液相色譜熒光法測(cè)定血漿中被氧化和被稀釋的維生素 C 的含量,這種微量分析用高
9、效液相色譜熒光法僅需已步就可完成,而且可避免衍生物的干擾??箟难崤c取代苯可生成有色物質(zhì),如 m-二硝基苯在甲醛酒石酸和三硝基苯在酒石酸緩沖溶液中,此時(shí)測(cè)兩者中抗壞血酸,其濃度范圍分別為 2-50 μg/ml 和 0-125 μg/ml。間苯二酚 48 甲醇溶液在鹽酸酸性介質(zhì)中,與抗壞血酸反應(yīng)呈淡黃色顏色(λmax=425 nm),在 80-400 μg/ml 范圍內(nèi)服從比爾定律。4 -氯- 7-硝基苯并呋喃 49 與抗壞血酸在氫氧化鈉
10、溶液中生成藍(lán)綠色物質(zhì)。用 50%(V/V)的水丙酮溶液稀釋反應(yīng)物后在 582 nm 處測(cè)量吸光度。在 5-20 μg/ml 濃度范圍服從比爾定律,只有當(dāng)遠(yuǎn)離陽(yáng)光和日光燈直接照射,該有色物質(zhì)才能穩(wěn)定存在 30 分鐘。據(jù)報(bào)道:該方法能避免所有其他維生素和存在于多種維生素制劑中的礦物質(zhì)的干擾,并可用于藥物,新鮮果汁和蔬菜的分析。哈什米等人 50 提出了一種以 2,3,5-三苯基氯化物與抗壞血酸在堿性介質(zhì)中的反應(yīng)為基礎(chǔ)的方法。這個(gè)粉紅色溶液可允
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