鄰二氮菲分光光度法測定鐵

1、實驗十二 實驗十二 鄰二氮菲分光光度法測定鐵（ 鄰二氮菲分光光度法測定鐵（3 學時） 學時）一、實驗目的 一、實驗目的1. 掌握用鄰二氮菲分光光度法測定鐵的原理和方法。2. 練習分光光度計的操作技術。3. 學會吸收曲線的制作，并選擇測量鐵的適宜波長。二、實驗原理 二、實驗原理鄰二氮菲（又稱鄰菲羅啉）是測定微量鐵的較好試劑。在 pH2～9 的溶液中，試劑與Fe2＋生成穩(wěn)定的紅色配合物，其 logKf＝21.3，摩爾吸光系數(shù) ε510＝1

2、.1 × 104，其反應式如下：NN NNFe2 + 3 + Fe3+ 2生成的紅色配合物的最大吸收峰在 510nm 處。本方法的選擇性很高，相當于含鐵量40 倍的 Sn2＋、 Al3＋、 Ca2＋、 Mg2＋、 Zn2＋、 SiO32－， 20 倍的 Cr3＋、 Mn2＋、 V(Ⅴ) 、 PO43－，5 倍的 Cu2＋、 Co2＋等均不干擾測定。Fe3＋也能與鄰二氮菲反應生成淡藍色配合物，因此，在顯色前，首先用鹽酸羥胺把 F

3、e3＋離子還原為 Fe2＋離子，其反應式如下：4Fe3＋ + 2NH2OH·HCl → 2Fe2＋ + N2↑ + 2H2O + 4H＋ + 2Cl－測定時，pH 值控制在 5 左右， 酸度高時， 反應進行較慢，酸度太低，則 Fe2＋離子水解，影響顯色。三、儀器和試劑 三、儀器和試劑(一)儀器分光光度計 1 臺，50mL 容量瓶 8 個，1mL 吸量管 1 支，2mL 吸量管 2 支，5mL 吸量管 2 支，10mL 吸量管

4、1 支。(二)試劑 試劑(1)20μg·mL－1 鐵標準溶液：準確稱取 0.1727g NH4Fe(SO4)2·12H2O 于燒杯中，加入20mL1︰1 的 HCl 溶液和少量水， 溶解后定量轉至 1000mL 容量瓶中， 稀釋至刻度， 搖勻。即 20μg·mL－1 的 Fe3＋標準溶液。(2)0.15％鄰二氮菲溶液（臨用時配制） 。(3)10％鹽酸羥氨溶液（臨用時配制） 。(4)l mol·L－

5、1NaAc 溶液。四、實驗內容 四、實驗內容(一)吸收曲 吸收曲線的繪制用吸量管移取 0.00、5.00mL 的 20μg·mL－1Fe3＋標準溶液于 2 只 50mL 容量瓶中，各加入 1mL10％鹽酸羥氨溶液，搖勻，加入 5mL 1mol·L－1NaAc 溶液和 2mL0.15％鄰二氮菲溶液， 用水稀釋至刻度，搖勻。以試劑空白溶液為參比溶液， 用分光光度計在 430～570nm 間， 每隔 20nm 測定一次吸

6、光度 A， 然后以波長 λ 為橫坐標，吸光度 A 為縱坐標繪出吸收曲線，從而選擇測量鐵的適宜波長。(二)標準曲 準曲線的繪制分別吸取 0.00、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL 20μg·mL－1 的 Fe3＋標準溶液于 6 只已編號的 50mL 容量瓶中，各加入 1mL10％鹽酸羥氨溶液，充分搖勻后加入5mL 1mol·L－1NaAc 溶液和 2mL0.15％鄰二氮菲溶液，用水稀

7、釋至刻度，搖勻。以試劑空白為參比溶液，用分光光度計，在 510nm 處分別測定各溶液的吸光度，然后繪制標準曲線。(三)未知溶液中 未知溶液中鐵含量 含量測定用吸量管吸取 5.00mL 未知液于 50mL 容量瓶中， 其它步驟均同上，測定其吸光度。據(jù)未知液的吸光度， 在標準曲線上查出 5.00mL 未知液中的鐵含量，并以每毫升未知液中含鐵微克數(shù)表示。00 5 ml g μ Fe1.的微克數(shù) 從標準曲線上查出的鐵 的含量 - ? ? ） （

8、思考題 思考題1．Fe3＋離子標準溶液在顯色前加鹽酸羥胺的目的是什么？如測定一般鐵鹽的總鐵量，是否需要加鹽酸羥胺？2．如用配制已久的鹽酸羥胺溶液，對分析結果將帶來什么影響？3．為什么在分光光度法中必須使用參比溶液？4．顯色時，加入還原劑、緩沖溶液、顯色劑的順序可否顛倒？為什么？5．何謂吸收曲線？何謂標準曲線？各有何實際意義？6．吸光度 A 與百分透光率 T 之間的關系如何？分光光度法測定時，A 值取什么范圍為宜？為什么？怎么來加以控制？