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1、細(xì)胞名稱細(xì)胞名稱293293和293T293T種屬人組織來(lái)源293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系,293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生,同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原,含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)??梢詮?fù)制。用Ca3(PO4)2轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50%。蛋白表達(dá)水平高,轉(zhuǎn)染后23天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測(cè)到表達(dá)的蛋白。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞是過(guò)表達(dá)蛋白并獲得細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。形態(tài)特點(diǎn)上皮細(xì)胞致瘤性產(chǎn)物或抗
2、原大T抗原染色體核型亞三倍體人細(xì)胞系。染色體眾數(shù)為64,30%的細(xì)胞有64條染色體。4.2%的細(xì)胞染色體數(shù)目更多。多數(shù)細(xì)胞der(1)t(115)(q42q13)der(19)t(319)(q12q13)der(12)t(812)(q22p13)還有四條標(biāo)記染色體,有的細(xì)胞另有5條標(biāo)記染色體。der(1)與M8(Xq)常常成對(duì)出現(xiàn)。N17與N22各有四條。值得注意的是多數(shù)細(xì)胞有三條X染色體,兩條Xq,一條Xp。生長(zhǎng)特性粘附文獻(xiàn)評(píng)價(jià)293
3、細(xì)胞系是原代人胚腎細(xì)胞轉(zhuǎn)染5型腺病毒(Ad5)DNA的永生化細(xì)胞。[RF32725]表達(dá)轉(zhuǎn)染的腺病毒5的基因。[RF32725]早期報(bào)道認(rèn)為此細(xì)胞含有Ad5基因組左端和右端[RF32764],現(xiàn)已清楚僅含有左端序列。[RF50113]此細(xì)胞系人腺病毒滴度高。室溫不貼壁,37℃幾日后重新貼壁。表達(dá)由整合素beta1亞基與?;Y(jié)合素受體alphav亞基組成的?;Y(jié)合素細(xì)胞表面受體.[RF33793]TheAd5wasclonedsequen
4、ceditwasdeterminedthatacolinearseqmentfromnts1to4344isintegratedintochromosome19(19q13.2).傳代293:棄培養(yǎng)基,含0.25%胰酶0.03%EDTA消化液洗滌,棄去,加12ml消化液室溫或37℃消化。加入新鮮培養(yǎng)基,吸出,分到新培養(yǎng)皿中。一傳二至一傳四。293T:生長(zhǎng)快,通常倍增時(shí)間不到一天。每3~4天1:10至1:20稀釋,5%CO2條件下培養(yǎng)。細(xì)
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