有害成分的測定

1、毒素,生物毒素（Biotoxin)是一大類生物活性物質(zhì)的總稱，包括動物毒素、植物毒素和微生物毒素。生物毒素已經(jīng)對食品安全和人類健康構(gòu)成了威脅，因此，食品/飼料中生物毒素的研究也日益顯現(xiàn)出其必要性和迫切性。,第一節(jié) 食品中內(nèi)源性毒素的測定,毒蘑菇 毒蘑菇所含有的有毒成分可分為生物堿類、肽類及其他化合物，根據(jù)中毒的癥狀可分為胃腸毒素、神經(jīng)精神毒素、血液毒素、原漿毒素和其他毒素五類。磨菇毒素的檢驗常用紙層析法或薄層層析法。,有毒

2、蕈類（俗稱蘑菇）,白毒傘,,在我國目前已經(jīng)鑒定的蕈類中，可食用的近300多種，有毒的近80多種，劇毒可致死的不到10種。,大鹿花菌,分布于我國吉林、西藏等地區(qū)?？赡苡卸?，毒性因人而異，不可食用。,白毒鵝膏菌,分布于我國河北、吉林、江蘇、福建、安徽、陜西、甘肅、湖北、湖南、山西、廣西、廣東、四川、云南、西藏等地?！　〈四⒐綐O毒。毒素為毒肽和毒傘肽。中毒癥狀主要以肝損害型為主，死亡率很高。,毒蠅鵝膏菌,分布于我國黑龍江、吉林、四川、西藏、

3、云南等地。 此蘑菇因可以毒殺蒼蠅而得名。誤食后約6小時以內(nèi)發(fā)病，產(chǎn)生劇烈惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉及精神錯亂，出汗、發(fā)冷、肌肉抽搐、脈搏減慢、呼吸困難或牙關(guān)緊閉，頭暈眼花，神志不清等癥狀。使用阿托品療效良好。,細(xì)環(huán)柄菇,分布于黑龍江、吉林、山西、江蘇、云南、廣東、香港、青海、新疆和西藏等地。 　　可食用，但有人認(rèn)為有毒，不宜隨意采食。,毛頭鬼傘,毒粉褶菌,介味滑銹傘,美麗粘草菇,粉紅枝瑚菌,海洋藻類毒素,海洋藻類毒

4、素是由海洋中的微藻或海洋細(xì)菌產(chǎn)生的一類生物活性物質(zhì)的總稱。由于這些毒素通常是通過海洋貝類或魚類等生物媒介造成人類中毒的，因此這些毒素常被稱作貝毒或魚毒。常見的貝毒有麻痹性貝毒， 腹瀉性貝毒，記憶缺失性貝毒，神經(jīng)性貝毒等。我國浙江、福建、廣東等地曾多次發(fā)生貝類中毒，導(dǎo)致中毒的貝類有蚶子、花蛤、香螺、織紋螺等常食用的貝類。,貝類毒素的檢測,1、小白鼠生物測定法取稀釋的貝類提取液lmL注射到18-22g重的 小白鼠腹腔，測定死亡時間，

5、規(guī)定15min致死的 量為1MU。2、化學(xué)檢測法在堿性條件下用雙氧水氧化PSP使其生成熒光 物質(zhì)，再測其熒光值。3、高壓液相色譜法,防止貝類毒素中毒的措施,①定期對海水進行監(jiān)測，及時掌握藻類和貝類的活動情況。當(dāng)海水中大量存在有毒的藻類時， 應(yīng)同時監(jiān)測當(dāng)時捕撈的貝類所含的毒素量。②食用貝類食品時，要反復(fù)清洗、浸泡，并采取 適當(dāng)?shù)呐腼兎椒?，以清除或減少食品中的毒素。③制定該類毒素在食品中限量標(biāo)準(zhǔn)。④發(fā)現(xiàn)中毒者，應(yīng)及時采取

6、措施，結(jié)合對癥 治療，采取催吐、洗胃、導(dǎo)瀉等措施，盡 早排除體內(nèi)毒素。,根據(jù)中毒癥狀分類,麻痹性貝毒麻痹性貝毒是分布最廣，危害最大的一類毒素。它是由甲藻產(chǎn)生的一類四氫嘌呤毒素的總稱。主要癥狀表現(xiàn)為面部、肢端麻木，嚴(yán)重的會因呼吸肌麻痹而導(dǎo)致死亡。腹瀉性貝毒腹瀉性貝毒毒素主要來自甲藻中的鰭藻屬和原甲藻屬。主要癥狀為嘔吐和腹瀉，長期毒性效應(yīng)可能導(dǎo)致癌癥。,記憶缺失性貝毒記憶缺失性貝毒的活性成分為軟骨藻酸。中毒者表現(xiàn)出腸道癥狀

7、和神經(jīng)紊亂，嚴(yán)重的有短暫的記憶喪失現(xiàn)象。神經(jīng)性貝毒神經(jīng)性貝毒是到目前為止危害范圍較小的一類毒素。表現(xiàn)出神經(jīng)中毒的癥狀。,腹瀉性貝毒檢測 腹瀉性貝毒的分析主要采用熒光化合物ADAM標(biāo)記－反相高效液相色譜分析的方法。由于ADAM不穩(wěn)定，而且不易獲得，因此又有了一些改進的方法，包括采用不同的衍生劑和提取方法。但由于目前樣品前處理及色譜過程，對DSP結(jié)構(gòu)類似物不能有效分離，因此HPLC法測定DSP效果不是很理想。目前HPLC-MS

8、技術(shù)已用于DSP的分析，成為DSP液相色譜法的重要補充。,麻痹性貝類毒素檢測 麻痹性貝毒（PSP）是一類四氫嘌呤化合物，這類毒素通常是非結(jié)晶、高極性、難揮發(fā)的物質(zhì)，檢測方法主要采用液相色譜法。由于PSP本身生色基團很弱，不易被檢測，因此檢測前須氧化修飾，將PSP分子的環(huán)結(jié)構(gòu)氧化成熒光生色基團。LC/MS和毛細(xì)管電泳/質(zhì)譜（CE/MS）聯(lián)用技術(shù)已用于麻痹性貝毒分析。,神經(jīng)性貝毒檢測 神經(jīng)性貝毒（NSP）色譜分析包括薄層層析法（T

9、LC）和HPLC。TLC不夠靈敏，目前已很少應(yīng)用。HPLC法由于流出物背景干擾，在檢測靈敏度和選擇性方面存在問題。近年來，HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)開始應(yīng)用于神經(jīng)性貝毒分析。,河豚毒素(Tetrodotoxin) 河豚(Spheroides vermicularis)又名鈍魚，它的某些臟器及組織中均含有毒素，是一種神經(jīng)毒，其毒性穩(wěn)定（220℃），經(jīng)炒煮、鹽淹和日曬等均不能被破壞，可使神經(jīng)中樞和神經(jīng)末梢發(fā)生麻痹。中毒癥狀始發(fā)于使用后10秒，

10、先是口腔麻木和刺痛，繼發(fā)為虛弱、麻痹、血壓降低和脈搏快而弱，如不及時治療可出現(xiàn)死亡。,河豚魚,河豚毒素的毒性,河豚毒素是一種毒性很強的神經(jīng)毒素，它對神經(jīng)細(xì)胞膜的鈉離子通道有專一性作用，能阻斷神經(jīng)沖動的傳異，使神經(jīng)末梢和中樞神經(jīng)發(fā)生麻痹。中毒初期表現(xiàn)為感覺神經(jīng)麻痹，全身不適，繼而惡心、嘔吐、腹痛，O唇、舌尖及指尖刺疼發(fā)麻，同時引起外周血管擴張，使血壓急劇下降，最后出現(xiàn)語言障礙，瞳孔散大，中毒者常因呼吸和血管運動中樞麻痹而死亡。死亡率高達(dá)

11、50％。,防止河豚毒素中毒的措施,由于河豚毒素耐熱，1200攝氏度加熱60min才可破壞，一般家庭烹調(diào)方法難以去除毒素，故最有效的預(yù)防中毒措施：將河豚集中處理，禁止出售。在加工處理前必須先去除內(nèi)臟、頭、皮等含毒部位，洗凈血污，經(jīng)鹽腌、曬干后，安全無毒方可出售，其加工廢棄物應(yīng)妥善銷毀。,河豚毒素的檢測,2、定量檢測,河豚毒素測定方法,小鼠生物試驗法免疫化學(xué)測定法毛細(xì)管等速電泳電壓檢測法熒光法TLC/火焰離子檢測法TLC/快原子

12、轟擊質(zhì)譜法HPLCHPLC/MS,HPLC-MS測定河豚魚中河豚魚毒素1.前處理 將河豚魚肉或皮中的河豚魚毒素用乙醇－乙酸－水（75：1：14）提取，過濾后，提取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，用離子交換樹脂凈化，用10％乙酸溶液洗脫。洗脫液經(jīng)濃縮后用活性炭凈化，用乙醇－乙酸－水（20：1：79）洗脫。洗脫液經(jīng)濃縮后用水定容后供HPLC-MS測定。,2.測定HPLC－MS條件：色譜柱：Shimpack CLC-ODS柱流動相：0.06

13、M七氟丁酸－0.001M乙酸銨（pH5.0）流速：0.5mL/min樣品不經(jīng)柱前衍生加速電壓：20kV,真菌毒素,真菌毒素（Mycotoxins）是某些絲狀真菌產(chǎn)生的具有生物毒性的次級代謝產(chǎn)物，這些毒性真菌包括曲霉、青霉、鐮刀霉、鏈格孢酶、棒孢酶和毛殼酶等。最先被分離純化的真菌毒素是麥角生物堿（Ergot Alkaloid, 1875)和青霉酸（Penicillic Acid, 1913)。然而，對真菌毒素的真正研究卻是從196

14、2年黃曲霉毒素的發(fā)現(xiàn)開始的。,黃曲霉毒素（Aflatoxin)黃曲霉和寄生曲酶是產(chǎn)生黃曲霉毒素的主要菌種，其他曲霉、毛霉、青霉、根霉等也可以產(chǎn)生黃曲霉毒素。黃曲霉毒素最常見于花生及花生制品，玉米、棉子和一些堅果類食品中，主要有黃曲霉毒素B1，B2，G1及G2等10多種。其中以黃曲霉毒素B1存在量最大且毒性最大。,黃曲霉毒素是已被證實的致癌物，其中黃曲霉毒素B1、M1是強致癌物。黃曲霉毒素作用機理是影響細(xì)胞膜，抑制RNA合成并干擾某

15、些酶的感應(yīng)方式。中毒癥狀無特異表現(xiàn)，臨床可表現(xiàn)為發(fā)育遲緩、腹瀉、肝腫大、肝出血、肝硬化、肝壞死、脂肪滲透和膽道增生等。1993年WHO的癌癥研究機構(gòu)將其劃定為1類致癌物。它是致癌力最強的生物毒素，人類原發(fā)性肝癌的主要致病因素之一。,黃曲霉毒素分析,食品中黃曲霉毒素的測定，主要有TLC, ELISA, HPLC等方法。TLC法靈敏度和重現(xiàn)性較差；ELISA重現(xiàn)性差，易受樣品基質(zhì)干擾；HPLC法靈敏度和準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，因此已成為黃

16、曲霉毒素分析的主要手段。,HPLC法測定黃曲霉毒素，一般使用靈敏度和選擇性較好的熒光檢測器。在反相色譜中，B1和G1兩種異構(gòu)體熒光強度很弱，需進行衍生化，提高其熒光強度，靈敏度才能滿足一般食品法規(guī)的限量。衍生化的方法一般有柱前和柱后兩類，柱前衍生一般使用三氟乙酸，柱后衍生有碘液、過溴化吡啶溴以及電化學(xué)等方法。,測定方法： 主要有薄層色譜法、微柱色譜法及帶熒光檢測器的液相色譜法等，其中薄層色譜法為我國AFT標(biāo)準(zhǔn)分析方法中的第一法。

17、 目前，實驗室使用最多的是酶聯(lián)免疫吸附劑（ELISA）試劑盒對AFTB1 的殘留量進行測定,酶聯(lián)免疫吸附劑（ELISA）試劑盒是依據(jù)GB/T5009.22-2003第二法的原理制成的，測定的實質(zhì)是采用酶標(biāo)記的抗體或抗原與樣品中的抗原或抗體間進行的抗原—抗體反應(yīng)，加入顯色液后，通過目測觀察顏色來做快速的半定量的結(jié)果分析。 測定原理：樣品中的AFTB1經(jīng)提取、脫脂、濃縮后與定量的特異性抗體（抗黃曲霉毒素 B1單克隆抗體）反應(yīng)，多余的游

18、離抗體則與酶標(biāo)板內(nèi)的包被抗原（AFB1-BSA人工抗原）結(jié)合，加入酶標(biāo)記物和底物后顯色，與標(biāo)準(zhǔn)比較測定含量。,注意事項：（1）由于食品中AFT分布很不均勻，特別是顆粒樣品，為得到可靠的分析結(jié)果，采樣時必須注意樣品的代表性。（２）酶聯(lián)免疫吸附劑（ELISA）試劑盒應(yīng)放在４ ℃冰箱中避光保存，并在保質(zhì)期內(nèi)使用。（３）由于 AFT是一劇毒且強致癌性物質(zhì)，使用時應(yīng)注意安全防護，實驗時應(yīng)戴口罩，戴手術(shù)手套。若衣服被污染，須用50%次氯酸鈉溶

19、液浸泡15～30min后，再用清水洗凈。并注意做好實驗后的清洗消毒工作，對于剩余的AFT標(biāo)液或陽性樣液，應(yīng)先用50%次氯酸鈉處理后方可倒到指定的地方，實驗中所用的或被污染的玻璃器皿須經(jīng)50%的次氯酸鈉溶液浸泡５min再清洗之。實驗完畢應(yīng)用50%的次氯酸鈉清洗消毒實驗臺等。,第二節(jié) 食品中有毒微生物的測定,一、金黃色葡萄球菌的生物學(xué)特性,1、形態(tài)與染色：(staphylococcus aureus)  　　　金黃色葡萄球菌

20、無芽胞、鞭毛，大多數(shù)無莢膜?！　　〉湫偷慕瘘S色葡萄球菌為球型，直徑0.8 mm左右，顯微鏡下排列成葡萄串狀?！　　　　「锾m氏染色陽性。  　　 　　　　附： 金黃色葡萄球菌的顯微照片　　　　 　　　　金黃色葡萄球菌的染色照片　　　　

21、 　　　　金黃色葡萄球菌的掃描電鏡照片　　　　 　　　　金黃色葡萄球菌的透射電鏡照片,金黃色葡萄球菌的顯微照片 　　 典型的金黃色葡萄球菌為球型，直徑0.8 mm左右，顯微鏡下排列成葡萄串狀。,金黃色葡萄球菌革蘭氏染色顯微照片 　　　金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛，大多數(shù)無莢膜?！「锾m氏染色陽性。,金黃色葡萄球菌的掃描電鏡照

22、片Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7.9 micron,金黃色葡萄球菌的透射電鏡照片Tem x12000 digitized Staphylococcus aureus,金黃色葡萄球菌的檢驗增菌及分離培養(yǎng) 吸取5 mL混懸液，接種于7.5%氯化鈉肉湯或胰酪胨大豆肉湯50 mL培養(yǎng)基內(nèi)，36℃±1℃培養(yǎng)24 h，轉(zhuǎn)種血平板和Baird-Parker平板， 36℃&

23、#177;1℃培養(yǎng)24 h，挑取血平板上金黃色（有時為白色）菌落進行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗。,血平板上金黃色葡萄球菌菌落形態(tài) 金黃色葡萄球球菌的單個菌落在血平板上呈金黃色，有時也為白色，大而突出、圓形、不透明、表面光滑，周圍有溶血圈。,,金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)　　　　在Baird-Parker瓊脂平板上菌落呈圓形，表面光滑、凸起、濕 潤，直徑2～3 mm?；液谏梁谏?，有光澤，常有淺色（

24、非白色）的邊緣，周圍繞以不透明圈 （沉淀），其外常有一清晰帶。當(dāng)用接種針觸及菌落時具有黃油樣粘稠感。有時可見到不分解脂肪的菌株，除沒有不透明圈和清晰帶外，其他外觀基本相同。從長期貯存的冷凍或脫 水食品中分離的菌落，其黑色常較典型菌落淺些，且外觀可能較粗糙，質(zhì)地較干燥。,金黃色葡萄球菌在甘露醇鹽平板上的菌落 Staphylococcus aureus on mannitol salts agar,3、血漿凝固酶試驗：

25、 吸取1:4新鮮兔血漿0.5 mL，放入小試管中，再加入培養(yǎng)24 h的金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯培養(yǎng)物0.5 mL，振蕩搖勻，置 36±1℃溫箱或水浴內(nèi)，每半小時觀察一次，觀察6 h，如呈現(xiàn)凝固,即將試管倒置或 傾斜時，呈現(xiàn)凝塊者，被認(rèn)為陽性結(jié)果。同時以已知陽性和陰性葡萄球菌株及肉湯作為對照。,金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測 一、動物學(xué)試驗　主要用幼貓和猴。 二、血清學(xué)試驗　腸毒素作為抗原，可以和特異性抗體發(fā)生結(jié)合性反應(yīng)

26、，產(chǎn)生可見沉淀。 用血清學(xué)反應(yīng)檢驗金黃色葡萄球菌腸毒素，方法主要有： 免疫瓊脂擴散法 反向間接血凝試驗 免疫熒光法 酶聯(lián)免疫吸附法,,金黃色葡萄球菌快速檢測方法　　目前，隨著研究的深入，一些快速和采用現(xiàn)代技術(shù)的檢測方法不斷出現(xiàn)，這些新的快速方法，一般都縮短了傳統(tǒng)檢測方法的時間，能夠較快地得到檢測結(jié)果，并且操作相對簡單?！　”热纾悍▏防锇９旧a(chǎn)的RPF培養(yǎng)基、API檢測系統(tǒng)等。梅里埃公司生產(chǎn)的mini

27、VIDAS利用熒光免疫的方法檢測葡萄球菌腸毒素，在儀器上45 min可以得到結(jié)果。,法國梅里埃公司生產(chǎn)的RPF培養(yǎng)基,凝固酶陽性葡萄球菌 : 菌落周圍形成沉淀圈(例) 金黃色葡萄球菌,,,-,,,+,將兔血漿包括在培養(yǎng)基中作為直接確認(rèn)菌落的手段,金黃色葡萄球菌污染的控制防止食品污染　　防止帶菌人群對各種食物的污染：定期對生產(chǎn)加工人員進行健康檢查，患局部化膿性感染（如疥瘡、手指化膿等）、上呼吸道感染（如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病

28、等）的人員要暫時停止其工作或調(diào)換崗位。,,金黃色葡萄球菌污染的控制防止食品污染　　防止金黃色葡萄球菌對奶及其制品的污染：如牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房，不能擠用患化膿性乳腺炎的牛奶；奶擠出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生成、細(xì)菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶為原料，注意低溫保存?！　θ庵破芳庸S，患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位，經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進行加工生產(chǎn)。,,防止金黃色葡萄球菌腸毒素生成 　　應(yīng)在低溫和通

29、風(fēng)良好的條件下貯藏食物，以防腸毒素形成；　　在氣溫高的春夏季，食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超過6小時，并且食用前要徹底加熱。,第三節(jié) 食品加工、貯藏過程中產(chǎn)生的有毒、有害物質(zhì)的測定,苯并芘的來源及性質(zhì)：　　苯并芘是已發(fā)現(xiàn)的200多種多環(huán)芳烴中最主要的環(huán)境和食品污染物，是一種強烈的致癌物質(zhì)，對機體各器官，如對皮膚、肺、肝、食道、胃腸等均有致癌作用。 加工過程中苯并芘對食品的污染主要是針對熏制、烘烤和煎炸等食品而言的，該類食

30、品中的苯并芘一方面來源于煤、煤氣等不完全燃燒，另一方面來源于食品中的脂肪、膽固醇等成分的高溫?zé)峤饣驘峋?。另外，由于輸送原料或產(chǎn)品的橡膠管道，包裝糖果、,棒冰、面包等用的蠟紙，食品加工機械用的潤滑油等都可能含有苯并芘，這樣，就可能使得某些食品在加工環(huán)節(jié)中被污染。 而且人們生活常用的煤、石油、天然氣、木材等，當(dāng)不完全燃燒時都會產(chǎn)生苯并芘；燒瀝青和噴灑瀝青時會有大量苯并芘散發(fā)在空氣中，這些都可能造成污染，進而污染食品原料。,苯并芘又稱

31、 3，4-苯并芘，是一種由五個苯環(huán)構(gòu)成的多環(huán)芳烴。常溫下苯并芘為淺黃色針狀結(jié)晶，性質(zhì)穩(wěn)定，微溶于水、乙醇、甲醇，易溶于環(huán)己烷、己烷、苯、甲苯、二甲苯、丙酮等有機溶劑。在有機溶劑中，用波長365nm紫外線照射時，可產(chǎn)生典型的紫色熒光。苯并芘在堿性條件下較穩(wěn)定。在常溫下不與濃硫酸作用，但能溶于濃硫酸；能與硝酸、過氯酸、氯磺酸起化學(xué)反應(yīng)，　人們可利用這一性質(zhì)來消除苯并芘。 食品中苯并(a)芘在的測定方法有薄層層析法、

32、熒光分光光度法、氣相色譜和液相色譜法，這里介紹液相色譜法。,原理：利用氫氧化鉀的甲醇水溶液皂化樣品中的脂肪，多環(huán)芳烴以環(huán)己烷抽提，再用硫酸凈化，經(jīng)Sephadex LH-20色譜柱富集樣品中的多環(huán)芳烴，再通過液相色譜儀中的色譜柱，將苯并芘從多環(huán)芳烴物質(zhì)中分離出來。與苯并芘標(biāo)樣比較定量。 儀器： (1)液相色譜儀： 色譜柱：ODS柱，柱長250mm，Φ4mm； 柱溫：30℃； 流動相：75％甲醇； 流速：１.５m

33、L／min。 (2)檢測器：紫外檢測器，波長287nm,樣品處理：（１）取熏烤肉樣用熱水洗去表面黏附的雜質(zhì)、涼干、去骨頭，將可食部分粉碎后備用。（２）樣品的皂化、提取、凈化、富集。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品測定計算說明：　硫酸能很好的凈化樣品中的脂肪和其他微量雜質(zhì)，硫酸濃度高凈化效果好，而硫酸濃度過高會引起多環(huán)芳烴化合物的回收率降低。選擇(6+4)的硫酸效果較好。,食品中N-亞硝胺的測定－比色法,概述： 食物中的亞硝胺

34、的來源主要有：（1）由于腌制時鹽中亞硝酸鹽的作用，如咸魚、咸肉（2）加熱干燥時，空氣中氮氣氧化成氮氧化物的作用，如啤酒、奶粉、豆制品。 所以，亞硝胺檢出率最高的食品是咸魚（尤為海產(chǎn)品）、啤酒、腌肉制品、奶粉及豆制品等。而新鮮蔬菜、水果及新鮮肉類檢出率很低。 性質(zhì)：N—亞硝酸胺的化學(xué)性質(zhì)較活潑，在酸性條件下可分解為相應(yīng)的酰胺和亞硝酸，在堿性條件下可快速分解為重氮烷。N-亞硝胺在紫外光照射下可發(fā)生光分解反應(yīng)。,測定意義：

35、亞硝胺對人體有害，是一種有強致癌作用的物質(zhì)。所以常常需要對食品進行亞硝胺類化合物的檢驗。測定方法：食品中揮發(fā)性N-亞硝胺類化合物的測定，可采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜-熱能分析儀法及分光光度比色法。這里介紹分光光度比色測定法分光光度比色法測定食品中N-亞硝胺的原理：,食品中揮發(fā)性亞硝胺可采用夾層保溫水蒸氣蒸餾加以純化，在紫外光的照射下，亞硝胺分解釋放亞硝酸根。通過強堿性離子交換樹脂濃縮，在酸性條件下，與對位氨基苯磺酸形成

36、重氮鹽，再與N-萘乙烯二胺二鹽酸鹽形成紅色偶氮染料來測定。顏色的深淺與亞硝胺的含量成正比，此法可用于測定揮發(fā)性N-亞硝胺總量。,操作方法： (1)亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 (2)樣品制備： 液體樣品：根據(jù)樣品中亞硝胺的含量稱取樣品10.0～20.0g，移人100mL容量瓶中，加入氫氧化鈉溶液使其濃度為1mL／L，搖勻后過濾，收集濾液待測定。 固體樣品，取經(jīng)搗碎或研磨均勻的樣品20.0g，加入正丁醇飽和的lm