血常規(guī)直方圖解析

1、血常規(guī)直方圖解析,,SYSMEX,一.電阻抗法血細胞分析儀檢測原理,血細胞與等滲電解質(zhì)溶液相比為相對的不良導(dǎo)體，其電阻值大于稀釋液的電阻值。當(dāng)血細胞通過檢測器小孔管微孔的孔徑感受區(qū)時，檢測器內(nèi)外電極之間的恒流源電路上電阻值瞬間增大，造成兩極之間電壓的變化，產(chǎn)生一個電壓脈沖信號。每次檢測中產(chǎn)生的脈沖信號數(shù)，即相當(dāng)于檢測出的細胞數(shù)。,操作時，位于小孔兩側(cè)的電極產(chǎn)生恒定電流。根據(jù)歐姆定律電壓變化與電阻變化成正比，電阻值又同細胞體積成正比，血細

2、胞體積越大，電壓越高，在甄別器上的脈沖幅度就越大，各種大小不同細胞產(chǎn)生的脈沖信號分別送入儀器內(nèi)電腦的各個通道，經(jīng)運算得出各種細胞參數(shù)。目前，多數(shù)儀器在給出細胞數(shù)據(jù)結(jié)果的同時還提供細胞群體大小分布情況圖形，稱之為細胞體積直方圖。,血細胞分析儀在進行細胞分析時，將每個細胞的脈沖根據(jù)其體積大小分配并存儲在相應(yīng)的體積通道中，每個通道收集的數(shù)據(jù)被統(tǒng)計出相對數(shù)，表示在Y軸上，體積數(shù)據(jù)以飛升(fl)為單位，表示在X軸上?？蓪准毎w積從30～450f

3、l分為256個通道，每個通道1.64fl，依據(jù)體積大小分別將其放在不同的通道中，得到白細胞體積分布直方圖。初步確認：第一群是小細胞區(qū)，主要是淋巴細胞，體積在35～90fl之間；第二群是中間細胞群，主要是單核細胞，體積在90～160fl，；第三群為大細胞區(qū)，主要是中性粒細胞，它分葉多，顆粒多，體積可大至160fl以上。,,Y,X,血小板和紅細胞共用一個小孔管。正常人紅細胞體積和血小板體積有明顯的界限。因此血小板計數(shù)準(zhǔn)確容易。當(dāng)血細胞懸液中

4、含有異常血細胞（如小紅細胞）時，劃分界限不清。為使血小板計數(shù)有較高的準(zhǔn)確性，計算機對血小板和紅細胞分布圖進行判斷，將血小板計數(shù)的上限閾值判定線放在紅細胞和血小板分布圖交叉部分的最低處計數(shù) 。,二.白細胞直方圖解析,三分類的血液分析儀一般都以電阻抗原理進行白細胞分類，儀器依據(jù)大多數(shù)正常形態(tài)的白細胞細胞在溶血素作用后的大小排列，人為設(shè)置了4個辨別線，將白細胞直方圖劃分三個區(qū)域，來辨別小白細胞、中白細胞和大白細胞。,1．白細胞直方圖的基本概念

5、,電阻抗原理 根據(jù)血細胞是非導(dǎo)電的性質(zhì)，懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細胞顆粒，在通過檢測小孔時可引起電阻的變化為基礎(chǔ)，對血細胞進行計數(shù)和體積測量。直方圖定義 以血細胞體積大小為橫座標(biāo)，不同體積的細胞出現(xiàn)的相對頻率為縱座標(biāo)，來描繪細胞群體分布情況的曲線圖形稱作血細胞直方圖。白細胞直方圖 在計數(shù)白細胞時，要加入溶血素使紅細胞破壞，此時白細胞膜受到破壞，細胞漿流失，使白細胞體積大小發(fā)現(xiàn)變化，因此需要強調(diào)的是在白細胞直方圖上細胞排列的順序不

6、是細胞的原始大小，而是經(jīng)溶血液修飾的細胞大小。,,圖1，加入溶血素前的細胞大小,N:10-14µmL:大12-15µm 小6-9µmM：12-20µmE:11-16µmB:10-12µm,RBC:平均7.2µmPLT：2-4µm,圖2.為加入溶血素后的細胞大小,←GRAN,,,RBC、PLT→,LYM→,MOEO→BASO,2．白細胞分

7、類原理,（一）辨別線的設(shè)置1.低辨別線（LD）： 在30至60fL之間自動尋找最適位置.2.高辨別線（UD）：定在300fL ,用作粒度分布異常監(jiān)視。3.辨別線1（T1）： 自動尋找從LD至UD之間白細胞分布曲線的波谷，第一波谷值設(shè)為“TROUGH”辨別線1（T1）.4. 辨別線2（T2）： 自動尋找從LD至UD之間白細胞分布曲線的波谷，第二波谷值設(shè)為“TROUGH”辨別線2（T2）.,（二）辨別線的作用1.對正常形態(tài)的白細胞

8、進行粒度分類 從以下兩圖可以直觀地看到白細胞分類情況,WL與T1之間為W-SCR％，相當(dāng)于LYM%；T1與T2之間為W-MCR%，相當(dāng)于MEX%單核、嗜酸、嗜堿T2與WU之間為W-LCR%，相當(dāng)于NEUT%。,2.監(jiān)視白細胞粒度分布的情況提供異常分布信息,白細胞粒度分布正常時，白細胞直方圖顯示三峰性分布，在低辨別線（LD）與高辨別線（UD）之間有兩個谷值（T1）和（T2）。當(dāng)谷值辨別線不能設(shè)定，或在設(shè)定的辨別線位置的度數(shù)比規(guī)定值

9、高時，將標(biāo)有白細胞粒度分布異常警號。下面將白細胞分布異常的警號按優(yōu)先順序來介紹，當(dāng)有兩個以上的警號符合時，將標(biāo)上優(yōu)先順序最高的警號。 1）WL：低辨別線（LD）的相對度數(shù)超過規(guī)定值。可能存在血小板聚集或較多的巨大血小板。（2）T1：當(dāng)?shù)谝还戎挡荒軟Q定時。 （3）T2：當(dāng)?shù)诙戎挡荒軟Q定時。（4）F1：小白細胞分布異常。T1的相對度數(shù)超過規(guī)定值。（5）F2：中白細胞分布異常。T1或T2的相對度數(shù)超過規(guī)定值。（6）F3：大白

10、細胞分布異常。T2的相對度數(shù)超過規(guī)定值。（7）WU：高辨別線（UD）的相對度數(shù)超過規(guī)定值?？赡転槿苎怀浞只虼嬖谳^多的異常細胞所致。（8）AG：為小于LD的粒子數(shù)超過規(guī)定值?？赡転檠“寰奂?。對血小板有異常警號。,（,3．白細胞粒度分布異常實例分析１．LD度數(shù)高： （1）當(dāng)LD度數(shù)高，存在T1和T2谷值的粒度分布時，WBC的所有參數(shù)將標(biāo)上警號WL。常見于存在紅細胞溶血不全，出現(xiàn)有核紅細胞，大血小板增多，血小板聚集，纖維蛋白析

11、出等現(xiàn)象時。,（2）當(dāng)LD高，有T1，沒T2的粒度分布分布時，在WBC、LYM%、LYM#結(jié)果上標(biāo)有WL，余分類結(jié)果不出現(xiàn)結(jié)果，但也有WL警號。,T2警號表示不能設(shè)定中間細胞與中性粒細胞之間的波谷鑒別線，常見于出現(xiàn)幼稚粒細胞、紅細胞溶血不全，標(biāo)本放置時間過長等情況。,（3）當(dāng)LD高，沒有T1、T2的粒度分布時，僅出現(xiàn)WBC結(jié)果，并標(biāo)有警號WL，其他分類參數(shù)均不輸出結(jié)果。？？？,（4）黃疸病人的特征性改變：由于黃疸病人紅細胞膜上脂質(zhì)含量增

12、多，蛋白質(zhì)含量減少，對溶血素的拮抗作用增加，因而使紅細胞難于破碎。,2. 沒有T1：不輸出白細胞分類結(jié)果，T1警號表示不能設(shè)定淋巴細胞與中間細胞之間的波谷鑒別線，常見于出現(xiàn)幼稚粒細胞、紅細胞溶血不全等情況。,3. 沒有T2T1高，T2沒有的粒度分布：WBC結(jié)果無警號，LYM％、LYM#結(jié)果標(biāo)有警號F1，余參數(shù)不輸出結(jié)果，但標(biāo)有警號T2。警號F1表示T1鑒別線位置上相對度數(shù)超過預(yù)定值。常見于存在幼稚粒細胞，單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細

13、胞增高，紅細胞溶血不全，標(biāo)本放置時間過長等情況。,4. T1高（1）僅T1高的粒度分布時：WBC、GRAN％、GRAN#結(jié)果無警號，LYM%、LYM#結(jié)果標(biāo)有警號F1，MXD％、MXD％結(jié)果標(biāo)有警號F2。警號F2表示T1或T2鑒別線位置上相對度數(shù)超過預(yù)定值。常見于存在原始細胞、幼稚粒細胞，單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞增高，紅細胞溶血不全，標(biāo)本放置時間過長等情況。,（2）T1高，T2高，：WBC結(jié)果標(biāo)有警號WU， LYM%、LYM#

14、結(jié)果標(biāo)有警號F1，MXD％、MXD％結(jié)果標(biāo)有警號F2，GRAN％、GRAN#結(jié)果標(biāo)有警號F3。警號F3表示T2鑒別線位置上相對度數(shù)超過預(yù)定值。常見于存在幼稚粒細胞，單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞增高，紅細胞溶血不全，標(biāo)本放置時間過長等情況。,5. T2高（1）僅T2高的粒度分布時：WBC、 LYM%、LYM#結(jié)果沒有警號，MXD％、MXD％結(jié)果標(biāo)有警號F2，GRAN％、GRAN#結(jié)果標(biāo)有警號F3。？？？,6. UD高：WBC結(jié)果標(biāo)有

15、警號WU，余參數(shù)的結(jié) 果都沒有警號。？？？,（7）LD以下的粒子數(shù)增多：PLT結(jié)果標(biāo)有警號AG。,圖例,四．小結(jié),1. 結(jié)果不輸出： T1負責(zé)監(jiān)視淋巴細胞區(qū)域和中間細胞區(qū)域，T2負責(zé)中間細胞區(qū)域和中性粒細胞區(qū)域，當(dāng)白細胞粒度分布的曲線異常，儀器在該分布曲線上找不到谷低T1或T2，或T1、T2同時找不到時，T1和T2辨別線負責(zé)監(jiān)視的細胞群結(jié)果就不輸出。2. 引起白細胞直方圖異常原因分析（1）病理因素：白細胞直方圖的變化，可反映血液中

16、白細胞群體的改變，但這種變化沒有特異性，引起血液學(xué)變化的病因不同，但其白細胞直方圖的變化相近，因此出現(xiàn)的提示警號就是給檢驗師的命令，要求我們進行顯微鏡復(fù)查血涂片。,（2）非病理因素：（a）儀器因素：凡影響細胞脈沖信號的因素，都可以使白細胞直方圖發(fā)生變化，除血細胞自身體積大小外，其他如儀器的閾值、孔電壓和脈沖的增益都與脈沖大小有關(guān)。（b）試劑因素：試劑的性能好壞可直接影響細胞直方圖的變化，如稀釋液的電導(dǎo)率、滲透壓、離子強度；溶血劑的種

17、類、濃度、用量和溶血時間，都會產(chǎn)生干擾，使細胞直方圖發(fā)生改變，因此應(yīng)強調(diào)使用原裝配套的稀釋液和溶血劑。另外抗凝劑的種類和濃度也會影響細胞直方圖，通常應(yīng)選用EDTA-K２，1.5-2.0mg抗凝劑抗凝1.0ml全血。（c）樣本放置時間：一般認為樣本應(yīng)在采集后20分鐘至二個小時內(nèi)檢測。若放置時間過短，可能存在血小板沒有完全解離、抗凝劑未完全溶解等情況。若放置時間過長，則易引起細胞的變形，尤其是一些免疫功能亢進的病人，其淋巴細胞容易變成異型

18、淋巴細胞，從而使白細胞直方圖變形。,三、紅細胞直方圖解析（一）基本概念儀器在36－360fL范圍內(nèi)分析紅細胞。橫座標(biāo)表示紅細胞體積，縱座標(biāo)表示不同體積的紅細胞出現(xiàn)的頻率。正常紅細胞主要出現(xiàn)在50－200fL之間，在直方圖上可見兩個細胞群體，從50－150fL區(qū)域有一個幾乎兩側(cè)對稱，較狹窄的正態(tài)分布曲線，在主峰右側(cè)約分布在125－200fL區(qū)域的細胞為大紅細胞和網(wǎng)織紅細胞。,（二）分類規(guī)則：在紅細胞直方圖上，依據(jù)細胞的大小，按以下的規(guī)

19、則分類：（1）位于紅細胞低鑒別位線（RL）和紅細胞高鑒別位線(RU)之間的細胞為紅細胞。（2）紅細胞低鑒別位線（RL）為血小板與紅細胞的分界線。如果存在小紅細胞、大紅細胞、血小板簇，可以根據(jù)紅細胞直方圖的改變檢測出來。（3）超過高鑒別位線（RU）為存在紅細胞聚集。,（三）常見異常直方圖及報警信號含意1. RL：低鑒別線與紅細胞直方圖交點高，提示存在電子噪聲干擾，破碎紅細胞，大血小板增多，血小板聚集等情況。,2. RU：高鑒別線與

20、紅細胞直方圖交點高，提示存在電子噪 聲，冷聚集素的干擾或有白細胞極度增高。 DW：相對度數(shù)20%處的高度線與紅細胞直方圖曲線交點 增高，提示紅細胞明顯大小不均。,圖 例,圖例,四、血小板直方圖解析,（一）基本概念儀器在2－30fL范圍內(nèi)分析血小板。正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布，血小板主要集中在2－15fL內(nèi)。儀器使用3條鑒別線來進行血小板的粒度解析，分別為2-6fl和12-30fl之間自動決定的2條浮動鑒別線（LD）和（U

21、D），以及固定鑒別線12fl。通過對三條鑒別線對血小板直方圖進行監(jiān)控，檢查是否存在LD、UD相對度數(shù)的異常，分布寬度的異常及雙峰或多峰。（二）血小板粒度異常標(biāo)記當(dāng)血小板粒度分布不正常時，粒度分布異常標(biāo)記將標(biāo)在相應(yīng)結(jié)果上。當(dāng)有兩個以上的標(biāo)記時，將標(biāo)上優(yōu)先順序最高的標(biāo)記。,1. PL：低鑒別線（LD）處相對度數(shù)超過設(shè)定值。提示存在電子噪聲、冷凝蛋白、破碎紅細胞、白血病性白細胞碎片等的干擾。,2. PU：高鑒別線（UD）處相對度數(shù)超過設(shè)定