新生兒遺傳性代謝病篩查血片采集技術(shù)規(guī)范與質(zhì)量控制

1、新生兒遺傳性代謝病篩查血片采集技術(shù)規(guī)范與質(zhì)量控制,湖北省荊州市新生兒疾病篩查中心荊州市婦幼保健院 金愛枝,。,新生兒遺傳代謝病篩查項目,先天性甲低（CH）苯丙酮尿癥（PKU）新生兒聽力障礙葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺乏癥先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥（CAH）地中海貧血。。。。。。串聯(lián)質(zhì)譜篩查耳聾基因篩查,《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范》2010年版,新生兒疾病篩查是減少出生缺陷，提高我國出生人口素質(zhì)的三級預(yù)防措施之一。為

2、進(jìn)一步做好新生兒疾病篩查工作，衛(wèi)生部于2008年對2004年印發(fā)的《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范》作了進(jìn)一步的修訂，形成了《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范（2010年版）》。,《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范》2010年版,《技術(shù)規(guī)范（2010年版）》由六個部分組成：新生兒遺傳代謝病篩查血片采集技術(shù)規(guī)范；新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢測技術(shù)規(guī)范苯丙酮尿癥和先天性甲狀腺功能減低癥診治技術(shù)規(guī)范新生兒遺傳代謝病篩查操作流程新生兒遺傳代謝病篩查知情同意書新

3、生兒聽力篩查技術(shù)規(guī)范、新生兒聽力篩查技術(shù)流程及新生兒聽力篩查知情同意書,一、基本要求二、采血機構(gòu)和人員職責(zé)三、血片采集步驟四、采血工作質(zhì)量控制五、血片遞送與檢測,新生兒遺傳代謝病篩查血片采集技術(shù)規(guī)范,新生兒遺傳代謝病篩查的目的、原則、方法及網(wǎng)絡(luò)運行—培訓(xùn)合格濾紙干血片采集、保存、遞送的相關(guān)知識—培訓(xùn)合格新生兒遺傳代謝病篩查相關(guān)信息和檔案管理—培訓(xùn)合格,一、基本要求,一）采血機構(gòu)設(shè)置：設(shè)有產(chǎn)科或兒科診療科目的醫(yī)療機構(gòu)均應(yīng)當(dāng)

4、開展新生兒遺傳代謝病篩查血片采集,一、基本要求,二）人員要求1、具有與醫(yī)學(xué)相關(guān)的中專以上學(xué)歷，從事醫(yī)學(xué)臨床工作2年以上。2、接受過新生兒遺傳代謝病篩查相關(guān)知識和技能的培訓(xùn)并取得技術(shù)合格證書。培訓(xùn)內(nèi)容包括：新生兒遺傳代謝病篩查的目的、原則、方法及網(wǎng)絡(luò)運行；濾紙干血片采集、保存、遞送的相關(guān)知識；新生兒遺傳代謝病篩查相關(guān)信息和檔案管理。,一、基本要求,1、積極開展新生兒遺傳代謝病篩查的宣傳教育工作。2、加強對本機構(gòu)血片采集人員的管理和培

5、訓(xùn)。3、承擔(dān)本機構(gòu)新生兒遺傳代謝病篩查有關(guān)信息的收集、統(tǒng)計、分析和上報工作。,二、采血機構(gòu)和人員職責(zé),4、血片采集人員在實施血片采集前，應(yīng)當(dāng)將新生兒遺傳代謝病篩查的目的、意義、篩查疾病病種、條件、方式、靈敏度和費用等情況如實告知新生兒的監(jiān)護人，并取得書面同意。5、認(rèn)真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登 記完整。,二、采血機構(gòu)和人員職責(zé),6、嚴(yán)格按照新生兒遺傳代謝病篩查血片采集步驟采集足跟血，制成濾紙干血片，并在規(guī)定時間內(nèi)遞

6、送至新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢驗。7、因特殊情況未按期采血或不合格標(biāo)本退回需要重新采血者，應(yīng)當(dāng)及時預(yù)約或追蹤采集血片。,二、采血機構(gòu)和人員職責(zé),8、對可疑陽性病例應(yīng)當(dāng)協(xié)助新生兒遺傳代謝病篩查中心，及時通知復(fù)查，以便確診或采取干預(yù)措施。9、做好資料登記和存檔保管工作，包括掌握活產(chǎn)數(shù)、篩查數(shù)、新生兒采血登記信息、反饋的檢測結(jié)果及確診病例等資料，保存時間至少10年。,二、采血機構(gòu)和人員職責(zé),認(rèn)真如實填寫采血卡片內(nèi)容：做到字跡清楚 、登

7、記完整。采血單位 母親姓名（上中下）家庭地址聯(lián)系電話（手機）新生兒性別孕周新生兒體重新生兒情況母親用藥情況出生日期采血日期采血人、填卡人,二、采血機構(gòu)和人員職責(zé),先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(CAH)采血要求,先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(CAH)干血片17α-OHP測定是一種非常有效的篩查CAH的方法?？梢愿采w95％的CAH患兒。17α-OHP容易受多種因素干擾，降低假陰性/假陽

8、性影響因素：胎齡、出生體重、發(fā)熱、疾病狀態(tài)、激素用藥史新生兒17-OHP濃度受孕周及體重影響較大，早產(chǎn)、低體重兒17OHP較正常偏高，體重越低，17α-OHP測定的濃度越高，早產(chǎn)兒要比足月出生的新生兒17α-OHP濃度要高。要求對孕周和體重做準(zhǔn)確的填寫。要求母親疾病或嬰兒疾病及用藥情況如實填寫,先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(CAH)采血要求,要避免血樣受EDTA或檸檬酸鹽污染，受時間分辨免疫熒光方法學(xué)影響，EDTA 或檸檬酸鹽會

9、與銪發(fā)生鰲合反應(yīng)，導(dǎo)致測定濃度極端升高，嚴(yán)禁使用毛細(xì)管將血液轉(zhuǎn)移到濾紙上。,采血時間及要求,衛(wèi)生部： 血片采集是新生兒遺傳代謝病篩查技術(shù)流程中最重要的環(huán)節(jié)。血片質(zhì)量直接影響實驗室檢測結(jié)果。一般情況下：出生72小時后，7天內(nèi)充分哺乳（充分哺乳8次及以上）特殊情形的采血時間： 新生兒生后出院過早； 新生兒因特殊病情需轉(zhuǎn)院診治； 新生兒因出生體重過低、病重、輸血（

10、換血）等未符合采血條件者。 應(yīng)在條件滿足時盡早采血，最遲不超過生后20天。,注意事項,在采集、處理血標(biāo)本時應(yīng)注意生物安全防范：1、病人的標(biāo)本可能感染了人類免疫缺陷病毒（HIV）或乙型肝炎病毒（HBV）。所有血片應(yīng)當(dāng)按照血源性標(biāo)本對待，嚴(yán)格遵守標(biāo)本采集技術(shù)降低各類工作人員（采血人員、信息錄入及實驗室工作人員等）的危險性，在接觸血標(biāo)本過程中須戴手套。2、在采集標(biāo)本過程中要防止交叉感染：嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生消毒后再采集下一個標(biāo)

11、本。,采血前的準(zhǔn)備(一),采血前向家長發(fā)放“新篩”須知如實告知家長新生兒疾病篩查的相關(guān)事項，并取得同意書。,采血前的準(zhǔn)備(二),認(rèn)真如實填寫采血卡片內(nèi)容：做到字跡清楚 、登記完整。采血用品的查對，洗手、戴口罩和手套，確認(rèn)新生兒身份 載血濾紙：采血信息卡 穿刺針 采血卡支架 75%酒精、棉簽、消毒干棉球 熱水袋或熱敷用毛巾,采血前的準(zhǔn)備(三),改善局

12、部血運新生兒足部保持清潔足部注意保暖熱敷：可用40-42℃毛巾熱敷15-30分鐘新生兒取頭高腳低位，可使足部靜脈壓增高，利于取血。,采血部位,最佳采血部位：足跟內(nèi)、外兩側(cè)。理由：1、血運豐富2、皮膚組織較厚3、損傷最小4、容易固定便于取血針刺部位應(yīng)選擇在如右圖所示的陰影區(qū)域，切忌采集新生兒腳后跟中間部位針刺接觸或觸傷足跟骨可引發(fā)骨髓炎、鈣化結(jié)節(jié)、膿腫,1、清洗雙手，并佩戴無菌、無滑石粉的手套。2、按摩或熱敷

13、新生兒足跟，并用75%酒精消毒皮膚。,三、血片采集步驟,3、待酒精完全揮發(fā)后， 使用一次性采血針刺足 跟內(nèi)側(cè)或外側(cè)，深度 小于3毫米，用干棉球 拭去第1滴血，從第2滴 血開始取樣（第一滴血含有組織液可能會稀釋樣本）,三、血片采集步驟,4、輕輕地將濾紙片接觸血滴， 切勿觸及足跟皮膚，血液滴在預(yù)先定好的圈內(nèi)，使血液自然滲透至濾紙 背面，形成正反兩面大小一致，直徑大于8mm的血斑，避免重復(fù)滴血，采集4個血

14、斑。 所有使用過的用具均應(yīng)放置在適當(dāng)?shù)纳镂：Φ娜萜髦小?三、血片采集步驟,5、標(biāo)本采集完后，應(yīng)將 新生兒的足部抬高，用消毒 棉球壓迫采血部位止血。,三、血片采集步驟,三、血片采集步驟,6、在室內(nèi)干燥陰涼處室溫放置在水平支架上，懸空、水平擺放3小時自然晾干至深褐色，不能重疊在一起 避免晾置過久、陽光及紫外線照射，烘烤，福爾馬林、油漆、甲醛等揮發(fā)性化學(xué)

15、物質(zhì)以及蚊蟲吸血等污染 要妥善保管好血片及空白濾紙，避免受物理或化學(xué)物質(zhì)的影響而導(dǎo)致血斑洗脫不下。特別是醫(yī)院新裝修、新家具，更應(yīng)注意。,7、晾干后的血標(biāo)本及時置于密封袋內(nèi)，密閉保存在2～8℃冰箱中， 有條件者可0℃以下保存。 8、所有血片應(yīng)當(dāng)按照血源性 傳染病標(biāo)本對待，對特殊傳染病標(biāo)本，如艾滋病等應(yīng)當(dāng)作標(biāo)識并單獨包裝（生物安全標(biāo)識包裝）,三、血片采集步驟,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏

16、癥對采血標(biāo)本要求更高,嚴(yán)格控制血片儲存和運輸條件，避免酶失活血片樣本充分自然干燥，應(yīng)水平放置在無吸水性的的開放位置上，如干燥架，或塑料面的試管架，室溫下放置3-4小時。樣本應(yīng)避免陽光直射（不要疊放或靠近熱源）樣本干燥后及時用密封袋保存，放在4℃冰箱中。用冷鏈包及時將血片送到新篩分中心，新篩分中心必須在5個工作日內(nèi)冷鏈遞送至新篩中心，新篩中心在2個工作日內(nèi)進(jìn)行標(biāo)本的檢測。,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥(G6PD缺乏癥)的新生兒篩查

17、方法為新生兒濾紙紙片G6PD篩查熒光法 酶活性檢測（通過酶的活性反應(yīng)是否患?。?采血成功小技巧①,采血員立于嬰兒的右側(cè)，先擇嬰兒右腳外側(cè)緣采集，更有利于取血 用手握住足部，母指和食指在穿刺點周圍較大范圍擠壓及間斷性地放松易于血滴的形成。,采血成功小技巧②,濾紙血片與血滴應(yīng)成90度（垂直方向），有利于血滴擴散成型,支架（自制）,鐵支架,紙支架,濾紙干血片的驗收(一)合格濾紙干血片應(yīng)當(dāng)為：a)4個血斑，且每個血斑直

18、徑大于8毫米。b)血滴自然滲透，濾紙正反面血斑一致。c)血斑無污染。d)血斑無滲血環(huán)。e)血片信息記錄完整。,四、采血工作質(zhì)量控制,四、采血工作質(zhì)量控制,濾紙干血片的驗收(二)不合格濾紙干血片盡快通知重采：（1）血斑過?。?）滲透不全（3）重復(fù)滴血（4）血樣不均勻，有凝塊（5）血片污染（6）缺斑（7）采血卡項目填寫不全或錯誤,不合格的血樣標(biāo)本(一),血液太少（未滲透） 可能原因：（1）在血斑完全充滿圓圈并浸透

19、前移去濾紙片（2）使用毛細(xì)管將血液轉(zhuǎn)移到濾紙片（3）手或者潤膚霜接觸濾紙片,不合格的血樣標(biāo)本(二),重復(fù)滴血 可能原因:兩滴或兩滴以上的血滴匯于同一血斑,不合格的血樣標(biāo)本(三),標(biāo)本未干 可能原因:血斑未完全干透即放入冰箱保存,不合格的血樣標(biāo)本(四),血樣稀釋、血斑周圍有血清環(huán) 可能原因：（1）穿刺皮膚前沒有將酒精擦干（2）濾紙片接觸酒精、水等物質(zhì)（3）過度擠壓/揉搓穿刺部位使組織液滲出（4）手或其他物質(zhì)，比如酒精、福

20、爾馬林、滅菌溶液、水等接觸濾紙片,不合格的血樣標(biāo)本(五),血斑出現(xiàn)凝塊 可能原因：（1）采血操作時間過長，血液凝固（2）不恰當(dāng)?shù)馗稍镅獦樱?）用毛細(xì)管將血液轉(zhuǎn)移到濾紙上,不合格的血樣標(biāo)本(六),樣本血液太多可能原因：（1）濾紙同一位置重復(fù)滴血滴（2）在濾紙的正反面重復(fù)滴血（3）血液過多，通常使用了某些設(shè)備,不合格的血樣標(biāo)本(七)標(biāo)本干未洗脫,五、血片遞送與檢測,以前的模式每周1次遞送：采血機構(gòu)遞至各分中心

21、城區(qū)醫(yī)療機構(gòu)：血片整理編號，每周五篩查中心專人上門收取 各縣市：血片整理編號，每周三寄出快遞發(fā)送新篩郵件，每周四新篩中心收到標(biāo)本新篩中心每周集中進(jìn)行檢測1-2次篩查結(jié)果以郵件形式發(fā)送到分中心,血片遞送與檢測,新增新篩項目后新篩網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)、新篩微信公眾號每周1-2次遞送：采血機構(gòu)： 采血后貼條碼，指導(dǎo)家屬進(jìn)入微信號錄入或掃描條碼及血片信息并點擊提交 機構(gòu)負(fù)責(zé)人進(jìn)入新篩網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)輸入條碼確認(rèn)血片信息無誤

22、后遞至各分中心各分中心（包括城區(qū)醫(yī)療機構(gòu)及各縣市）整理血片，進(jìn)入新篩網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)集中核對掃碼確認(rèn)血片質(zhì)量和數(shù)量無誤冷鏈快遞至篩查中心。新篩中心：收到標(biāo)本及時進(jìn)行檢測,三查七對編碼絕對不能錯,篩查信息錄入,,采血機構(gòu)人員職責(zé),1、宣教、知情同意2、填寫完整的血片信息3、采血4、指導(dǎo)家屬掃描新篩微信公眾號并進(jìn)入微信號錄入條碼及血片信息，點擊提交5、進(jìn)入新篩系統(tǒng)再次確認(rèn)血片信息是否正確與完整6、血片及時收納正確保存7、發(fā)送血片信息

23、并及時遞送至新篩分中心 （每周1-2次遞送）,采血機構(gòu)人員職責(zé),(沒有印刷條碼)老血片：1、在右上角和右下角貼條碼2、指導(dǎo)家屬掃描新篩微信公眾號并進(jìn)入微信號錄入條碼 及登記個人信息3、點擊提交按鈕4、進(jìn)入新篩系統(tǒng)再次確認(rèn)血片信息是否正確 信息不完整需補充完整,采血機構(gòu)人員職責(zé),新血片：1、指導(dǎo)家屬掃描新篩微信號并進(jìn)入微信號掃描血片條行碼登記個人信息2、點擊提交按鈕3、機構(gòu)人員進(jìn)入新篩系統(tǒng)掃描條行碼再

24、次確認(rèn)血片信息是否正確和完整,篩查分中心（各縣市及城區(qū)市直醫(yī)院）,進(jìn)入新篩系統(tǒng)刷條碼核對標(biāo)本質(zhì)量與數(shù)量發(fā)送信息5個工作日內(nèi)冷鏈遞送至篩查中心,1、新生兒遺傳代謝病篩查健康教育2、填寫采血卡、登記、核對3、改善采血部位血循環(huán)4、足跟內(nèi)外側(cè)緣75%酒精消毒5、針刺和取血6、 2~4小時常溫晾干后及時收納7、進(jìn)行質(zhì)量檢查，刷條碼，錄入信息，冷鏈遞送至分新篩中心8、新篩分中心刷條碼核對標(biāo)本質(zhì)量與數(shù)量，5天內(nèi)冷鏈遞送至篩

25、查中心,新篩簡要流程,采血工具,三棱針優(yōu)點：成本低廉。缺點：1、包裝簡陋,無法保證無菌； 2、采血針表面粗糙，極易撕裂皮膚 而痛感強烈；3、穿刺深度無法準(zhǔn)確控制,血量無法 保證；4、由于進(jìn)針太淺，血量不夠,有時不得不過度擠壓， 使組織液混入。觸壓采血器優(yōu)點：1、痛苦感最低 ;2、操作方便，出血量多，完全滿足新篩標(biāo)本采集所需血量;3、使用安全，杜絕重復(fù)