三種檢測(cè)牛奶中氟喹諾酮類藥物殘留方法的比較研究.pdf

1、本論文主要是針對(duì)我國(guó)牛奶中存在抗生素殘留，且檢測(cè)體系不夠完善的現(xiàn)象，建立了牛奶中氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)的高效液相色譜法、微生物法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，并對(duì)其進(jìn)行了比較性研究，確定了不同檢測(cè)方法的適用范圍，以便為不同規(guī)模的乳品企業(yè)以及質(zhì)量監(jiān)督部門提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。 1.建立了牛奶中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星三組份殘留檢測(cè)的高效液相色譜法。樣品經(jīng)磷酸鹽緩沖液提取，過(guò)固相萃取柱凈化，洗脫，洗脫液經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾，采用熒光檢測(cè)器檢

2、測(cè)，外標(biāo)法定量。恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星在0.005～0.5μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9997～0.9998；最低檢測(cè)限為0.005μg/mL，在添加濃度為0.050μg/mL、0.100μg/mL、0.200μg/mL時(shí)的平均回收率水平分布在71.5％～83.8％，CV均低于10％，符合殘留檢測(cè)要求。 2.建立了牛奶中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星三組份殘留檢測(cè)的微生物法—杯碟法，以枯草芽孢桿菌、藤

3、黃微球菌和短小芽孢桿菌為工作菌。根據(jù)—?jiǎng)┝糠ㄔO(shè)計(jì)原理，通過(guò)檢測(cè)三種藥物在磷酸鹽緩沖液中的最低檢測(cè)限和在牛奶中的最低檢測(cè)限，以及回收率的大小，確定了檢測(cè)三種藥物的最適工作菌為枯草芽孢桿菌。結(jié)果表明：對(duì)于三種藥物，枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、藤黃微球菌的最適菌層濃度分別為0.8％、0.1％、0.5％；三種藥物在磷酸鹽緩沖液中的最低檢測(cè)限分布在0.025～0.5μg/mL；在牛奶中的最低檢測(cè)限分布在0.03～0.6μg/mL，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系

4、良好，相關(guān)系數(shù)都大于0.98，平均回收率分布在63.2～81.0％，精密度良好，CV均小于10％，能夠滿足殘留檢測(cè)要求。 3.建立了牛奶中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星三組份殘留檢測(cè)的酶聯(lián)免疫吸附法．利用美國(guó)Beacon公司研制的試劑盒，原理是間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法。牛奶樣品經(jīng)二氯甲烷提取、離心后，取下層液體用氮?dú)獯蹈?，進(jìn)行測(cè)試，最后，在450nm處測(cè)量吸光度值，吸光度值與樣品中的氟喹諾酮藥物濃度成反比。結(jié)果表明：該試劑盒用來(lái)檢測(cè)