蘇云金芽孢桿菌殺蟲晶體蛋白基因及幾丁質(zhì)酶基因的克隆與特征分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該論文設(shè)計(jì)了兩對引物,應(yīng)用PCR技術(shù)分別從BT sotto質(zhì)粒DNA和Btisraelensis基因組DNA中擴(kuò)增得到殺蟲晶體蛋白cry1Aa13基因和幾丁質(zhì)酶ichi基因,并進(jìn)行了序列分析和功能預(yù)測.主要研究結(jié)果如下:1.建立了蘇云金芽孢桿菌大型質(zhì)粒DNA的小量提取方法.該方法可有效去除染色體DNA及RNA,省略了苯酚和氯仿抽提過程,不用擔(dān)心痕量酚對質(zhì)粒DNA質(zhì)量的影響.2.根據(jù)cry1A基因保守序列設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增了殺蟲

2、晶體蛋白基因,該基因已在GenBank中登錄,登錄號為AF510713,目前已被Bt δ-內(nèi)毒素基因國際命名委員會正式命名為cry1Aa13.3.對cry1Aa13進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)該基因含有一個由3543bp組成的開放閱讀框,編碼1180個氨基酸,分子量約為133.50kDa.4.根據(jù)幾丁質(zhì)酶基因保守序列設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增了幾丁質(zhì)酶ichi基因,該基因已在GenBank中登錄,登錄號為AF526379.5.對ichi

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