31313.中國(guó)文昌魚肽聚糖識(shí)別蛋白功能研究

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文中國(guó)文昌魚肽聚糖識(shí)別蛋白功能研究姓名：朱瑞敏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：徐安龍20090609中山大學(xué)碩士論文中國(guó)文昌魚肽聚糖識(shí)別蛋白功能研究2、3融合蛋白和pTRXPGRPl融合蛋白，并對(duì)這些蛋白的功能進(jìn)行了研究。本文通過檢測(cè)表達(dá)菌菌液的0D值、檢測(cè)菌液上清中核酸物質(zhì)含量以及用電鏡觀察表達(dá)菌的細(xì)胞壁情況等方法，發(fā)現(xiàn)了中國(guó)文昌魚pGEXPGRPl、pTRX—PGRPl和pGEXPGRP3融合

2、蛋白具有不同程度的從大腸桿菌內(nèi)部破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的能力；通過抑菌圈和測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)曲線等體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，中國(guó)文昌魚PGRP并沒有特別明顯的直接殺菌或者抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的功能；通過高效液相色譜、質(zhì)譜等分析手段，發(fā)現(xiàn)了pTRXPGRPl融合蛋白對(duì)金黃色葡萄球菌來源的PGN具有切割能力，同時(shí)也可以增強(qiáng)金黃色葡萄球菌來源的PGN的水解。本論文還探索了BacToBac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)，在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)出中國(guó)文昌魚肽聚糖識(shí)別蛋白(PGRP2)，為進(jìn)一步研究該蛋

3、白的功能奠定了基礎(chǔ)?？傊?，通過對(duì)三個(gè)中國(guó)文昌魚PGRP的細(xì)胞定位、原核表達(dá)及功能研究，為肽聚糖識(shí)別蛋白的功能進(jìn)化提供了一定的線索。同時(shí)在昆蟲表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)出中國(guó)文昌魚P6RP2，也為進(jìn)一步進(jìn)行功能蛋白的研究奠定了基礎(chǔ)。另外，本文對(duì)中國(guó)文昌魚PGRPl具有切割PGN的酶活的活性機(jī)制和作用位點(diǎn)是否與高等動(dòng)物相似仍需進(jìn)一步探討。另外，因?yàn)槿狈ε囵B(yǎng)文昌魚細(xì)胞的能力，PGRP在文昌魚細(xì)胞中是否具有像昆蟲中信號(hào)通路識(shí)別分子功能尚未確定。關(guān)鍵詞：文昌