傳入性前庭神經(jīng)元與傳出性前庭神經(jīng)元中樞神經(jīng)通路的研究.pdf

1、本研究的目的是探討前庭傳入性神經(jīng)元與前庭傳出性神經(jīng)元之間直接的中樞神經(jīng)通路，并直觀地顯示出本通路的神經(jīng)元胞體及其纖維走形。 方法：在實(shí)驗(yàn)第一部分中，運(yùn)用順行、逆行雙重?zé)晒馍窠?jīng)示蹤技術(shù)，于大鼠前庭內(nèi)側(cè)核或外側(cè)核注射綠色順行熒光示蹤劑PHA-L(含熒光素)，在對側(cè)外周前庭注射紅色逆行熒光示蹤劑5％MFS(含熒光微球)，行腦干連續(xù)冰凍切片，在熒光顯微鏡及激光共聚焦顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞的分布及形態(tài)。在實(shí)驗(yàn)第二部分中，運(yùn)用膜片鉗電生理技術(shù)

2、，于前庭內(nèi)側(cè)核放置刺激電極，同側(cè)面神經(jīng)膝內(nèi)側(cè)的前庭傳出神經(jīng)元胞體內(nèi)置入記錄電極，行膜片鉗的全細(xì)胞記錄。刺激前庭內(nèi)側(cè)核的傳入神經(jīng)元，記錄傳出神經(jīng)元的突觸后電流。在實(shí)驗(yàn)第三部分中，于面神經(jīng)膝內(nèi)側(cè)的前庭傳出神經(jīng)元細(xì)胞群區(qū)放置刺激電極，同側(cè)前庭內(nèi)側(cè)核前庭傳入神經(jīng)元胞體內(nèi)置入記錄電極，給予刺激后記錄動作電位；然后運(yùn)用細(xì)胞內(nèi)示蹤技術(shù)，導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)示蹤劑biocytin，連續(xù)冰凍切片后ABC染色、DAB呈色；顯微鏡下觀察染色細(xì)胞及其纖維走行，并進(jìn)行通路

3、重建與顯示。 結(jié)果：第一部分的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)紅色熒光示蹤劑可以標(biāo)記出前庭傳出神經(jīng)元的胞體及樹突：前庭傳出神經(jīng)元主要分布于雙側(cè)面神經(jīng)膝的內(nèi)側(cè)，背外側(cè)(即groupE)及網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的橋腦尾狀核區(qū)，還有小部分位于面神經(jīng)膝的腹側(cè)，注射對側(cè)腦干的細(xì)胞數(shù)目多于同側(cè)；分布于面神經(jīng)膝內(nèi)側(cè)的神經(jīng)元多為梭形，分布于面神經(jīng)外側(cè)的神經(jīng)元為類圓形或梭形，分布于網(wǎng)狀系統(tǒng)的神經(jīng)元多為三角形，胞體較大。綠色熒光標(biāo)記的神經(jīng)纖維為前庭內(nèi)側(cè)核或外側(cè)核神經(jīng)元發(fā)出的纖維，主要分

4、布于面神經(jīng)膝的內(nèi)外側(cè)及網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)系統(tǒng)。在面神經(jīng)膝內(nèi)側(cè)、外側(cè)及網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的橋腦尾狀核區(qū)都能發(fā)現(xiàn)被紅色、綠色雙重?zé)晒鈽?biāo)記而呈現(xiàn)黃色的雙標(biāo)細(xì)胞。第二部分的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)面神經(jīng)膝內(nèi)側(cè)的前庭傳出神經(jīng)元的靜息電位約一55mv一70mv。刺激前庭內(nèi)側(cè)核的傳入神經(jīng)元，可在傳出神經(jīng)元胞體內(nèi)記錄到突觸后電流，以興奮性突觸后電流為主。第三部分的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，刺激面神經(jīng)膝內(nèi)側(cè)的前庭傳出神經(jīng)元細(xì)胞群，在同側(cè)前庭內(nèi)側(cè)核傳入神經(jīng)元的胞體內(nèi)可記錄到動作電位，為鋒電位，振幅62．