SDF-1-CXCR4軸在骨髓間充質干細胞移植促進胰島再生中的作用.pdf

1、目的：
　　有研究表明骨髓間充質干細胞（MSCs）能夠分泌基質細胞衍生因子（SDF-1），而SDF-1與其特異性受體CXCR4結合后形成具有修復受損組織，參與血管生成等多種生物學功能的單位。本實驗通過分離、純化大鼠的骨髓間充質干細胞，并在體外一定條件下培養(yǎng)、擴增。并將培養(yǎng)的第3代細胞移植入鏈脲佐菌素（STZ）誘導的糖尿病大鼠體內，觀察同種異體MSCs移植入受體后，SDF-1/CXCR4軸在促進殘存胰島及其周圍新生血管增殖中的作用。

2、
　　方法：
　　將SD大鼠處死后，無菌條件下取出股骨和脛骨，DMEM培養(yǎng)液沖洗髓腔，200μm尼龍網過濾除去大的組織團塊。細胞懸液離心(1000rpm,10min)后,收集細胞接種于含有10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)。通過腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ，65mg/kg）構建糖尿病大鼠模型。誘導成功的糖尿病大鼠隨機分為A組（MSCs移植組）、B組（MSCs移植+SDF-1/CXCR4軸阻斷劑AMD組）和C組（糖尿病對照組）

3、，另設D組（正常大鼠對照組）。將傳至3代的MSCs移植入糖尿病大鼠體內，觀察各組大鼠的生存狀態(tài)，每3天采鼠尾靜脈血用血糖儀檢測各組血糖水平，采用放免法檢測血清中空腹和餐后不同時間點的胰島素水平、Elisa法檢測SDF-1水平。并于移植MSCs后第30天取出各組大鼠胰腺和血清，胰腺組織采用H-E染色和免疫組織化學染色法觀察CD31、PCNA、PDX-1在胰腺組織的表達水平。
　　結果：
　　1、A組殘存胰島周圍可見新生血管，C

4、D31、PCNA、PDX-1染色陽性率分別為（71.2±5.3）％、（76.5±4.5）％、（69.8±6.7）％；B組和C組殘存胰島周圍基本未見新生血管，CD31、PCNA、PDX-1染色陽性率B組為（7.4±2.1）％、（5.5±3.7）％、（8.8±2.9）％，C組為（5.7±3.1）％、（6.2±1.4）％、（3.5±1.6）％，A組與B組比較有統(tǒng)計學差異（p<0.05），B組與C組比較無統(tǒng)計學差異（p>0.05）。2、移植后第

5、25天，A組糖尿病大鼠血糖水平基本正常，低于B組和C組，而胰島素水平明顯高于B組和C組（p<0.05）。3、A組與B組血清SDF-1水平差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)，但都明顯高于C組（p<0.05）。
　　結論：
　　通過分離、純化、培養(yǎng)、擴增可以獲得大量的MSCs，MSCs移植后明顯的促進了糖尿病受體殘存胰島再生及其周圍新生血管的形成，SDF-1/CXCR4軸特異性阻斷劑-AMD3100能抑制MSCs逆轉高血糖，促進胰