含硒型牛副傷寒活疫苗應(yīng)用研究.pdf

1、為了解決牦牛主產(chǎn)區(qū)牛副傷寒病的流行和缺硒病，開展了該題目的研究工作，從而達(dá)到”一針防兩病”的目的。主要進(jìn)行了以下應(yīng)用研究工作：采用都柏林沙門氏菌弱毒株(STM8002-550)作為制造含硒型牛副傷寒活疫苗菌株。該菌株對硒制劑的耐受性試驗，結(jié)果表明，STM8002-550菌株在37℃下對6mg硒制劑有較好的耐受性，且與對照組差異不顯著(P＞0.05)這就為含硒型牛副傷寒活疫苗的研究提供了依據(jù)。硒制劑對實驗動物豚鼠和本動物牦犢牛進(jìn)行安全劑量

2、的測定，其結(jié)果確定了硒制劑(亞硒酸鋇)對豚鼠的LD50為77.48mgSe/kg·bw；60mgSe/頭對平均體重為20kg牦犢牛是安全的，進(jìn)一步為硒制劑的安全應(yīng)用劑量提供了可靠的依據(jù)。在此基礎(chǔ)上，成功地研制出了含硒型牛副傷寒活疫苗。經(jīng)一系列的試驗證明，本疫苗以一個免疫劑量經(jīng)頸部或臀部淺層肌肉注射6月齡以下牦犢牛，第七天可產(chǎn)生免疫應(yīng)答，第15天經(jīng)頸靜脈用都柏林沙門氏菌強(qiáng)毒株(S8002)的2個MLD攻毒，可產(chǎn)生5/5保護(hù)，而對照組2/2

3、死亡；免疫后6個月、13個月強(qiáng)毒攻擊均產(chǎn)生100﹪的保護(hù)；同應(yīng)用實驗動物豚鼠取得的試驗結(jié)果一致。本制品以3倍劑量肌肉注射牦犢牛，安全性良好。該疫苗對2～6月齡牦犢牛免疫，24小時血硒濃度明顯上升，且免疫后3個月血硒濃度仍維持在0.05μg/mL以上，從而證明此苗有很好的治療和預(yù)防缺硒病的作用。含硒型牛副傷寒活疫苗凍干后在-20℃保存24個月、4℃～8℃保存12個月、室溫下保存2個月，疫苗的外觀物理性狀和活菌率均符合生物制品規(guī)程的要求，對

4、豚鼠免疫效力試驗的結(jié)果均符合要求。本制品免疫牦犢牛后，與牛副傷寒活疫苗組相比能顯著地提高牦牛紅細(xì)胞C3bR花環(huán)率，從而證實含硒型牛副傷寒活疫苗具有提高機(jī)體紅細(xì)胞免疫功能的作用。通過含硒型牛副傷寒活疫苗和牛副傷寒活疫苗對牦牛免疫應(yīng)答的對比試驗，結(jié)果顯示這兩種疫苗的抗體的產(chǎn)生時間和免疫期一致，從而證明了含硒型牛副傷寒活疫苗與牛副傷寒活疫苗在預(yù)防牛副傷寒病的性能上一致。經(jīng)在甘肅省的兩個市(州)推廣應(yīng)用5萬頭份，證明該疫苗安全可靠，免疫期長，血