骨髓間充質(zhì)干細胞對大鼠實驗性肺氣腫治療的研究.pdf

1、目的：體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstemcells，MSCs)，將培養(yǎng)的細胞經(jīng)尾靜脈注入用豬胰彈性蛋白酶制作的大鼠肺氣腫模型體內(nèi)，4周后測動脈血氣，觀察肺組織病理學變化，以探討MSCs對肺氣腫的治療作用，為今后臨床治療肺氣腫探求一種新的方法。 方法：Wistar大鼠24只，體重250±10g，隨機分為4組，每組6只，分別為健康組(A組)、模型組(B組)、生理鹽水對照組(C組)和治療組(D組)。B、C和D

2、組均利用氣管內(nèi)一次性滴注豬胰彈性蛋白酶(PPE)的方法(劑量2u/g)制作大鼠肺氣腫動物模型，A組用相同的方法以生理鹽水為對照。4周后肺氣腫動物模型制成。利用密度梯度離心與貼壁法相結(jié)合的方法分離、培養(yǎng)大鼠MSCs，并進行體外擴增。傳到第三代時，MSCs的細胞活力最佳，用免疫細胞化學方法檢測MSCs表面CD71的表達。用溴氮胞苷(BrdU)對MSCs進行體外標記，采用同種異體移植，通過尾靜脈注射于D組肺氣腫大鼠體內(nèi)，約2.0×106/只，

3、C組用相同的方法給予生理鹽水。 結(jié)果：4周后測動脈血氣，代表肺功能；取肺組織作病理切片，觀察肺泡變化，進行肺泡計數(shù)，并計算單位面積平均肺泡數(shù)和平均肺泡面積，觀察肺組織病理改變。結(jié)果顯示：A、B、C、D四組兩兩比較，動脈血氣(PH值、PO2和PCO2)均無明顯差異(P＞0.05)；平均肺泡數(shù)和平均肺泡面積均有明顯差異：D組大鼠單位面積平均肺泡數(shù)組明顯高于B組(P＜0.001)和C組(P=0.02)，但低于A組(P＜0.001)；A