CD4+Foxp3+Treg細胞在幽門螺桿菌感染中作用的初步研究.pdf

1、目的:構(gòu)建幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染C57BL/6小鼠的動物模型,綜合分析CD4+Foxp3+Treg細胞數(shù)量及其相關(guān)細胞因子水平來評價其在H.pylori感染過程中的作用。
　　方法:構(gòu)建H.pyori感染C57BL/6小鼠的動物模型;用流式細胞術(shù)分析對照組、感染組、治療組小鼠胃組織固有層淋巴細胞和脾淋巴細胞中CD4+Foxp3+Treg細胞的百分比;用PBS、H. pylori超

2、聲上清、PMA+Ionomycin+BFA做抗原刺激培養(yǎng)治療組小鼠脾淋巴細胞15h,用流式細胞術(shù)分析CD4+Foxp3+Treg的百分比;RT-PCR檢測小鼠胃組織Foxp3、IL-10、TGF-β1的mRNA的表達;ELISA檢測小鼠胃組織勻漿上清液、血清和脾淋巴細胞抗原刺激培養(yǎng)上清中 IL-10、IFN-γ和TGF-β1的含量;免疫組化檢測 Foxp3+Treg在小鼠胃組織中的分布及數(shù)量;HE染色觀察H.pyori感染對C57BL/

3、6小鼠造成的損傷和治療后的效果。
　　結(jié)果:感染組小鼠胃組織固有層淋巴細胞和脾淋巴細胞中CD4+Foxp3+Treg細胞的百分比分別為1.22±0.25％,2.97±0.16%,高于PBS組和治療組,P<0.01,有統(tǒng)計學(xué)意義;H. pylori超聲上清刺激培養(yǎng)的脾淋巴細胞中,CD4+Foxp3+Treg細胞的百分比為2.18±0.05%,高于 PBS對照組,低于陽性對照組,P<0.01,有統(tǒng)計學(xué)意義;感染組小鼠胃組織高表達Fox

4、p3 mRNA,PBS組和治療組幾乎不表達Foxp3 mRNA;H. pylori超聲上清刺激培養(yǎng)的脾淋巴細胞上清液中,IL-10的含量分為70.17±17.15(pg/mg),高于 PBS組和陽性對照組, P<0.01,有統(tǒng)計學(xué)意義, TGF-β1的含量為1234.83±126.92(pg/mg),高于 PBS組,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義;感染組小鼠的胃組織中Foxp3+Treg細胞的數(shù)目為18.42±6.53,高于PBS組和治療組

5、,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　(1) H. pylori感染引起感染部位CD4+Foxp3+Treg細胞數(shù)目增多,其百分比上升,并伴隨著H. pylori的根除而減少,CD4+Foxp3+Treg細胞與H. pylori感染密切相關(guān)。
　　(2) H. pylori感染后,會導(dǎo)致胃組織Foxp3 mRNA表達增高。
　　(3) H. pylori超聲抗原能有效刺激脾淋巴細胞向Treg細胞轉(zhuǎn)變,并