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文檔簡介
1、目的:探討抗微管藥物紫杉醇在體外實驗條件下對尤文肉瘤細胞系RD-ES的誘導凋亡及生長抑制作用,為臨床應用及活體實驗提供依據(jù)?! 》椒? 1選用液氮冷凍的RE-DS細胞系復蘇,進行細胞培養(yǎng),傳代,達對數(shù)生長期后分別加入不同濃度的化療藥物置入溫箱中孵育?;熕幬餅樽仙即?Paclitaxel),順鉑(Cisplatin,DDP),阿霉素(Adriamycin,ADM)。然后收集藥物作用時間0,8,16,24,48,72小時后的培養(yǎng)細胞
2、,進行臺盼籃染色,活細胞計數(shù),觀察細胞生長抑制率。 2將依上述方法培養(yǎng)的細胞接種于帶玻片的小培養(yǎng)管內(nèi),同樣方法加入上述不同濃度的化療藥物,在不同的時間點進行細胞搜集,Giemsa染色,觀察細胞形態(tài)。計數(shù)凋亡細胞數(shù)。攝片。3通過同樣方法制備細胞標本,加入紫杉醇等藥物后在不同時間點用流式細胞儀(FCM)測定細胞周期及凋亡率的變化情況。4將上述方法培養(yǎng)至對數(shù)生長期的細胞藥物作用后進行DNA降解產(chǎn)物的原位缺口末端標記(TUNEL)檢測,計數(shù)
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