糠秕馬拉色菌對(duì)表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌增殖的影響.pdf

1、前言
　　糠秕馬拉色菌（Malasseziafurfur，M.furfur）和表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis，S.epidermidis)均為人體皮膚常駐菌群?？凤躐R拉色菌有嗜脂性，和脂溢性皮炎、花斑糠疹、馬拉色菌毛囊炎、特應(yīng)性皮炎等數(shù)種皮膚疾病有關(guān)系;表皮葡萄球菌曾認(rèn)為是人體皮膚共生的無(wú)害菌群，如今證明是一種重要的條件性致病菌，是院內(nèi)感染最常見的致病菌，主要引起器械相關(guān)的感染，其致病機(jī)制尚未明確

2、。
　　脂溢性皮炎（seborrheicdermatitis，SD）是一種常見的皮膚科疾病，發(fā)病機(jī)制不清，包括內(nèi)源性和外源性的多種因素，諸多證據(jù)表明，糠秕馬拉色菌和SD有著密切的聯(lián)系，而我科門診三十幾例脂溢性皮炎患者皮損皮屑培養(yǎng)后，培養(yǎng)出多于正常量的表皮葡萄球菌。有學(xué)者報(bào)道表皮葡萄球菌大多定植在身體較上面的部位，可能和這些部位有大量的皮脂有關(guān)，而SD好發(fā)于皮脂豐富區(qū)，因而我們猜測(cè)，表皮葡萄球菌和糠秕馬拉色菌在人體皮膚復(fù)雜的微環(huán)境中

3、可能互相作用，對(duì)SD的發(fā)病具有一定的影響。
　　金黃色葡萄球菌是皮膚表面的條件性致病菌，有學(xué)者證實(shí)其在特應(yīng)性皮炎（atopicdermatitis，AD）的發(fā)生發(fā)展中扮演重要的角色，一些學(xué)者也表明糠秕馬拉色菌和AD的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，但金黃色葡萄球菌與糠秕馬拉色菌二者之間的關(guān)系尚無(wú)定論。
　　某些疾病具有兩種或兩種以上的跨界微生物感染，菌群之間是如何作用的研究尚處于初始階段。本課題將研究糠秕馬拉色菌對(duì)表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌

4、的增殖是否有影響，進(jìn)而初步探討皮膚感染性疾病的可能致病機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)材料和方法
　　一、實(shí)驗(yàn)材料
　　糠秕馬拉色菌(ATCC(@)14521TM)、表皮葡萄球菌(ATCC(@)12228)、金黃色葡萄球菌(ATCC65)、Dixon培養(yǎng)基（麥芽浸膏36g、蛋白胨6g、瓊脂10g、油酸2ml、甘油2ml、Tween4010ml、蒸餾水1000ml）、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基及牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基。
　　二、實(shí)驗(yàn)方法

5、>　　1、實(shí)驗(yàn)一:糠秕馬拉色菌對(duì)表皮葡萄球菌增殖的影響
　　(1)將活性不增殖狀態(tài)（預(yù)實(shí)驗(yàn)證實(shí)糠秕馬拉色菌在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中不增殖但仍分泌活性物質(zhì)）的糠秕馬拉色菌加入表皮葡萄球菌菌懸液中于96孔板中培養(yǎng)，帶板蓋放入酶標(biāo)儀，600nm波長(zhǎng)、32℃、每隔1小時(shí)、連續(xù)24小時(shí)檢測(cè)吸光度（opticaldensity,OD值）的變化情況。
　　(2)將糠秕馬拉色菌在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中過(guò)夜（10-12小時(shí)）培養(yǎng)后的上清液

6、加入表皮葡萄球菌菌懸液中于96孔板中培養(yǎng)，帶板蓋放入酶標(biāo)儀中，于600nm波長(zhǎng)、32℃、每隔1小時(shí)、連續(xù)24小時(shí)檢測(cè)OD值的變化情況。
　　(3)將滅活的糠秕馬拉色菌（仍保持抗原性）加入表皮葡萄球菌中于96孔板中培養(yǎng)，帶板蓋放入酶標(biāo)儀中，于600nm波長(zhǎng)、32℃、每隔1小時(shí)、連續(xù)24小時(shí)檢測(cè)OD值的變化情況。
　　2、實(shí)驗(yàn)二:糠秕馬拉色菌對(duì)金黃色葡萄球菌增殖的影響
　　所有實(shí)驗(yàn)操作均同“實(shí)驗(yàn)一”。
　　三、統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、處理
　　所得數(shù)據(jù)使用EXCEL制作圖表、SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用重復(fù)測(cè)量方差分析，比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的差異，以P值＜0.05為差異具有顯著性。
　　結(jié)果
　　一、糠秕馬拉色菌對(duì)表皮葡萄球菌增殖的影響
　　(1)活性不增殖狀態(tài)的糠秕馬拉色菌對(duì)表皮葡萄球菌的增殖有促進(jìn)作用，呈濃度依賴性。
　　(2)糠秕馬拉色菌培養(yǎng)后的上清液對(duì)表皮葡萄球菌的增殖有促進(jìn)作用，呈濃度依賴性。
　　(3)滅活的

8、糠秕馬拉色菌對(duì)表皮葡萄球菌的增殖未見明顯作用。
　　二、糠秕馬拉色菌對(duì)金黃色葡萄球菌增殖的影響
　　(1)活性不增殖狀態(tài)的糠秕馬拉色菌對(duì)金黃色葡萄球菌的增殖有抑制作用，呈濃度依賴性。
　　(2)糠秕馬拉色菌培養(yǎng)后的上清液對(duì)金黃色葡萄球菌的增殖有促進(jìn)作用，呈濃度依賴性。
　　(3)滅活的糠秕馬拉色菌對(duì)金黃色葡萄球菌的增殖有抑制作用，呈濃度依賴性。
　　結(jié)論
　　活性不增殖狀態(tài)的糠秕馬拉色菌對(duì)表皮葡萄球菌