2-甲氧基雌二醇及其羥丙基-β-環(huán)糊精包含物細胞藥效和藥動學初步研究.pdf

1、背景及目的:2-甲氧基雌二醇(2-ME)是雌激素的生理性代謝產(chǎn)物，但本身幾乎沒有雌激素活性，近年來研究發(fā)現(xiàn)其具有較好的抗腫瘤活性。由于其水溶性低，口服吸收差，易代謝，因而將其制成各種制劑來提高其藥用價值。本文就對其原料藥及其羥丙基-β-環(huán)糊精（HP-β-CD）包合物對四種腫瘤細胞的抑制作用進行比較研究;初步探索原料藥和制劑細胞內(nèi)的代謝動力學規(guī)律;探討原料藥和制劑進入細胞的機制和細胞外排機制。整體評價制劑的作用效果，并為2-甲氧基雌二醇的

2、制劑研究提供理論依據(jù)。
　　 方法:本實驗采用磺酰基羅丹明B(SRB)法測定原料藥及制劑對腫瘤細胞生長情況的影響;采用流式細胞術(shù)(FCM)檢測原料藥及制劑對MCF-7細胞的周期阻滯情況;應(yīng)用熒光Hoechst33342/PI雙染法檢測MCF-7細胞凋亡情況;采用HPLC-FLD進行細胞內(nèi)藥物含量測定及細胞內(nèi)藥物代謝動力學規(guī)律探索;利用能量抑制劑疊氮鈉(NaN3)及P-糖蛋白抑制劑環(huán)孢素A(CyA)初步探索原料藥和制劑進入細胞及細

3、胞外排機制。
　　 結(jié)果:實驗結(jié)果表明:2-ME及2-ME/HP-β-CD包合物對PC-3、SGC-7901、HepG2細胞的生長具有良好的抑制作用，并呈現(xiàn)出一定的時間和濃度依賴性。而對于MCF-7細胞，只有原料藥對其增殖抑制具有時間依賴性、濃度依賴性;而制劑只有濃度依賴性卻不具有時間依賴性。通過研究藥物作用下MCF-7細胞周期阻滯和凋亡情況，發(fā)現(xiàn)制劑與原料藥對MCF-7細胞作用機制基本相同。細胞動力學研究表明:四種細胞對原料藥

4、的代謝規(guī)律基本相同。對MCF-7、PC-3兩種細胞進行原料藥和制劑的代謝規(guī)律進一步研究，發(fā)現(xiàn)PC-3細胞對原料藥和制劑的代謝規(guī)律基本相同;MCF-7細胞則有差別，說明不同細胞代謝機制可能不完全相同。以PC-3，MCF-7兩種細胞為研究對象，對原料藥及制劑入胞及外排機制進行研究，結(jié)果表明:兩者進入細胞方式均為不耗能的被動轉(zhuǎn)運，外排則都不受P-糖蛋白的介導。
　　 結(jié)論:通過實驗說明制劑在改變原料藥不良物理特性的同時，對于原料藥的藥