γ-氨基丁酸防治淮南麻黃雞熱應(yīng)激效果及其機(jī)理的研究.pdf

1、安徽省夏季高溫常引發(fā)畜禽熱應(yīng)激，嚴(yán)重制約養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。腦內(nèi)抑制型神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)具有抗焦慮、抗驚厥和調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等作用，近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加GABA能有效緩解動(dòng)物熱應(yīng)激，提高動(dòng)物采食量及體增重、改善胴體品質(zhì)和繁殖性能，衛(wèi)生部門2009年批準(zhǔn)其用于食品加工。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸（Hypothalamic-Pituitary-Adrenocortical Axis，

2、HPA）過度分泌會(huì)損害動(dòng)物機(jī)體，GABA緩解動(dòng)物熱應(yīng)激機(jī)制方面的研究主要涉及免疫、抗氧化和腸道消化功能，而GABA對(duì)HPA軸調(diào)控機(jī)制的研究很少，僅有幾篇文章報(bào)道飼料中添加GABA抑制了熱應(yīng)激豬的HPA軸激素分泌，本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn)飼料中添加包被GABA使奶牛血液中HPA軸激素水平降低，但GABA抑制HPA軸激素分泌的機(jī)理尚不明了。下丘腦室旁核中的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone

3、，CRH)神經(jīng)元是HPA軸的最高級(jí)中樞。腦組織內(nèi)產(chǎn)生的內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)GABA能夠作用于CRH神經(jīng)元調(diào)控HPA軸激素分泌，但尚未見腦組織外的外源性GABA具有調(diào)控HPA軸激素分泌功能的報(bào)道。
　　本試驗(yàn)首先研究GABA防治淮南麻黃雞夏季熱應(yīng)激的效果及對(duì)HPA軸激素分泌的影響。將120羽28日齡雞隨機(jī)均分4組，Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組飼料中添加不同劑量GABA:0mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg。試驗(yàn)于20

4、15年夏季8月3日至9月9日，預(yù)試驗(yàn)7d，正式試驗(yàn)30d。逐日記錄雞舍內(nèi)溫濕度，各組雞耗料量。在試驗(yàn)第10d、20d、30d，空腹稱重后，每組隨機(jī)抽取5羽雞采集血清檢測(cè)CRH，ACTH，Cor，HSP70及GABA的濃度，Ⅰ組和Ⅲ組雞斷頭取腦，檢測(cè)腦組織內(nèi)GABA含量。其次，探討高溫對(duì)淮南麻黃雞血腦屏障完整性的影響及其作用機(jī)理。將120羽100日齡雞均分4組，預(yù)試驗(yàn)7d后，1、2組雞常溫飼養(yǎng)(21～23℃、RH60～70％)，3、4組雞

5、每天高溫處理3h(34～37℃、RH45～50％)，試驗(yàn)持續(xù)2周。在試驗(yàn)第7d、14d，每組隨機(jī)抽5羽雞，2、4組雞靜脈注射GABA(每kg體重8.87mg)，1、3組雞注射同等劑量生理鹽水，注射0.5h后斷頭取腦。檢測(cè)第7d和14d時(shí)四組雞腦組織內(nèi)GABA含量，第14d時(shí)常溫對(duì)照組和高溫對(duì)照組雞腦組織的血腦屏障結(jié)構(gòu)，腦組織緊密連接蛋白ZO-1和Occludin及MAPK信號(hào)通路分子的表達(dá)。
　　結(jié)果顯示，GABA防治淮南麻黃雞夏

6、季熱應(yīng)激試驗(yàn)期間，雞舍溫度在28～39℃，溫濕指數(shù)均高于72，說明雞遭受了熱應(yīng)激;添加GABA后雞的直腸溫度降低，采食量和日增重提高，料重比降低;試驗(yàn)組雞血清中CRH、ACTH、Cor、HSP70濃度降低，且Ⅲ組效果最好;雞血清中GABA濃度隨GABA添加量的增多而遞增，Ⅲ組雞腦內(nèi)GABA含量高于Ⅰ組。
　　高溫對(duì)淮南麻黃雞血腦屏障完整性影響的研究結(jié)果顯示，透射電鏡下常溫對(duì)照組雞血腦屏障結(jié)構(gòu)完整，高溫對(duì)照組雞血腦屏障的血管內(nèi)皮細(xì)胞

7、線粒體嵴出現(xiàn)斷裂和空泡變性，緊密連接的間隙增寬，基膜增厚且結(jié)構(gòu)疏松;4組雞腦內(nèi)GABA含量高于3組，而1組與2組雞腦內(nèi)GABA含量相近;高溫降低了緊密連接蛋白ZO-1和Occludin基因及蛋白的表達(dá);同時(shí)，高溫使p38和JNK的基因轉(zhuǎn)錄量及蛋白磷酸化水平升高，而ERK的基因轉(zhuǎn)錄量和蛋白磷酸化水平降低。
　　由此可見，飼喂GABA有效緩解了淮南麻黃雞的夏季熱應(yīng)激，其中以100mg/kg添加量效果最好，其機(jī)理可能是高溫激活雞腦內(nèi)p3