人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞分化的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生簽名：企謝弋導(dǎo)師簽章：雀墨二級謄瞎簽章：。。沙J叩年弓夸選亙艫≯。／河

2、北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：企哉導(dǎo)師簽章：沙7q年≥月乙6日中文摘要人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向視網(wǎng)膜色素上皮樣細(xì)胞分化的研究摘要視網(wǎng)膜色素上皮(Retinalpigmentepithelium，RPE)，位于視網(wǎng)膜的最外層，為單層立方或矮柱狀

3、細(xì)胞。色素上皮來源于胚胎時期的神經(jīng)外胚層，為光感受器細(xì)胞提供必需的營養(yǎng)并起到支持和保護(hù)的作用，同時為維持視網(wǎng)膜和感光細(xì)胞的正常生理功能提供多種營養(yǎng)因子。視網(wǎng)膜變性等損傷性疾病將導(dǎo)致視覺功能的損傷，尤其是視細(xì)胞的丟失將導(dǎo)致視覺功能的永久喪失。再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展使移植恢復(fù)視覺功能成為希望。近年來，學(xué)者將研究重點放在了視網(wǎng)膜細(xì)胞的移植上，特別是視細(xì)胞和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的移植。各國學(xué)者先后應(yīng)用胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcells，ES

4、)、誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(inducedpluripotentstemcells，iPS)和成體干細(xì)胞中的脂肪來源干細(xì)胞誘導(dǎo)分化形成視網(wǎng)膜色素上皮樣細(xì)胞，由于在培養(yǎng)過程中應(yīng)用到了動物來源的血清、飼養(yǎng)層細(xì)胞、重組蛋白和營養(yǎng)因子，容易引起免疫反應(yīng)，因此這些細(xì)胞的臨床應(yīng)用受到限制。在前期的研究中，我們在將ES誘導(dǎo)分化為視細(xì)胞的過程中外源性的添加了小分子化合物，沒有使用動物來源的血清、生長因子和胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層，將此種方法誘導(dǎo)形成的視細(xì)胞進(jìn)行移

5、植實驗，未發(fā)現(xiàn)有移植排斥反應(yīng)，并且細(xì)胞與宿主細(xì)胞的融合較好。這種誘導(dǎo)方法使視細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用成為可能。人臍帶Wharton膠來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(humanWharton’Sjellyderivedmesenchymalstemcells，HWJMSCs)又稱為臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(humanumbilicalcordmesenchymalstemcells，hucMSCs)，多項研究顯示，、該細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)分化能力很強(qiáng)；來源廣泛且采集方便

6、；不受道德倫理制約，是白體細(xì)胞移植和異體細(xì)胞移植治療的理想種子細(xì)胞。與同樣屬于成體干細(xì)胞范疇的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMMSC)相比，臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在取材上不受疾病、年齡等限制。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用中具有更大優(yōu)勢。因此，本研究通過實驗研究旨在探索相對成熟、穩(wěn)定的體外分離培養(yǎng)、誘導(dǎo)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向視網(wǎng)膜色素上皮樣細(xì)胞分化的方法，為其最終應(yīng)用于臨床治療提供實驗依據(jù)