真菌誘導(dǎo)白樺三萜積累的營養(yǎng)生理和分子機(jī)制的初步研究.pdf

1、本論文以產(chǎn)三萜的白樺懸浮細(xì)胞為試驗(yàn)材料，將從白樺樹皮中分離出的內(nèi)生真菌擬莖點(diǎn)霉屬（Phomopsis）制備成誘導(dǎo)子，添加到白樺懸浮培養(yǎng)體系中，從營養(yǎng)生理和蛋白組學(xué)水平探索真菌誘導(dǎo)白樺三萜合成的機(jī)制，這將為從蛋白組學(xué)方面揭示真菌誘導(dǎo)次生代謝物的積累提供參考依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.真菌誘導(dǎo)后白樺懸浮細(xì)胞中營養(yǎng)物質(zhì)的變化研究
　　在真菌誘導(dǎo)子誘導(dǎo)處理的10d內(nèi)，白樺細(xì)胞的干重、三萜含量和三萜產(chǎn)量隨著處理時間的增加表現(xiàn)為逐

2、漸降低趨勢，其中，白樺三萜含量和三萜產(chǎn)量均于真菌誘導(dǎo)子誘導(dǎo)1d后達(dá)到最高，分別為21.98 mg·g-1和123.82g·L-1，約為對照的2倍。
　　分析真菌誘導(dǎo)1d～10d后白樺懸浮細(xì)胞中可溶性糖、可溶性蛋白、碳氮比和氨基酸與三萜合成的關(guān)系。結(jié)果表明，白樺懸浮細(xì)胞中可溶性總糖含量、葡萄糖含量和C/N在真菌誘導(dǎo)后第1d的增加幅度達(dá)到最高，分別增長了146.93％、84.54％和906.96％，可溶性蛋白和蔗糖含量卻在真菌誘導(dǎo)后第

3、1d的降低幅度最大，分別降低了75.48％和18.62％，而對果糖含量影響不大。氨基酸組分中除組氨酸、賴氨酸和胱氨酸對真菌誘導(dǎo)子的響應(yīng)程度不顯著外，真菌誘導(dǎo)增加了氨基酸總量和其他氨基酸的含量，但其增長幅度不同。進(jìn)一步通過相關(guān)性分析表明，可溶性總糖、葡萄糖含量、C/N、谷氨酸和組氨酸含量與三萜含量的相關(guān)性達(dá)到顯著水平，并且表現(xiàn)出真菌誘導(dǎo)增加了他們間的相關(guān)程度。由此可見，真菌誘導(dǎo)后白樺三萜的合成可能與細(xì)胞內(nèi)增加的C/N、谷氨酸和組氨酸有關(guān)。