妊娠相關血漿蛋白A（PAPP-A）和游離雌三醇（uE-,3-）時間分辨熒光免疫診斷試劑盒的研制.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文妊娠相關血漿蛋白A（PAPPA）和游離雌三醇（uE）時間分辨熒光免疫診斷試劑盒的研制姓名：蔣藝勤申請學位級別：碩士專業(yè)：免疫學指導教師：吳英松20070320摘要無污染等特點，并廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床醫(yī)學檢驗。它主要利用了標記物Eu”獨特的熒光特性，通過時『白J延遲和波長分辨技術，使得強特異性熒光和背景熒光分辨開，從而消除了背景熒光的干擾，提高檢測靈敏度。妊娠相關血漿蛋白A(PAPPA)是一種鋅離子依賴性金

2、屬蛋白酶，它是在1974年首次在妊娠婦女血中發(fā)現(xiàn)。它的分子量為199kDa，基因編碼在第9號染色體。目前普遍認為PAPPA是孕婦血清學產Iji『篩查的一項重要塵化指標，主要用于妊娠早期(第1期)產前篩查和動脈硬化方面的研究。如果孕婦814周時，PAPP—A水平較低，犯胎兒發(fā)育不良、染色體異常、早產和死胎等風險增加。n廿PA也可以作為急性冠狀動脈綜合征(包括動脈粥樣硬化、急性心肌梗塞、不穩(wěn)定心絞痛等)的一種新的生化血清學指標。雌三醇(E3

3、)是3種重要的內源性雌性激素之一，在正常人血清樣品中的含量很低，女性體內雌激素水平隨月經周期呈現(xiàn)周期性變化；對于孕婦，它的主要來源是嬰兒和胎盤，且一般含量很高(超過10ng／mL)。首先，來自母親的類固醇在胎盤轉化為孕酮，孕酮在胎兒腎上腺再轉為DHEAS，然后在胎兒肝中羥基化，最后在胎盤轉化E3。在非妊娠婦女，它主要來源雌二醇(E2)。在體內，uEs約占9％，結合雌三酵(cE3)占91％。E3在體內半衰期為(2030)分鐘?？偞迫?r

4、E3)的改變能引起uE3的迅速改變。測定uE3LLI預fJtE3有更多有優(yōu)點，因為uE3的水平不受肝病和母親的腎臟影響，也不受抗生素的影響。它更能準確的反應胎兒發(fā)育的情況，況且uE3也更易于檢測。目的：在建立PAPPA雙抗體夾心和uE3的競爭抑制時間分辨熒光免疫分析法的基礎上，研制其TRFIA定量診斷試劑，并與市售的PerkinElmer(以下簡稱PE)公司時間分辨免疫測定試劑盒進行比較。方法：采用固相雙位點抗體夾心法(一株單克隆抗體用