復(fù)方半邊蓮和復(fù)方杏香兔耳風(fēng)保肝活性研究.pdf

1、本論文由三章組成。第一章論述復(fù)方半邊蓮提取物體外抗氧化及其體內(nèi)保肝活性研究。第二章論述復(fù)方杏香兔耳風(fēng)及其拆方提取物體外抗氧化活性和體內(nèi)保肝活性研究。第三章綜述復(fù)方杏香兔耳風(fēng)研究現(xiàn)狀。
　　第一章復(fù)方半邊蓮體外抗氧化及其體內(nèi)保肝活性研究
　　1.首次對復(fù)方半邊蓮清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH)、2，2-連氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨鹽自由基(ABTS)和鐵離子還原/抗氧化能力(FRAP)進(jìn)行研究。結(jié)果表明，乙醇

2、提取物清除DPPH自由基能力大于水提取物;乙醇提取物清除ABTS自由基能力(IC50=29.26±0.49μg/mL)大于水提取物(IC50=42.09±2.44μg/mL)，但均低于陽性對照二丁基羥基甲苯(Butylated hydroxytoluene，BHT)(IC50=2.47±0.09μg/mL);乙醇提取物還原Fe3+的能力大于水提取物，但均低于陽性對照藥物BHT。結(jié)果表明，復(fù)方半邊蓮水提取物和乙醇提取物均具有一定的體外抗氧

3、化活性，且乙醇提取物活性強(qiáng)于水提取物。
　　2.通過檢測給予復(fù)方半邊蓮提取物的小鼠血清中GOT和GPT活力，肝臟勻漿液中SOD活力和MDA含量，考察其對急性肝損傷小鼠的保護(hù)作用。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:水提取物和乙醇提取物均能極顯著降低急性肝損傷小鼠血清中的GPT和GOT活力及小鼠肝組織中的MDA含量升高，也能極顯著升高SOD的活力?？梢姡瑥?fù)方半邊蓮水提取物和乙醇提取物對CCl4所致急性肝損傷小鼠具有一定的的保護(hù)作用，其保肝機(jī)制與其提高

4、肝細(xì)胞抗氧化能力有關(guān)，且未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，有望用于開發(fā)防治肝臟疾病的藥物。
　　第二章復(fù)方杏香兔耳風(fēng)及其拆方體外抗氧化活性和體內(nèi)保肝活性研究
　　本章分為2節(jié)，2.1介紹復(fù)方杏香兔耳風(fēng)提取物體外抗氧化活性和體內(nèi)保肝作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乙醇提取物清除DPPH自由基的能力強(qiáng)于水提醇沉物但均低于陽性對照藥物BHT、沒食子酸丙酯(PG)和丁基羥基茴香醚(BHA);乙醇提取物清除ABTS自由基能力(IC50=17.12±0.52μg/mL

5、)大于水提醇沉物(IC50=42.01±4.74 mg/mL)，但二者均低于 BHT(IC50=4.39±0.17μg/mL)、PG(IC50=0.98±0.04μg/mL)和BHA(IC50=2.86±0.06μg/mL)，乙醇提取物還原Fe3+的能力(FRAP=1086.67±125.06μmol/g)大于水提醇沉物的還原能力(FRAP=616.67±95.77μmol/g)。體內(nèi)保肝實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:復(fù)方杏香兔耳風(fēng)乙醇提取物和水提醇沉

6、物各劑量組均能顯著降低GOT和GPT活力;復(fù)方杏香兔耳風(fēng)乙醇提取物和水提醇沉物均能降低MDA含量和顯著升高SOD活力。結(jié)果表明，復(fù)方杏香兔耳風(fēng)乙醇提取物和水提醇沉物均有清除DPPH、ABTS自由和Fe3+還原的能力的作用。此外，均能降低CCl4誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠血清中GOT、GPT活力及小鼠肝臟勻漿液中MDA含量，升高SOD的活力。由此說明，復(fù)方杏香兔耳風(fēng)具有一定程度的體外抗氧化活性和體內(nèi)保肝作用，且體內(nèi)保肝活性與其抗氧化活性有一定相關(guān)

7、性。
　　2.2研究了復(fù)方杏香兔耳風(fēng)拆方提取物體外抗氧化和保肝活性。在質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，杏香兔耳風(fēng)乙醇提取物清除DPPH自由基的能力強(qiáng)于杏香兔耳風(fēng)水提醇沉物，然而白術(shù)乙醇提取物和白術(shù)水提醇沉物僅有微弱的清除DPPH自由基的能力。在清除ABTS自由基的能力方面，杏香兔耳風(fēng)提取物均強(qiáng)于白術(shù)提取物，且杏香兔耳風(fēng)乙醇提取物IC50值為12.20±0.54μg/mL，杏香兔耳風(fēng)水提醇沉物IC50值為16.88±0.00μg/mL;質(zhì)量濃度為1

8、08.10μg/mL時(shí)，白術(shù)乙醇提取物和白術(shù)水提醇沉物清除率分別為30.14％和14.58％。在還原Fe3+的能力方面，杏香兔耳風(fēng)2種提取物均強(qiáng)于白術(shù)2種提取物，且杏香兔耳風(fēng)乙醇提取物、杏香兔耳風(fēng)水提醇沉物、白術(shù)乙醇提取物和白術(shù)水提醇沉物FRAP值分別為1371.67±104.74μmol/g、918.33±61.86μmol/g、124.38±16.69μmol/g和59.17±7.29μmol/g，且均低于陽性對照BHT、PG和BH

9、A。結(jié)果表明，杏香兔耳風(fēng)有一定清除DPPH自由基能力，有很好的清除ABTS自由基能力和還原Fe3+的能力，而白術(shù)提取物僅有微弱清除DPPH和ABTS自由基且及還原Fe3+的能力。因此，杏香兔耳風(fēng)可能為該方劑的主要抗氧化藥材。進(jìn)一步研究杏香兔耳風(fēng)活性發(fā)現(xiàn)，杏香兔耳風(fēng)甲醇提取物清除DPPH自由基的能力強(qiáng)于乙酸乙酯提取物，但均低于陽性對照。杏香兔耳風(fēng)甲醇提取物(IC50=13.83±1.24μg/mL)清除ABTS自由基的能力略強(qiáng)于乙酸乙酯提

10、取物(IC50=14.25±1.75 mg/mL)，且均弱于陽性對照。杏香兔耳風(fēng)甲醇提取物還原Fe3+的能力(FRAP=680.52±67.04μmol/g)強(qiáng)于乙酸乙酯提取物(FRAP=328.85±66.38μmol/g)，但均低于陽性對照。對苯二酚有較強(qiáng)清除ABTS自由基(IC50=1.04±0.00μg/mL)和還原Fe3+的能力(FRAP=11035.25±1030.21μmol/g)，且清除ABTS自由基能力強(qiáng)于陽性對照BH

11、T(IC50=4.39±0.17μg/mL)、和BHA(IC50=2.86±0.06μg/mL)。表明杏香兔耳風(fēng)可能為復(fù)方杏香兔耳風(fēng)主要抗氧化藥材，且對苯二酚有較強(qiáng)的抗氧化活性，甲醇提取物和乙酸乙酯提取物有一定的抗氧化活性。急性肝損傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，杏香兔耳風(fēng)甲醇提取物和乙酸乙酯提取物均能非常顯著降低急性肝損傷小鼠血清中的GPT（甲醇提取物高劑量組除外）和GOT活力及小鼠肝組織中的MDA含量（甲醇提取物低劑量組除外），均能顯著升高SOD的