抗人腦膠質(zhì)瘤重組免疫毒素SZ39（ScFv）-PE40及人源化抗CD3單鏈抗體在大腸桿菌中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　本文在已經(jīng)克隆并表達了抗人腦膠質(zhì)瘤單鏈抗體SZ39-ScFv的基礎上，構建了抗人腦膠質(zhì)瘤重組免疫毒素SZ39(ScFv)-PE40，并在大腸桿菌中得到了高效的表達，初步證實其具有結合膠質(zhì)瘤細胞SHG-44的活性，為進一步研究開發(fā)抗膠質(zhì)瘤重組免疫毒素打下了基礎；另外，本研究還構建并原核表達了人源化抗CD3單鏈抗體，為進一步構建抗CD3/抗膠質(zhì)瘤雙特異性抗體作了必要的準備工作?！　”疚牡谝徊糠盅芯苛巳嗽椿笴D3單鏈抗體的構建和表達。

2、從質(zhì)粒pZZ3中克隆出人源化抗CD3抗體的VH、VL基因，并經(jīng)測序證實；利用克隆出的VH、VL基因構建人源化抗CD3單鏈抗體基因，分別將其克隆入大腸桿菌融合表達載體pGEX-5X-1及分泌型表達載體pET20b(+)中，并分別轉化大腸桿菌BL21(DE3)及BL21(DE3)pLysS。 本文第二部分抗人腦膠質(zhì)瘤重組免疫毒素SZ39(ScFv)-PE40的基因構建及表達從質(zhì)粒pVC85中克隆出PE40基因，與抗膠質(zhì)瘤單鏈抗體SZ

3、39-ScFv基因進行拼接，構建出重組免疫毒素SZ39(ScFv)-PE40基因。 本文第三部分重組免疫毒素SZ39(ScFv)-PE40在大腸桿菌中的GST融合表達。將已構建的SZ39(ScFv)-PE40基因克隆入大腸桿菌GST融合表達載體pGEX-5X-1中，并在大腸桿菌BL21(DE3)中以IPTG誘導表達。 本文第四部分重組免疫毒素SZ39(ScFv)-PE40的分離純化、變性及復性的初步研究。　　以上的研究

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