兩株不動(dòng)桿菌的分離鑒定、石油降解功能及生物學(xué)特性研究.pdf

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，人們對(duì)石油資源的需求量越來越大。在石油勘探、開采、運(yùn)輸以及儲(chǔ)存過程中都存在不同程度的泄漏，對(duì)土壤造成嚴(yán)重污染。在眾多石油污染修復(fù)技術(shù)中微生物修復(fù)由于成本低、修復(fù)效果好、不易引起二次污染而得到了廣泛應(yīng)用。目前微生物修復(fù)技術(shù)存在的主要問題之一是缺少高效、廣譜、穩(wěn)定、適應(yīng)性強(qiáng)的菌種以及對(duì)修復(fù)技術(shù)的深入研究。
　　本論文采取油濃度梯度升高法，從不同地區(qū)石油污染土樣中分離出具有石油降解作用的菌株75株，選取其中兩株高效穩(wěn)定

2、的石油降解菌 JC3-1、YM122，通過形態(tài)特征觀察、結(jié)合細(xì)菌生理生化特征、16SrDNA序列分析初步確定JC3-1為嗜油不動(dòng)桿菌(Acinetobacter oleivorans)，YM122為鮑氏不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii)。
　　對(duì)菌株 JC3-1、YM122的生長特性進(jìn)行了研究：菌株 JC3-1、YM122均在28h后進(jìn)入生長穩(wěn)定期。JC3-1在溫度為20℃～40℃、pH5.0～9.0條件下

3、生長良好，耐鹽度為3％，且最適生長溫度30℃～40℃，最適初始pH為9.0，最適生長鹽濃度為0%；菌株 YM122在溫度為20℃～50℃、pH5.0～9.0條件下生長良好，耐鹽度為6%，最佳生長溫度為40℃，最適初始pH為6.0，最適生長鹽度1%。兩株菌具有較強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)性。
　　采用重量法對(duì)兩株不動(dòng)桿菌的石油降解率進(jìn)行測定，在濃度為4000 mg/L石油培養(yǎng)基中生長15d，菌株 JC3-1對(duì)石油的降解率達(dá)42.15%，YM122

4、的降解率達(dá)63.44%。
　　采用凃板計(jì)數(shù)法研究菌株對(duì)不同有機(jī)物的利用情況，菌株JC3-1能夠利用一定濃度的正戊烷、正己烷、十六烷、十八烷、苯、甲苯、二甲苯、萘、鄰苯二酚、芘；菌株 YM122能夠利用一定濃度的十二烷、十六烷、十八烷、鄰苯二酚。通過對(duì)菌株十六烷的粘附測定發(fā)現(xiàn)：菌株 JC3-1對(duì)十六烷的粘附率為96.57%，YM122對(duì)十六烷的粘附率可達(dá)42.56%，遠(yuǎn)高于大腸桿菌（E. co i l)3.10%。
　　PCR

5、擴(kuò)增檢測到菌株 JC3-1與 YM122均具有烷烴單加氧酶(alkane monooxygenase)、芳烴雙加氧酶(aromatic-ring-hydroxylating dioxygenases)、聯(lián)苯雙加氧酶(b ip henyl d ioxygenase)、甲苯雙加氧酶(to luene d ioxyge nase)、鄰苯二酚雙加氧酶(catechol-2,3-dioxygenase)、萘雙加氧酶(naphthalene dio