基于nanoLC-MS-MS的細(xì)胞凋亡多肽組學(xué)和水稻多肽組學(xué)研究.pdf

1、多肽組學(xué)自誕生以來受到廣泛的關(guān)注。多肽組學(xué)關(guān)注的是生物體內(nèi)產(chǎn)生的具有一定功能的小分子多肽。本研究利用定量多肽組學(xué)技術(shù)研究細(xì)胞凋亡過程，并對(duì)植物生長階段產(chǎn)生的多肽進(jìn)行了初步研究。
　　細(xì)胞凋亡是根據(jù)質(zhì)膜的完整性定義的一種生理性的死亡，它可以保護(hù)局部的炎癥反應(yīng)和組織損傷。目前關(guān)于細(xì)胞凋亡與癌癥發(fā)生、各種免疫性疾病之間的關(guān)系有著很多的研究。近年來已有一些基于蛋白質(zhì)組學(xué)的細(xì)胞凋亡研究。為了更清楚地了解細(xì)胞凋亡過程中多肽含量的變化及這些多肽

2、可能參與的過程或功能，我們利用定量多肽組學(xué)對(duì)凋亡過程進(jìn)行了研究。本研究以Hela細(xì)胞系作為實(shí)驗(yàn)材料，用不同濃度的H2O2對(duì)其進(jìn)行處理，提取凋亡過程產(chǎn)生的多肽并進(jìn)行定量分析。主要結(jié)果如下：
　　1. CCK-8法檢測(cè)了H2O2對(duì)Hela細(xì)胞的毒性，發(fā)現(xiàn)藥物對(duì)細(xì)胞的影響不僅與作用濃度和作用時(shí)間有關(guān)，還與細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)。用不同濃度H2O2處理Hela細(xì)胞6小時(shí)，采用Annexin V-FITC/PI雙染法定量檢測(cè)細(xì)胞調(diào)亡情況。當(dāng)細(xì)胞量達(dá)

3、到3.5×107個(gè)，5 mM H2O2處理細(xì)胞6小時(shí)后，細(xì)胞凋亡率為40％，此時(shí)細(xì)胞多處于凋亡后期。
　　2.比較2 mM或5 mM H2O2處理細(xì)胞6小時(shí)的定量多肽組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該凋亡過程共檢測(cè)出385個(gè)多肽，這些多肽的前體蛋白中共93個(gè)表達(dá)差異顯著，這93個(gè)多肽蛋白前體與蛋白質(zhì)代謝、凋亡過程、細(xì)胞周期等有關(guān)。僅30個(gè)多肽是蛋白質(zhì)中間片段，其他的多肽主要分布在C-端或N-端。
　　植物活性多肽在植物的生長發(fā)育及抗病抗蟲過程中