膜性腎病患者腎組織中磷脂酶A2受體和IgG亞型的檢測(cè)及臨床意義.pdf

1、目的：
　　本研究通過(guò)檢測(cè)膜性腎?。∕embranous Nephropathy,MN）患者腎組織磷脂酶A2受體(Phospholipase A2 Receptor,PLA2R)及IgG各亞型的表達(dá)情況，探討二者在特發(fā)性膜性腎?。↖diopathic Membranous Nephropathy,IMN）與繼發(fā)性膜性腎?。⊿econdary Membranous Nephropathy,SMN）鑒別診斷中的意義，以及腎組織中PLA

2、2R的表達(dá)情況與患者治療療效的相關(guān)性。
　　方法：
　　選取2012-2015年日本岡山大學(xué)病院腎·免疫·內(nèi)分泌·代謝內(nèi)科住院，行腎穿刺活檢確診為MN的患者，并隨訪半年以上。納入實(shí)驗(yàn)患者共42例，其中13例確診為IMN，29例確診為 SMN。SMN患者中14例為狼瘡性腎炎（Lupus Nephritis,LN），藥物因素、感染相關(guān)、惡性腫瘤各為3例，除LN以外的其它自身免疫性疾病4例，移植物抗宿主?。℅VHD）2例。記錄所有

3、研究對(duì)象的一般臨床資料，包括性別、年齡等，以及生化指標(biāo)如血清肌酐（Serum creatinine,Scr）、血清白蛋白（Albumin，Alb）、24h尿蛋白定量(24 hour Urinary protein,Up)等；選用日本JSN-CKDI（2008）公布的公式，計(jì)算腎小球?yàn)V過(guò)率（eGFR）?；颊咴诔曇龑?dǎo)下行腎穿刺活檢術(shù)，將取得的腎組織分別進(jìn)行光鏡、電鏡及免疫熒光檢查，根據(jù)光鏡下觀察到的系膜細(xì)胞增生、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、節(jié)段

4、硬化、腎小管間質(zhì)損害、腎小球球性硬化等表現(xiàn)，采用半定量法記錄:若存在該表現(xiàn)記為1，無(wú)記為0；電鏡結(jié)果主要用于MN的Ehrenreich-Churg法進(jìn)行分期；PLA2R的檢測(cè)采用間接免疫熒光法，一抗為兔多克隆抗PLA2R抗體，二抗為Alexa Fluor488標(biāo)記的山羊多克隆抗兔IgG抗體。IgG各亞型采用直接免疫熒光法檢測(cè)，分別為FITC標(biāo)記的小鼠抗人免疫球蛋白 IgG1(Fc)、IgG2(Fab)、IgG3(F(ab')2)和 Ig

5、G4(pFc)單克隆抗體。熒光顯微鏡下觀察，結(jié)果均采用半定量法進(jìn)行評(píng)分（強(qiáng)陽(yáng)性：2，陽(yáng)性：1，弱陽(yáng)性：0.5，陰性：0）。并以免疫熒光評(píng)分結(jié)果分為 PLA2R≥1及 PLA2R<1兩組，分析經(jīng)6個(gè)月糖皮質(zhì)激素和（或）免疫抑制劑治療后，兩組患者尿蛋白與肌酐比值（protein-creatinine ratio，Up/Ugcr）及eGFR變化的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1.本研究入選的MN患者42例,其中IMN組患者13例，SMN

6、組患者29例。SMN中LN占48.3%（14/29）,除LN以外的其它自身免疫性疾病為13.8%（4/29），藥物因素、感染相關(guān)及惡性腫瘤均為10.3%（3/29）以及GVHD患者6.9%(2/29)。
　　2. SMN組患者的女性比例多于IMN組女性比例（10:3 vs10:19,P<0.05），IMN組平均年齡高于SMN組（65.0±17.7 vs51.7±18.0,P<0.05）;而兩組在BMI、Up、Alb、血清總膽固醇（

7、Total Cholesterol,TC）、eGFR、BP、糖皮質(zhì)激素使用率、免疫抑制劑使用率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（p>0.05）。
　　3.免疫熒光法檢測(cè)PLA2R在IMN組患者腎小球較SMN組明顯沉積（P<0.05）；IgG4在IMN組患者腎小球較SMN組明顯沉積（P<0.05）。腎組織PLA2R檢測(cè)的靈敏度低于IgG4（61.5% vs84.6%），特異度高于IgG4(61.5% vs55.2%)。
　　4.IMN組PLA2

8、R與IgG4共陽(yáng)性者率為61.5%(8/13)，共陰性者率為15.4%(2/13),PLA2R(+)而IgG4(-)者無(wú)，IgG4（+）而PLA2R（-）23.1%（3/13）;SMN組PLA2R與IgG4共陽(yáng)性率為17.2%（5/29），共陰性率為41.4%（12/29）,PLA2R（+）IgG4（-）13.8%（4/29），IgG4（+）PLA2R（-）27.6%(8/29)。IMN組PLA2R與IgG4共陽(yáng)性率高于SMN組（61.

9、5%vs17.2%,p<0.05），IMN組共陰性率小于SMN組（15.4% vs41.4%,p<0.05）。
　　5.治療前PLA2R≥1組Up/Ugcr的平均值高于PLA2R<1組（6.4 vs3.1），經(jīng)過(guò)6個(gè)月的治療，下降終點(diǎn)的平均值（1.8 vs1.9）。PLA2R≥1及PLA2R<1組eGFR治療前起始點(diǎn)的平均值（61.8 vs60.4）和經(jīng)過(guò)6個(gè)月治療終點(diǎn)的平均值（69.8 vs63.3）以及6個(gè)月內(nèi)eGFR的變化趨