黃酒中活性肽的分離純化的研究.pdf

1、黃酒是我國(guó)的民族特產(chǎn)，被視為養(yǎng)生保健佳品，對(duì)心血管疾病等有很好的療效，但是缺乏實(shí)驗(yàn)支持。本研究以黃酒中的活性多肽為研究對(duì)象，研究了活性多肽的分離純化方法及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制活性的測(cè)定。
　　 采用大孔樹脂對(duì)黃酒中的多肽進(jìn)行初步分離，從5種大孔樹脂中篩選出適合分離多肽的樹脂，探究該樹脂的最佳吸附和分離條件，結(jié)果表明：DA201-C樹脂對(duì)多肽吸附量大，解吸率高，該大孔樹脂富集黃酒中多肽的最佳條件為：上樣流速0.5BV/h

2、，上樣濃度為3.2mg/ml，洗脫溶劑為70％的乙醇，洗脫流速為1BV/h。DA201-C樹脂對(duì)多肽的等溫吸附在25℃時(shí)，能很好的符合Langmuir吸附等溫式和Freundlich方程，兩者的相關(guān)系數(shù)分別為0.998和0.993，此時(shí)最大吸附量Qm為40mg/g，Kl為0.04。大孔樹脂吸附前后的樣品經(jīng)高效液相色譜分析，結(jié)果顯示其純度大大增加，由6.8％提高到66.7％，純化倍數(shù)為9.8。
　　 采用高速逆流色譜和反相層析法，

3、對(duì)多肽粗品進(jìn)行進(jìn)一步分離純化。通過(guò)對(duì)各溶劑系統(tǒng)分層時(shí)間、上下相體積比、分配系數(shù)的比較及分析型HSCCC的對(duì)溶劑體系的快速篩選，最終確定了甲基叔丁基醚：乙腈：水2:2:3體系，加入的溶劑對(duì)是三氟乙酸和氨水。制備型HSCCC在制備樣品的過(guò)程中，對(duì)主機(jī)轉(zhuǎn)速、循環(huán)水浴溫度以及上樣濃度進(jìn)行了優(yōu)化，最佳操作參數(shù)為轉(zhuǎn)速900r/min，溫度25℃、上樣濃度10mg/ml、流動(dòng)相流速為1.8ml/min。對(duì)HSCCC分離出的組分P1進(jìn)行SOURCE5R