醋蛋中ACE抑制肽的酶法制備、分離純化及其活性保護(hù).pdf

1、醋蛋作為一種傳統(tǒng)食療保健品，制作工藝簡(jiǎn)單，在民間廣為流傳，主要以雞蛋和醋為原料制成，具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的特點(diǎn)和增強(qiáng)人體免疫力的功效。醋蛋中含有可以抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angiotensin Converting Enzyme，ACE)活性的活性肽成分，具有防治高血壓的作用。本研究在傳統(tǒng)的醋蛋制作工藝基礎(chǔ)上，采用酶水解法制備ACE抑制肽，并將其制備工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。為獲取較高活性抑制肽，利用超濾和凝膠色譜層析法分離純化醋蛋中的ACE抑制肽

2、。最后采用磷脂與ACE抑制肽復(fù)合，目的是對(duì)活性肽起到一定的保護(hù)作用，并通過(guò)紅外吸收光譜和X-射線衍射的方法評(píng)價(jià)復(fù)合物的結(jié)合狀態(tài)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.ACE抑制肽的酶法制備工藝優(yōu)化
　　將醋蛋液用堿性蛋白酶水解，以水解度和活性肽作為正交優(yōu)化試驗(yàn)中ACE抑制肽的IC50優(yōu)化指標(biāo)，得出的酶解最優(yōu)條件為:酶解溫度是50℃、酶用量是1％、酶解時(shí)間是3h，經(jīng)驗(yàn)證后此條件下酶解醋蛋液的水解度為31.53(±1.02)％、IC50為

3、29.48(±0.71)μg/mL。
　　2.醋蛋中ACE抑制肽的分離純化
　　醋蛋酶解液利用超濾對(duì)其進(jìn)行分離分級(jí)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)酶解產(chǎn)物≤1KDa范圍內(nèi)分子量的抑制活性較高。通過(guò)凝膠色譜層析進(jìn)一步分離純化此分子量范圍內(nèi)的ACE抑制肽，獲取具有ACE抑制活性較高的組分。
　　3.紅外光譜、X-射線衍射分析磷脂多肽復(fù)合物
　　紅外光譜研究發(fā)現(xiàn)復(fù)合物中活性肽與卵磷脂發(fā)生相互作用。通過(guò)XRD進(jìn)一步驗(yàn)證并推斷是活性肽的羧基、氨