芍藥苷通過自噬-溶酶體通路保護(hù)PC12細(xì)胞.pdf

1、目的:
　　 研究芍藥苷對PC12細(xì)胞的保護(hù)作用，并探討其對自噬-溶酶體通路的影響。
　　 方法:
　　 環(huán)境毒素MPP+誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷，同時(shí)給予芍藥苷進(jìn)行干預(yù)，四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)、乳酸脫氫酶(LDH)和流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞存活率、損傷程度、凋亡率及細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的變化，Western blot檢測細(xì)胞內(nèi)LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Lamp2a蛋白表達(dá)水平的變化。
　　 結(jié)果:

2、　　 MPP+處理24 h，PC12細(xì)胞的存活率顯著降低(P<0.001)，漏出至上清液中的LDH較正常對照組顯著增多(P<0.001)，同時(shí)細(xì)胞凋亡率也顯著升高(P<0.001)，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度增加(P<0.01)。芍藥苷(50μmol·L-1)提高了PC12細(xì)胞的存活率(P<0.001)，減少了LDH的漏出(P<0.001)，降低了細(xì)胞凋亡率(P<0.001)，抑制了鈣內(nèi)流(P<0.01)。Western blot顯示MPP+處

3、理導(dǎo)致LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表達(dá)水平顯著降低，分別是正常水平的0.64±0.05倍(P<0.01)和0.58±0.10倍(P<0.01)，同時(shí)Lamp2a蛋白表達(dá)升高至正常水平的1.34±0.14倍(P<0.05)，而芍藥苷能夠顯著提高LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表達(dá)水平(P<0.05)，并抑制了Lamp2a的異常激活(P<0.001)
　　 結(jié)論:
　　 芍藥苷對PC12細(xì)胞具有明顯的保護(hù)作用，并能拮抗MPP+對自噬-溶