腦苷肌肽對(duì)大鼠腦出血后TNF-α,MMP-9,TIMP-1干預(yù)的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、目的：經(jīng)過大鼠尾狀核腦出血模型的建立，同時(shí)給予腦苷肌肽干預(yù)，觀察腦苷肌肽對(duì)腦出血繼發(fā)性腦損傷中炎性因子（TNF-α）、腦水腫相關(guān)因子(MMP-9、TIMP-1)的影響，探討腦苷肌肽對(duì)腦出血后繼發(fā)性腦損傷中炎癥反應(yīng)、腦水腫的影響及其保護(hù)作用。
　　方法：⑴采用立體定位技術(shù)，將50ul大鼠自體鼠尾不凝血注射入大鼠腦尾狀核，建立大鼠腦出血模型。⑵80只SD大鼠被隨機(jī)分為四組:對(duì)照組、ICH組、小劑量治療組、大劑量治療組;對(duì)照組5只，IC

2、H組及大、小劑量治療組每組各25只;每組采取5個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀察:術(shù)后6h、24h、48h、72h和5d，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)選用5只大鼠。⑶給藥方式:向大鼠腹腔內(nèi)注射腦苷肌肽，小劑量治療組按3.15ml/Kg給藥，大劑量治療組按5.25ml/Kg給藥，首次給藥時(shí)間為術(shù)后2小時(shí)，之后每24小時(shí)1次，首次給藥量加倍。對(duì)照組及ICH組同一時(shí)間點(diǎn)給予同等劑量生理鹽水。⑷術(shù)后2h對(duì)腦出血模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，確定模型是否成功，在擬定的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)成功模型進(jìn)行神經(jīng)功能障

3、礙評(píng)分。⑸運(yùn)用免疫組化、圖像分析技術(shù)來觀察并量化TNF-α，MMP9，TIMP-1在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的變化情況。⑹HE染色觀察腦組織血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞，炎性細(xì)胞及腦組織變化情況。
　　結(jié)果：①神經(jīng)功能障礙:對(duì)照組無明顯神經(jīng)功能障礙(P＞0.05)，ICH組及治療組與對(duì)照組相比，手術(shù)后2h時(shí)間點(diǎn)有明顯神經(jīng)功能障礙(P＜0.05);大小劑量治療組和 ICH組相比，手術(shù)后2h及6h時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能障礙無明顯差異(P＞0.05)，但二者神經(jīng)功能障礙

4、在24h、48h、72h以及5d時(shí)間點(diǎn)相比有明顯差異(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，神經(jīng)功能障礙在24h、48h、72h以及5d時(shí)間點(diǎn)有明顯差異(P＜0，05)，在6h時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能障礙無明顯差異(P＞0.05)。②腦組織含水量:對(duì)照組腦組織含水量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)無明顯差異(P＞0.05);ICH組腦組織含水量在術(shù)后6h、24h、5d與72小時(shí)時(shí)間點(diǎn)比較有明顯差異(P＞0.05);ICH組和治療組與對(duì)照組相比，腦組織含水量在各個(gè)

5、時(shí)間點(diǎn)均有增加(P＜0.05);治療組與ICH組相比，在24h、48h、72h及5d腦組織含水量有明顯減少(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，在24h、48h、72h及5d腦組織含水量有明顯減少(P＜0.05)。③TNF-α表達(dá)數(shù)量:對(duì)照組TNF-α的數(shù)量有少量表達(dá);ICH組TNF-α表達(dá)的數(shù)量在6h、24h、48h、5d與72h比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);ICH、治療組與對(duì)照組相比，TNF-α表數(shù)量在各個(gè)觀察點(diǎn)有所增加(

6、P＜0.05);治療組與ICH組各個(gè)觀察點(diǎn)相比，TNF-α表達(dá)數(shù)量有所減少(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，各個(gè)觀察點(diǎn)TNF-α表達(dá)數(shù)量有所減少(P＜0.05)。④MMP-9表達(dá)數(shù)量:ICH組及治療組與對(duì)照組相比，MMP-9表達(dá)數(shù)量在各個(gè)觀察點(diǎn)有明顯差異(P＜0.05);ICH組MMP-9陽性表達(dá)數(shù)在6h、24h、72h、5d與48h相比，具有明顯差異(P＜0.05);大小劑量治療組與ICH組相比，MMP-9表達(dá)數(shù)量在各個(gè)觀察

7、點(diǎn)均有減少(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，MMP-9表達(dá)數(shù)量在各個(gè)觀察點(diǎn)均減少(P＜0.05)。⑤TIMP-1表達(dá)數(shù)量:ICH組與對(duì)照組相比，TIMP-1表達(dá)數(shù)量在各個(gè)觀察點(diǎn)具有明顯差異(P＜0.05);ICH組TIMP-1表達(dá)數(shù)量在6h、24h、48h、5d與72h相比，具有明顯差異(P＜0.05);大小劑量治療組與ICH組相比，TIMP-1表達(dá)數(shù)量在各個(gè)觀察點(diǎn)有所增加(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，TIMP-

8、1表達(dá)數(shù)量在各個(gè)觀察點(diǎn)有所增加(P＜0.05)。⑥HE染色:ICH組在術(shù)后各個(gè)觀察點(diǎn)，可以看到血腫周圍組織充血水腫明顯，其中大量白細(xì)胞浸潤(rùn)，神經(jīng)元變性壞死;隨著術(shù)后時(shí)間點(diǎn)的延長(zhǎng)，血腫周圍組織中的膠質(zhì)細(xì)胞顯著增多，腦水腫在3d后開始減輕。治療組與ICH組相比，細(xì)胞及組織充血水腫相對(duì)較輕，炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)明顯減少。大劑量與小劑量治療組相比，腦水腫減輕更為明顯。
　　結(jié)論：⑴采用自體不凝血注入法制作大鼠模型方法簡(jiǎn)單，易操作。該腦出血模型與