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文檔簡介
1、本實驗通過制備AFB1免疫抗原，免疫動物獲得了多克隆抗體，將制備出的抗體與合適的微球載體化學偶聯(lián)，得到AFB1免疫親和微球。采用HPLC法檢測偶聯(lián)反應對抗體活性的影響。主要的研究內(nèi)容及結果如下： (1)采用胺甲基化反應法合成了AFB1與BSA的連接物(AFB1-BSA)，作為免疫抗原。通過對不同反應溫度AFB1利用率的考察，結果表明了50℃時最大，為39.3﹪，產(chǎn)物中AFB1與BSA的摩爾比最大為10.68∶1。 (2)
2、分別采用從Sigma公司購買的抗原和自制的抗原免疫日本大耳白兔，獲得ELISA效價分別為1∶32000和1∶30000的抗血清。采用從Sigma公司購買的抗原免疫Ba1b/c小鼠，效價最高為1∶8000。 (3)采用碳化二亞胺法偶聯(lián)抗體與硅膠微球，研究了抗體與微球偶聯(lián)條件的影響。結果表明最適偶聯(lián)pH值為pH6.0～6.2，最佳EDC用量為30mg/g微球，最適反應時間為17～20h，抗體的最大偶聯(lián)效率為72.2﹪。 (4
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