水通道蛋白-3,4和鈉鉀ATP酶α1在不同時期大鼠腎臟的表達.pdf

1、目的：本實驗研究在生理條件下，不同時期大鼠腎臟形態(tài)學(xué)變化及水通道蛋白3（Aquaporin3, AQP3）、水通道蛋白4（Aquaporin4, AQP4）和Na+, K+-ATPaseα1表達變化，為進一步探討不同時期大鼠腎臟AQP3、AQP4和Na+, K+-ATPaseα1生理功能提供理論資料。
　　方法：選取孕19天（-2天）、出生1天、7天、14天、21天、28天、35天、60天、180天、420天、540天和850天S

2、prague Dawley(SD)大鼠腎臟，左腎用于提取總RNA，用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測AQP3、AQP4和Na+, K+-ATPaseα1在基因水平的表達。選取出生后180天、420天、540天和850天大鼠右腎，用4％多聚甲醛固定24h。蘇木素-伊紅（HE）染色觀察出生后180天、420天、540天和850天腎臟形態(tài)學(xué)變化，免疫組織化學(xué)（IHC）染色測量AQP3、AQP4在出生后420天、540天和850天表達量并

3、用圖像分析軟件等方法進行分析。
　　結(jié)果：（1）HE染色結(jié)果：出生后180天腎臟結(jié)構(gòu)明顯，隨著時間增加，腎小球體積縮小，伴隨腎小球分葉、腎小球基底膜增厚、管腔壁變薄、管腔內(nèi)容物增加、管腔融合、細胞呈顆?？张轄钭冃灾饾u明顯。（2）IHC結(jié)果：腎皮質(zhì)及髓質(zhì)AQP3和AQP4蛋白表達量在420天較高、在540天降低、在850天再次升高，540天表達量與850天表達量之間比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。AQP3和AQP4在腎髓質(zhì)表達量較

4、腎皮質(zhì)多。AQP3在420天表達量相對于在850天表達量較多，AQP4在850天表達量相對于在420天表達量較多。（3）RT-PCR結(jié)果：AQP3 mRNA、AQP4 mRNA、Na+, K+-ATPaseα1 mRNA從-2天至出生后14天表達水平均較低，21天后表達量明顯升高， AQP3 mRNA、AQP4 mRNA均在35天至表達高峰而后降低，AQP3 mRNA在850天表達量與出生后1天、7天、14天、21天、60天、180天和

5、420天表達量比較均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),但和-2天、出生后28天、35天和540天表達量比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。AQP4 mRNA在850天的表達量與出生后1天、7天、14天、21天、60天、180天、420天和540天表達量比較均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但和-2天、出生后28天和35天表達量比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。Na+, K+-ATPaseα1 mRNA表達量從出生21天后一直處于高表達狀態(tài)，在1

6、80天出現(xiàn)表達高峰而后降低。850天表達量與28天、35天和60天表達量比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，與-2天、1天、7天、14天、21天、180天、420天和540天表達量比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：（1）隨著年齡增加，大鼠腎小球和腎小管發(fā)生結(jié)構(gòu)變化。腎小球體積、腎小球囊腔及腎小管管腔變小，腎小管管壁變薄，腎小球基底膜增厚及小管腔內(nèi)容物增多。（2）不同時期AQP3和AQP4在大鼠腎皮質(zhì)和髓質(zhì)表達趨勢是一致的