熱塑充填時牙根面溫度變化及熱刺激對牙周膜細胞生物學特性影響的研究.pdf

1、現(xiàn)代根管治療理念要求根管徹底的消毒和嚴密的充填，與側方加壓充填技術相比，熱垂直加壓技術可以提供高密度的充填以及在根管口及根尖孔處良好的封閉性，尤其適用于形態(tài)復雜的根管，如不規(guī)則的狹部、側副根管、彎曲根管、根管內(nèi)吸收等。另外，作為牙膠的整體充填，避免了冷側壓充填容易出現(xiàn)的牙膠尖之間的空隙，并明顯降低了牙膠與根管壁之間的縫隙，降低微滲漏問題[1,2]。然而，由于是熱牙膠加壓充填，在充填過程中由于加熱引起牙根表面溫度增加，從而有可能會對牙周組

2、織造成損傷，這一問題始終是臨床研究的熱點。目前認為：10℃閾值是衡量這種充填技術是否安全的主要標準，若牙根表面溫度升高超過10℃，則可能會對牙周組織造成不可逆性損傷[3]。
　　許多研究表明，在使用已經(jīng)商品化的根管充填設備以及溫度設置進行根管充填時，可引起牙根表面溫度升高6.5-22.1℃[4,5]。說明如果操作不當，就可能會因為根管充填時牙根表面的溫度過高而損傷牙齒周圍組織。
　　牙周膜是致密的纖維結締組織，用以連接牙骨質

3、和牙槽骨，將牙齒“懸吊”于牙槽窩中，牙根表面的溫度會直接傳遞給牙周膜，當牙周膜細胞受到熱刺激后，細胞會發(fā)生一系列的胞內(nèi)活動，應對熱刺激等不良的應激刺激。然而熱刺激對正常牙周膜細胞和炎癥牙周膜細胞的生物學特性有何影響，相關的研究較少。我們之前有研究顯示，牙周膜細胞中存在著炎癥體（inflammasomes）以及炎癥體通路，我們推測，熱刺激時，牙周膜細胞的炎癥體信號系統(tǒng)會出現(xiàn)相應的變化，然而這種變化是否會加劇患牙牙周炎的發(fā)展？是一過性的還是

4、不可逆的？細胞內(nèi)免疫系統(tǒng)的炎癥體調控機制是如何進行的？這些都值得我們進一步探討，以期根據(jù)臨床現(xiàn)象為基礎，從細胞學層面上為臨床熱塑牙膠充填系統(tǒng)的選擇以及溫度的控制提供參考。
　　本實驗共分三部分：
　　實驗一：B&L熱塑系統(tǒng)充填時牙根表面溫度測定分析
　　收集獲得117顆單根直根管離體牙，符合納入條件60顆離體牙。分別在釉牙骨質界處水平截除牙冠，疏通預備根管，藻酸鹽印模材料均勻包繞各牙根，分別在冠部、根中部、根尖上4mm

5、位置留一檢測孔，用以放置熱電偶金屬感應端。B&L熱塑系統(tǒng)分別設置230℃、200℃、180℃溫度根管充填。檢測結果發(fā)現(xiàn)，根管充填時，三測量點牙根表面溫度均升高，其中230℃充填時冠部、根中部、根尖上4mm位置表面溫度平均升高值分別為：12.84℃、9.68℃、7.28℃；200℃充填時分別為10.37℃、8.76℃、6.67℃；180℃充填時分別為：9.42℃、8.63℃、6.61℃。不同充填溫度導致牙根表面的溫度升高值之間有統(tǒng)計學差異

6、（P＜0.05）。同一充填溫度牙根表面三個測量點溫度升高值之間有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。結果提示，230℃、200℃充填時，在冠部牙根表面溫度平均值升高超過10℃，應引起臨床操作者注意。
　　實驗二：不同根管壁厚度在進行充填時牙根表面溫度變化的差異分析
　　60顆牙齒根管充填完成后，在上述三個監(jiān)測點處截開牙根，測得根管壁厚度，并分組為1.0mm組（0.8~1.2mm）、1.5mm組（1.3~1.7mm）、2.0mm組（1

7、.8~2.3mm）。分析不同充填溫度、不同監(jiān)測點和不同根管壁厚度的溫度變化。結果顯示，冠部根管壁厚度1.0mm組、1.5mm組和2.0mm組在230℃充填時牙根表面溫度平均升高值分別為：13.74℃、12.25℃、10.23℃，200℃充填時分別為：10.77℃、9.98℃、8.73℃，180℃充填時分別為：9.86℃、9.08℃、8.57℃。冠部根管壁1.0mm組與2.0mm組厚度牙根表面溫度升高值之間具有顯著差異（P＜0.05）。隨

8、著根管壁增厚，溫度升高值降低。由此可看出，冠部根管壁厚度1.0mm組，230℃、200℃充填時，牙根表面溫度升高超過10℃。因此建議對于根管壁較薄的牙齒，更應適當降低充填溫度，避免對牙周組織造成不可逆性損傷。
　　實驗三：熱刺激對正常和炎癥牙周膜細胞生物學特性影響的初步探究
　　本實驗使用LPS和ATP刺激牙周膜細胞（PDLCs）來模擬炎癥環(huán)境。取37℃培養(yǎng)第3~5代的人正常牙周膜細胞，分為八組：正常對照組、ATP刺激組、L

9、PS刺激組、ATP+LPS刺激組、正常+熱刺激、ATP+熱刺激、LPS+熱刺激、ATP+LPS+熱刺激。5mmol/L ATP預刺激2小時后，加入終末濃度10ug/ml LPS刺激6小時，然后放入45℃孵箱中熱刺激2小時。正常和炎癥牙周膜細胞置于37℃和45℃孵箱中培養(yǎng)，測得6小時細胞活性曲線。結果顯示，正常牙周膜細胞第2個小時開始，細胞生長活性明顯降低；炎癥牙周膜細胞第1小時細胞活性明顯降低，第2小時細胞活性降至50％左右。ATP和L

10、PS共同刺激后，qRT-PCR檢測牙周膜細胞中NLRP3、caspase-1 mRNA及其相關炎性因子IL-1β、IL-18 mRNA表達量均呈現(xiàn)明顯升高。熱刺激2小時后，HSR-1和HSF-1mRNA表達量升高，四種炎癥因子表達量均降低。表明炎癥狀態(tài)下，熱刺激可能抑制牙周膜細胞NLRP3的活性，引起 Caspase-1、IL-1β以及 IL-18 mRNA表達量下調。提示熱休克反應有可能負反饋調節(jié)著NLRP3/ Caspase-1炎癥

11、體通路，炎癥牙周膜細胞抵抗熱刺激的能力減弱。
　　結論：
　　1.在根管熱塑充填時，牙根冠部溫度升高最為明顯，230℃和200℃充填時，牙根冠部溫度升高超過10℃。
　　2.根管壁的厚度是影響溫度傳導的主要因素，對于根管壁較薄的牙齒（如扁根管牙及內(nèi)吸收牙齒），200℃、230℃充填時，牙根表面溫度升高超過10℃，有可能會對牙周組織造成不可逆性損傷。
　　3.熱休克反應可能負反饋調節(jié)NLRP3/Caspase-1炎