簡介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。‘申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名壘盤日期絲‘坦內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名壘匿指導(dǎo)教師簽名F習(xí)量互圣日期盈Z眩G￡9摘要本論文分5個(gè)部分，主要研究了維生素AVA對奶午乳腺硒蛋白合成及抗氧化功能的影響機(jī)理。試驗(yàn)L采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，按照體重、泌乳量及胎次相近的原則，將28頭奶牛分為2組，每組14頭。兩組試驗(yàn)日糧分別在基礎(chǔ)日糧中按照110和220IU／KGBWVA的標(biāo)準(zhǔn)來添加，以探討添加220IU／KGBW的高劑量的VA對奶牛產(chǎn)奶性能、抗氧化及免疫功能的影響。試驗(yàn)2采用體外法，采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究了不同濃度的VA0，005，01，O2，L和2ITG／ML對奶牛乳腺上皮細(xì)胞BMEC硒蛋白合成及抗氧化功能的影響，篩選出了發(fā)揮較好抗氧化功能的VA作用劑量，并從硒蛋白合成、基因轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平探討了其可能的影響機(jī)理。試驗(yàn)3利用過氧化氫H202作為刺激源，以細(xì)胞存活率及抗氧化指標(biāo)為判斷指標(biāo)，研究建立了BMEC的氧化損傷模型。在試驗(yàn)3的基礎(chǔ)之上，試驗(yàn)4分為對照組、HZOZ損傷組、VA組和VA預(yù)防組，研究了VA對奶牛BMEC氧化損傷的保護(hù)作用。試驗(yàn)5將BMEC隨機(jī)分為對照組、DNCB抑制硫氧還蛋白還原酶TⅨR組、VA組及VADNCB組四個(gè)處理組，從TRXRMAPK信號通路一AA途徑探討了VA對奶牛乳腺抗氧化功能的影響機(jī)理。本試驗(yàn)研究初步得出以下結(jié)果1與添加L10IU／KGBWVA相比，日糧中添加高于NRC推薦劑量220IU／KGBW的VA，XL奶牛產(chǎn)奶性能無顯著的影響，但對抗氧化功能有顯著的促進(jìn)效果，可以顯著增加血清中硒蛋白谷胱甘肽過氧化物酶GPX、TRXR活性及硒蛋白PSELP的含量，增加超氧化物歧化酶SOD、過氧化氫酶CALT、總抗氧化酶TAOC活性，降低丙二醛MDA和活性氧ROS濃度。2220IU／KGBWVA可以顯著的增強(qiáng)奶牛的免疫功能，提高血清中免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、自介素L、腫瘤壞死因子、VA、可溶性CD4含量及SCD4TSCD8，降低SCD8含量和乳中體細(xì)胞數(shù)。3VA的添加劑量對BMEC增殖、抗氧化酶CAT、SOD和TAOC活性、硒蛋自GPX和TRXR活性及SELP含量的上調(diào)作用呈顯著的劑量依賴關(guān)系，以LNG／ML的促進(jìn)作用較強(qiáng)，但添加劑量為2GG／ML時(shí)促進(jìn)效果有減弱的趨勢。VA可劑量依賴性的上調(diào)硒蛋NGPXLMRNA及其蛋白表達(dá)量，以1LIG／MI時(shí)較好。VA也可卜淵TRXRL和SELP的MRNA表達(dá)量及7FRXRL蛋白表達(dá)量，以12PG／ML時(shí)較強(qiáng)。綜合多項(xiàng)指標(biāo)，以1GG／MLVA劑量組的抗氧化效果較好。4600GMOL／LH202作用細(xì)胞6H，BMEC的存活率降低至7979％GPX、SOD及CAT活性顯著一卜降，MDA含量顯著提高。說明H202作用濃度為600LAMOI／L，作用時(shí)間為6H，對BMEC產(chǎn)生了明顯的氧化應(yīng)激，可作為建立細(xì)胞氧化損傷模型的適

簡介：學(xué)校代碼10126分類號論文題目學(xué)號編號FAD3B乳腺特異表達(dá)盒轉(zhuǎn)基因小鼠的研制THEPRODUCTIONOFTRANSGENLCMICEBYMAMMARYGLANDSPECIFICFAD3BTRANSFERBODY學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院專業(yè)動(dòng)物學(xué)研究方向哺乳動(dòng)物生殖及生物技術(shù)姓名諶顏指導(dǎo)教師李光鵬2014年5月本研究由國家“973’’計(jì)劃課題“克隆與轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物機(jī)理研究20120822306“和國家科技重大專項(xiàng)“高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)轉(zhuǎn)基因肉牛新品種培育2013ZX08007002“支持

簡介：分類號UDC內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目學(xué)校代碼10126密級編號學(xué)院中心學(xué)號研究生指導(dǎo)教師專業(yè)研究方向蘭逾盈蘭；越311080502014年4月28日內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文肺炎克雷伯氏菌感染牛乳腺上皮細(xì)胞基因表達(dá)譜分析摘要肺炎克雷伯氏菌乳腺炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，深入了解肺炎克雷伯氏菌與牛乳腺的相互作用及牛乳腺對肺炎克雷伯氏菌感染的免疫應(yīng)答機(jī)制，是預(yù)防和控制肺炎克雷伯氏菌乳腺炎發(fā)生的關(guān)鍵。牛乳腺上皮細(xì)胞是外來病原菌通過乳導(dǎo)管侵入牛乳腺后最先接觸的細(xì)胞，本論文采用一株急性牛乳腺炎分離的肺炎克雷伯氏菌與體外乳汁分離法培養(yǎng)的牛乳腺上皮細(xì)胞相互作用，采用普通光鏡、掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡觀察了肺炎克雷伯氏菌與牛乳腺上皮細(xì)胞相互作用后細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；采用HOCHEST染色和流式細(xì)胞術(shù)觀察肺炎克雷伯氏菌誘導(dǎo)牛乳腺上皮細(xì)胞凋亡情況；用REAL．TIMEPCR檢測感染肺炎克雷伯氏菌前后牛乳腺上皮細(xì)胞NODL、NOD2、RIP2、TLR2、TLR4、TLR6、TLR9、IL．6、IL．8細(xì)胞因子的表達(dá)情況，用REAL．TIMEPCR和ELISA檢測IL．1P及TNF．0【的表達(dá)情況；首次運(yùn)用ILLUMINAJSOLEXA深度測序技術(shù)對肺炎克雷伯氏菌感染牛乳腺上皮細(xì)胞的數(shù)字基因表達(dá)譜變化進(jìn)行了分析；NODLSIRNA載體的構(gòu)建進(jìn)一步研究NODL在牛乳腺上皮細(xì)胞抗肺炎克雷伯氏菌免疫中的作用。結(jié)果1．證明了肺炎克雷伯氏菌可以粘附侵襲牛乳腺上皮細(xì)胞，且可以誘導(dǎo)牛乳腺上皮細(xì)胞發(fā)生凋亡；2．牛乳腺上皮細(xì)胞感染肺炎克雷伯氏菌后NODL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活，促進(jìn)了炎性因子的表達(dá)；3．首次完成了肺炎克雷伯氏菌感

簡介：CLASSIFIEDINDEXC0N尉ENTIALYES／NONOCODE10224N0．1106407DISSERTATIONFORTHEMARSTERDEGREESTUDYOFCELLCYCLESYNCHRONIZATIONANDEFFECTOFPACLITAXELONCYCLERELATEDFACTORSONCANINEBREASTTUMORCELLCANDIDATELIQINGSUPERVISORPROF．LR1ROIUYUN．1UYUNDEGREECATEGORYMASTEROFAGRICULTURECOLLEGE．NORTHEASTAGRICULTURALUNIVERSITYFIRSTLEVELDISCIPLINEVETERINARYSECONDLEVELDISCIPLINECLINICALVETERINARYHARBINCHINAJUNE2014東北農(nóng)業(yè)人學(xué)農(nóng)學(xué)壩．1學(xué)位論義曼曼曼曼皇曼曼曼曼舅曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼皇曼曼曼曼曼曼曼曼IIII曼曼曼曼曼曼曼皇曼蔓皇曼曼曼皇曼曼曼曼曼曼曼3。1．3紫杉醇對犬乳腺腫瘤細(xì)胞形態(tài)的影響????????????????243．2GO／GL期同步化結(jié)果??????????????????????????253．3S、G2，M期同步化結(jié)果????????????????????????????．273．4紫杉醇作用斤細(xì)胞周期分布情況????????????????????．273．5P27、P53、BCL．2表達(dá)著異的檢測結(jié)果??????????????????一283．5．1定量標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立及溶解曲線的分析???????????????283．5．2P27、P53、BCL．2的熒光定鼙PCR檢測結(jié)果?????????????一304討論?????????????????????????????????????????????．324．1犬乳腺腫瘤細(xì)胞的形態(tài)影響??????????????????????．324．2血．清饑餓及TDR對犬乳腺腫瘤細(xì)胞的同步化影響?????????????．324．3紫杉醇對犬乳腺腫瘤細(xì)胞周期的影響??????????????????．334．4紫杉醇對腫瘤相關(guān)岡子的影響?????????????????????．345結(jié)論?????????????????????????????????????????????．37致謝??????????????????????????????????????????????38參考文獻(xiàn)?????????????????????????????????39附錄??????????????????????????????????????????????．．45攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文????????????????????????一46

簡介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料與我一同工作．的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。7．論文作者簽名煳』日期誣生?！蹻內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即O．研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名耄垂室三圣．日期三二竺LFR摘要本論文主要研究不同模式日糧對奶牛乳腺中乳脂合成影響及長鏈脂肪酸添加對奶牛乳腺上皮細(xì)胞的乳脂合成影響機(jī)理，通過體外的長鏈脂肪酸添加試驗(yàn)研究動(dòng)物試驗(yàn)中脂肪酸合成及長鏈脂肪酸的變化機(jī)理‘。探討長鏈脂肪酸的最佳組合對乳脂的合成影響變化，為完善乳脂的代謝模型提供依據(jù)，并為改善牛奶的品質(zhì)提供理論依據(jù)。本論文主要包括四個(gè)試驗(yàn)1．試驗(yàn)一采用完全隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將30頭牛隨機(jī)分為三個(gè)組，每個(gè)組1O頭。三組的試驗(yàn)日糧分別是1混合粗飼料組IMF，精粗比為4654；2高精料秸稈組CS1，精粗比為6535，其營養(yǎng)水平與IMF組相近；3低精料秸稈組CS2，精粗比為4654。本試驗(yàn)共進(jìn)行三期，每期21天，其中14天為適應(yīng)期，7天為樣品采集期，在試驗(yàn)最后一天采集乳腺組織進(jìn)行乳脂合成相關(guān)基因表達(dá)影響研究。試驗(yàn)結(jié)果為在營養(yǎng)水平較低日糧CS2組奶牛的乳產(chǎn)量顯著低于營養(yǎng)水平較高日糧組IMF和CSL奶牛的乳產(chǎn)量。乳脂，乳蛋白和總固型物含量在IMF都為最高。飽和脂肪酸和短鏈脂肪酸在IMF組含量最高，單不飽和脂肪酸MUFA和長鏈脂肪酸LCFA在CS2組最高，而多不飽和脂肪酸PUFA在CSL組最高。乳脂合成相關(guān)基因FASN、SCD、LPL和CD36在IMF的表達(dá)量均高于秸稈組，但脂肪酸網(wǎng)絡(luò)調(diào)控基因沒有顯著影響。2．將試驗(yàn)一中所采集的乳腺組織進(jìn)行高通量轉(zhuǎn)錄組測序，對奶牛乳腺組織的整體轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行研究，進(jìn)一步研究日糧對奶牛乳腺組織轉(zhuǎn)錄組中乳脂及乳蛋白差異基因表達(dá)豐度的影響。試驗(yàn)結(jié)果證明我們的轉(zhuǎn)錄本數(shù)據(jù)完全符合進(jìn)一步分析的要求。在對預(yù)測基因進(jìn)行COG功能分類預(yù)測，發(fā)現(xiàn)共有L8828個(gè)UNIGENE被注釋上25種COG分類。其中關(guān)于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制功能的最多，其中關(guān)于脂類轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝功能的有877個(gè)UNIGENE，關(guān)于氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝功能的共有595個(gè)UNIGENE。在對UNIGENE進(jìn)行GO功能分類預(yù)測，有211947個(gè)UNIGENE被注釋上GO分類，其中共有96295個(gè)歸為生物學(xué)過程BIOLOGICALPROCESS，共有77729個(gè)歸為細(xì)胞成分CELLULARCOMPONENT，共有37950個(gè)歸為分子功能MOLECULARFUNCTION。在KEGG對脂類代謝通路進(jìn)行分析后得出，IMF組的脂肪酸生物合成通路中基因豐度值都顯著高于CS組，而脂肪酸延伸和不飽和脂肪酸合成通路中基因豐度值都顯著低于CS組，與乳脂含量及濃度的趨勢相一致。3．由于前期動(dòng)物試驗(yàn)中不同日糧模式對乳脂中長鏈脂肪酸有顯著影

簡介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO1106382DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREEREGULATIONOFMIR152TOGENEDNMTLEXPRESSIONINDAIRYCOWMAMMARYGLANDDEVELOPMENTANDLACTATIONCANDIDATEWANGJIESUPERVISORPROFWANGCHUNMEIDEGREECATEGORYMASTEROFAGRICULTURECOLLEGECOLLEGEOFVETERINARYMEDICINEFIRSTLEVELDISCIPLINEVETERINARYMEDICINESECONDLEVELDISCIPLINEBASICVETERINARYMEDICINEHARBINCHINAJUNE2014東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文342報(bào)告基因載體的構(gòu)建和鑒定28343熒光素酶活性測定2935MIR152基因過表達(dá)對奶牛乳腺上皮細(xì)胞的影響一30351QRTPCR方法檢測MIR152MIMICS轉(zhuǎn)染后奶牛乳腺上皮細(xì)胞中MIR152、DNMTL及泌乳信號通路基因的表達(dá)30352MIROL52MIMICS對DNMTL及泌乳信號通路蛋白表達(dá)的影響32353MIR152MIMICS對奶牛乳腺上皮細(xì)胞基因組DNA甲基化水平和甲基化酶活性的影響33354MIR152MIMICS對奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖能力及活性的影響34355MIR152MIMICS對奶牛乳腺上皮細(xì)胞周期的影響35356MIR152MIMICS對奶牛乳腺上皮細(xì)胞分泌B酪蛋白、甘油三酯和乳糖能力的測定；；36MIR152基因沉寂對奶牛乳腺上皮細(xì)胞的影響37361QRTPCR方法檢測MIR152INHIBITOR轉(zhuǎn)染后奶牛乳腺上皮細(xì)胞中MIR152、DNMTL及泌乳信號通路基因的表達(dá)一37362MIR152INHIBITOR對DNMTI及泌乳信號通路蛋白表達(dá)的影響39363MIR152INHIBITOR對奶牛乳腺上皮細(xì)胞基因組DNA甲基化水平和甲基化酶活性的影響39364MIR152INHIBITOR對奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖能力及活性的影響4L365MIR152INHIBITOR對奶牛乳腺上皮細(xì)胞周期的影響4236，6MIR152INHIBITOR對奶牛乳腺上皮細(xì)胞分泌B酪蛋白、甘油三酯和乳糖能力的測定ZL14討論4441MIR152在不同乳品質(zhì)奶牛乳腺組織中的表達(dá)一4442MIR152靶基因的預(yù)測以及驗(yàn)證4443MIR152對奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳功能及相關(guān)信號通路基因的調(diào)節(jié)作用4544MIR152對基因甲基化水平的調(diào)節(jié)作用一4645MIR152對奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖和周期的影響475結(jié)論～48致射49參考文獻(xiàn)50附錄57攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文58Ⅱ

簡介：點(diǎn)擊查看更多GSK3β通過mTOR-S6K1途徑對奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳及增殖的調(diào)控.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我校或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名J蓮塑卜日期赳內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名越指導(dǎo)教師簽名、石簽二龜日期垃4么之CSNLSL，CSN3基因的相對表達(dá)量均低于對照組。第二部分內(nèi)容根據(jù)第一部分研究篩選出的適宜13羥丁酸鈉濃度同時(shí)進(jìn)行BMECS的二維和三維培養(yǎng)13羥丁酸鈉添加濃度為0MMOL／L和24MMOL／L，比較不同培養(yǎng)模式下BMECS培養(yǎng)基中TAG含量以及乳脂肪、乳蛋白合成相關(guān)基因的表達(dá)的差異。結(jié)果表明，在三維培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)基中TAG的含量也顯著高于二維培養(yǎng)模式尸O05。與對照組相比，’乙酸鈉與13羥丁酸鈉配比試驗(yàn)組均不同程度的促進(jìn)了乳脂合成相關(guān)基因的表達(dá)PO05。第二部分內(nèi)容根據(jù)第一部分研究篩選出的適宜乙酸鈉和13羥丁酸鈉配比同時(shí)進(jìn)行BMECS的二維和三維培養(yǎng)乙酸鈉和B羥丁酸鈉配比為21，比較不同培養(yǎng)模式下BMECS培養(yǎng)基中TAG含量以及乳脂肪、乳蛋白合成相關(guān)基因的表達(dá)的差異。結(jié)果表明，在三維培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)基中TAG的含量也顯著高于二維培養(yǎng)PO05。不同配比的乙酸鈉和13羥丁酸鈉處理組與對照組BMECS乳脂肪、乳蛋白合成相關(guān)基因的表達(dá)量均顯著高于二維培養(yǎng)模式尸O001。在配比處理組中，與二維培養(yǎng)模式相比，乳脂合成相關(guān)基因ACC、FAS的表達(dá)量分別增加了17925倍、5325倍，乳脂合成調(diào)控因子SREBP1、PPARG基因的表達(dá)量分別增加了10731倍、21372倍，乳蛋白合成過程相關(guān)基因CSNLSL的表達(dá)量增加了14475倍。綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在三維培養(yǎng)條件下，添加不同短鏈脂肪酸及其配比對BMECSGLHR、乳蛋白合成的促進(jìn)作用優(yōu)于二維培養(yǎng)。關(guān)鍵詞奶牛乳腺上皮細(xì)胞；二維培養(yǎng)；三維培養(yǎng)；乳脂前體物；乳脂肪；乳蛋白

簡介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224N0L109685DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREEFUNCTIONALSTUDYOFFABP3INDAIRYCOWMAMMARYEPITHELIALCELLSCANDIDATELIANGMENGYAO一一一SUPERVISORPROFGAOXUEJUNDEGREECATEGORYMASTEROFSCIENCECOLLEGECOLLEGEOFLIFESCIENCESFIRSTLEVELDISCIPLINEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYSECONDLEVELDISCIPLINEANIMALBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYHARBINCHINAJUNE2014東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文246WESTERNBLOTTING檢測一13247免疫熒光染色法檢測1525FABP3基因沉默16251實(shí)驗(yàn)材料和儀器16252細(xì)胞轉(zhuǎn)染16253QRTPCR檢測16254WESTERNBLOTTING檢測16255免疫熒光染色法檢測1726外源脂肪酸添加試驗(yàn)L7261實(shí)驗(yàn)材料17262脂肪酸溶液的制備17263QRTPCR篩選脂肪酸作用最佳濃度和時(shí)間17264WESTERNBLOTTING檢測18265免疫熒光染色法檢測183結(jié)果1931奶牛乳腺組織RNA提取結(jié)果一1932QRTPCR驗(yàn)證FABP3基因2033細(xì)胞培養(yǎng)22331原代和傳代細(xì)胞22332乳腺上皮細(xì)胞鑒定2234FABP3基因過表達(dá)功能檢驗(yàn)結(jié)果23341FABP3基因PCR結(jié)果23342FABP3基因克隆載體23343FABP3基因真核表達(dá)載體一24344FABP3基因過表達(dá)25345MRNA表達(dá)水平檢測26346蛋白質(zhì)表達(dá)水平檢測27347蛋白質(zhì)定位及脂滴形成檢測一2835FABP3基因沉默檢驗(yàn)結(jié)果，30351FABP3基因干擾30352MRNA表達(dá)水平檢測一3L353蛋白質(zhì)表達(dá)水平檢測32354蛋白質(zhì)定位及脂滴形成檢測3236脂肪酸作用效果檢測35361脂肪酸作用最佳濃度和時(shí)間篩選結(jié)果35362蛋白質(zhì)表達(dá)水平檢測37363蛋白質(zhì)定位及脂滴形成檢測384討論41TI

簡介：分類號分類號碩士學(xué)位論文題目目NFΚB1基因的多態(tài)性與中國荷斯坦奶?；虻亩鄳B(tài)性與中國荷斯坦奶牛乳腺炎易感性相關(guān)性分析乳腺炎易感性相關(guān)性分析TITLEGEICPOLYMPHISMOFNFΚB1GENEITSCRELATIONWITHSUSCEPTIBILITYTOMASTITISINCHINESEHOLSTEIN學(xué)科、專業(yè)業(yè)細(xì)胞生物學(xué)研究方向向動(dòng)物分子遺傳學(xué)作者姓名名霍家燕導(dǎo)師及職導(dǎo)師及職稱稱蔡亞非教授論文提交日期論文提交日期2015年4月授予學(xué)位日期授予學(xué)位日期2015年6月安徽師范大學(xué)學(xué)位評定委員會(huì)辦公室

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文酪蛋白調(diào)控序列指導(dǎo)下的人乳鐵蛋白基因在動(dòng)物乳腺中表達(dá)特性的研究姓名耿士忠申請學(xué)位級別碩士專業(yè)獸醫(yī)臨床指導(dǎo)教師成勇20020501塑型查蘭曼圭蘭垡熊苧ABSTRACTSTUDYONEXPRESSIONOFHUMANHTCTOFCRRINEDNAINTHETRANSGENICMAMMALIANGLANDUNDERCONTROLOFCASEINGENEOFBOVINEORGOATMSCANDIDATEGENGSHIZHONGSUPERVISORPROFESSORCHENGYONGTHISPAPERWASSTUDIEDONTHEEXPRESSIONOFHUMANLACTOFERRINEDNAINTHEM封MNARYGLANDOF讎黜GOATSBYUSINGFUSIONGENECONSTRUCTEDWITHREGULATIVEELEMENTSOFCASEINGENEANDLTFEDNATHENTHETRANSGENICGOATSANDMICEWEREPRODUCEDBYMICROINJECTINGTHEFUSIONGENEINTOPRONUELEAROFFERTILIZEDEGGSTHEBIOLOGICALREACTORWASMADEFROMTHETRANSGENICMAMMARYSPECIFICEXPRESSIONGOATSTHEHUMANLACTOFERRINEDNAHLLFW鹋AMPLIFIEDFROMTHETEMPLETOFHUMANM刪卸略巧EDNABYPCRWITHHIGHFIDELITYTAQENZYMEAFTERCLONEDANDSEQUENCEDTHEHLTFCDNASEQUENCEW船PROVEDCONCCT，HLTFWASEXPRESSEDINTHEMICROORGANISMUSINGPGEX4T3VECTORSUBSEQUENTLYWEAMPLIFIED5’REGULATIVESEQUENCE23KBAND3’REGULATIVESEQUENCE15XBOFBOVINEASLCASEINGENEFIOMBOVINEGENOMEDNAW／THPCRCONNECTEDTHEREGULATIVESEQUENCEWITHPGEMVECTOR，THENCLONEDTHEREGULATIVESEQUENCEA；4KBBOVINEGENOMEDNAOF5’UPSTREAMREGULATIVESEQUENCEWASSPLICEDTOTHESEQUENCEA，REGULATIVESEQUENCEBWASFORMED；THEREGULATIVESEQUENCECOFBCASEINGENEHADBEENCONSTRUCTEDSIXFUSIONGENECONSTRUCTSPCNL，PCN2，261，AF203P1238，PF84WEREOBTMNEDBYCONSTRUCTINGTHREEREGULATIVESEQUENCESAJ3，CANDTWOHUMANLACTOFERRINGENEEDNASEGMENTS219KB，232KB、THESEGENE儀N髓MC協(xié)WEREINJECTEDINTOMAMMARYGLANDTISSUEOFEWERESPECTIVELYABOUT10DAYSBEFORESECRETINGMILKANDWEREEXPRESSEDTNMSIENFLYRESULTSSHOWEDTHATTHEREⅥF訛DIFFERENTEXPRESSLEVELSESPECIALLYEXPRESSIONOFPCN2，261，AF203SHOWEDHI醢EXPRESSIONITWAS88NG／ML144NG／ML，63NG／MLRESPECTIVELYTHENTRANSGENICMAMMALIANWASPRODUCEDWITHHIGLLEXPRESSINGCONSTRUCT“261“BYMICROINJ酬NGTHEFUSIONGENEINTOPRONUCLEAROFFERTILIZEDEGGS148FERTILIZEDEGGSWITSMICROINJECTED16LAMBSWEREHOMEDFINALLYWEOBTAINED4UANSGENICGOATSKEYWORDSHUMANLACTOFERRINEXPRESSIONTRANSGENIC，GOAT

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文奶山羊乳腺上皮細(xì)胞系的建立及初步應(yīng)用姓名宋紅芹申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師許益民孫懷昌20020601揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文可以用于山羊乳腺特異表達(dá)基因構(gòu)件的質(zhì)量檢驗(yàn)。關(guān)鍵詞SV40T基因，奶山羊乳腺上皮細(xì)胞系2

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文山羊乳腺特異性表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)特性的研究姓名陳剛申請學(xué)位級別碩士專業(yè)動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師孫懷昌20020501陳剛山羊乳腺特異性表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)特性的研究山羊乳腺特異性表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)特性的研究碩士研究生陳剛導(dǎo)師孫懷昌教授摘要為了構(gòu)建具有自主知識產(chǎn)權(quán)的山羊乳腺特異性表達(dá)載體，利用高保真聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR從中國奶山羊基因組中擴(kuò)增出6個(gè)B一乳球蛋白BLG基因片段和1個(gè)B一酪蛋白13CASEIN基因片段。序列測定結(jié)果證明，所獲基因片段的DNA序列與已發(fā)表的山羊及綿羊相應(yīng)基因區(qū)域具有很高的同源性，5一端凋控區(qū)中主要的乳腺特異表達(dá)調(diào)控元件完全相同，不僅說明此兩個(gè)基因在山羊、奶山羊和綿羊之間是高度保守的，而且說明所用的DNA聚合酶具有很高的保真性，所擴(kuò)增的基因片段可用于乳腺特異表達(dá)載體的構(gòu)建。將上述基因片段進(jìn)行組合，構(gòu)建成一系列乳腺特異性表達(dá)載體。將LACZ報(bào)告基因分別克隆入自行構(gòu)建的P205C3載體和從困，B31進(jìn)的PCX及PHC載體，將所獲得的重組載體分別用脂質(zhì)體介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染奶山羊乳腺上皮細(xì)胞系，經(jīng)泌乳激素誘導(dǎo)后用XGAL進(jìn)行酶組化染色，結(jié)果表明自行構(gòu)建的載體驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因的表達(dá)水平高于從國外引進(jìn)的、已知具有高表達(dá)性能的載體。上述重組載體在COS一1細(xì)胞和山羊皮膚成纖維細(xì)胞不能表達(dá)相應(yīng)的報(bào)告基因，表明其具有較好的組織特異性。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出結(jié)論，本研究構(gòu)建的乳腺特異性表達(dá)載體能用于動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器的研制。關(guān)鍵詞中國奶山羊；13乳球蛋白基因；13一酪蛋白基因；PCR擴(kuò)增；序列分析；乳腺特異表達(dá)載體構(gòu)建；乳腺上皮細(xì)胞表達(dá)

簡介：浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文火絨草防治奶牛乳腺炎的藥理學(xué)研究姓名伍義行申請學(xué)位級別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師黃利權(quán)200251塹三壟竺絲絲苧苧絲蘭竺鱟絲蘭絲壁莖塹塑生至墮一一____●____●_____________’_●____●一一摘要火絨草為一民間草藥，系菊科火絨草屬植物火絨草的全草。民間用藥經(jīng)驗(yàn)表明火絨草具有疏風(fēng)解表、清熱解毒、涼血止血、消炎利尿等多種功效。文獻(xiàn)檢索和實(shí)地考察顯示火絨草野生資源極為豐富，目前國內(nèi)有關(guān)研究報(bào)道甚少，國外尚無其化學(xué)和藥理活性的研究報(bào)道。因此，為了開發(fā)利用火絨草資源，其多種藥理活性及活性成分亟待研究闡明。奶牛乳腺炎是奶牛乳腺發(fā)生的一種炎癥，是一種復(fù)雜的、招致奶牛業(yè)經(jīng)濟(jì)損失最嚴(yán)重的疾病。盡管西方一些國家對此病己進(jìn)行了100多年研究，但至今尚未能提出一個(gè)徹底解決的辦法。而我國對此病在二十多年的研究中雖取得了顯著的成績。但仍遠(yuǎn)未能達(dá)到徹底解決之目標(biāo)。在奶牛乳腺炎的防治方面，傳統(tǒng)的抗生索療法導(dǎo)致了一系列新的問題如耐藥菌株增加、抗生素殘留等，而非抗生素療法已成為國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)。中草藥及其活性成分防治奶牛乳腺炎的研究作為非抗生素療法的一個(gè)重要方面，正日益引起國內(nèi)外同行的關(guān)注。本試驗(yàn)針對奶牛乳腺炎這一重大疾病，探討火絨草的不同極性部位的抗菌、抗炎及免疫活性，為火絨草及其活性成分防治奶牛乳腺炎以及開發(fā)利用火絨草資源打下了基礎(chǔ)。1藥材采集、生藥鑒定及活性組分的提取分離本試驗(yàn)所用藥材火絨草采自青藏高原，通過來源鑒定法確定火絨草的拉丁學(xué)名LEONTOPO出冊LEONTOPOD／OIDES。采用水煎法、承提醇沉法和乙醇回流提取法提取火絨草的活性成分。醇提液進(jìn)一步依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取分離成4個(gè)不同極性部分。上述方法提取的水煎液、水提酵沉液、醇提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提水溶部分等7種提取物供藥理試驗(yàn)用。2火絨簟的體外抗菌活性研究采用試管稀釋法，分別檢測水煎液、水提醇沉液、醇提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提水溶部分等7種提取物對大腸桿菌CS，382、大腸桿菌C8舢、大腸桿菌CB3914、沙門氏菌C79ZO、金黃色葡萄球菌NEWBOULDS305、金黃色葡萄球菌I臨床分離株等6株病原菌的最低抑菌濃度MIC和最低殺菌濃度鵬C。試驗(yàn)結(jié)果表明火絨草醇提物及其石油醚部分和乙酸乙酯部分對兩種金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑制作用，其MIC最低可達(dá)014MG／M1生藥濃度，MBC最低可達(dá)027MG／ML生藥濃度，而其它部分對金黃色葡萄球菌的抑制作用較弱?；鸾q草醇提正丁醇部分和水溶部分對3第一1一頁共66頁THESISOFMASTER’SDEGREE

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文人溶菌酶基因治療奶牛乳腺炎的初步研究姓名于峰申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師孫懷昌20030501揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文PRELIMINARYSTUDIESONGENETHERAPYFORDAIRYCOWMASTITISUSINGHUMANLYSOZYMEGENEM．D．CANDIDATEYUFENGSUPERVISORPROF．SUNHUAIEHANGABSTRACT2DAIRYCOWMASTITISISONEOFTHEMOSTHARMFULANDCONLMONCOWDISEASES．ITCAUSESGREAT10SSEVERYYEARINTHEWORLD．BECAUSEOFTHECOMPLEXITYOFTHECAUSATIVEBACTERIA,DAIRYCOWMASTITISWASVERYDIFFICULTTOTREAT．TOOBTAINAFUNCTIONALCDNAFORHUMANLYSOZYMEHLYZ，PCRWASCARRIEDOUTUSINGTHEPOOLEDFIRST．STRANDEDCDNAFROMHUMANMAMMARYGLANDASTHETEMPLATEAND1．5KBDSCDNAWASAMPLIFIEDBYPCR．THECDNAWASSUBCLONEDINTOPGEM．TVECTORANDSUBMITTEDTOSEQUENCEANALYSIS．THEDEDUCEDAMINOACIDSEQUENCEALIGNMENTSHOWEDTHATTHEODNAWAS100％IDENTICALTOTHATCLONEDFROMHUMANPLACENTA、RFLACROPHAGESANDCOLON．ANDDIFIEREDBV1AND6AMINOACIDSFIOMTHATCLONEDFROMHJSTIOCYTESANDCHINESEPLACENTA,RESPECTIVELY．THECDNAWASSUBCLONEDINTOONEEUKARYOTICEXPRESSIONVECTORANDONEMAMMARYGLAND．SPECIFICEXPRESSIONVECTOR．THERECOMBINANTVECTOR,PCDNA3LYZ．WASTRANSFECTEDINTOCOS．1CELLSFOLLOWINGMIXINGWITHBRANCHED25KDAPOLYETHYLENIMINE．EXPRESSIONOFLLIⅣZWASLEVEALEDBVINDIRECTIMMUNOFIUORECEMEEUSINGSPECIFICANTIBODYAGAINSTHLYZ．ANOTHERRECOMBINANTVECTOR,PCXLYZ．WASINJECTEDINTOLACTATIONALMICEVIATAILVEINROUTE．EXPRESSIONOFHLYZATLEVELOF69．3RTG／MLWASDETECTEDINTHEMILKSAMPLESFROMTHEGENE．INJ’ECTEDMOUSEUSINGMICROCOCCALLYSISASSAY．TOTREATCOWMASTITISBYGENETHERAPY,THEHLYZCDNAWASSUBCLONEDINTOSELFCONSTRUCTEDMAMMARYGLANDSPECIFICEXPRESSIONVECTORP205C3ANDTHERECOMBINANTVECTORP205C3LYZWASINJECTEDINTOMIIKPOOLSOFTHEMAMMARYGLAND．THELLLYZACTIVITYATLEVELOF1．18P．G／MLWASDETECTEDINTHEMILKSAMPLESFROMTHEPLASMIDINJECTEDMAMMARYGLAND，WHICHMAINTAINEDFOR砒LEAST8DAYS．INTREATMENTL‘3X2001．TGOFP205C3LYZWASINJECTEDINTOTHEMILKPOOLSOFCOWSWITHMASTITISANDTHEEFFECTIVENESSOF廿LETREATMENTWASEVALUATEDBVC．M．T．OFTHEMILKSAMPLES．WITH出EEFFICIENCYOF4／14，14／14，12／14ATTHE2N正6TLLAND10THDAYPOSTINJECTION，RESPECTIVELY．INTREATMENT2．THEEFFECTIVENESSOFGENETHERAPYWASCOMPARED、VIT}1TLLATOFANTIBIOTICSTREATMENTANDCHINESEHERBSTREATMENT，WHICHSHOWEDTHATGENETHEMPYANDANTIBIOTICSTREATMENTHADANEFFECTIVENESSOF84．6％F19122AND88．9％8／9．RESPECTIVELY,BOTHOFWHICHWERESIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHATOFMYANXIAO69．2％，