簡(jiǎn)介：浙江大學(xué)博士后學(xué)位論文家蠶核型多角體病毒（BMNPV）LEF7基因及魚(yú)傳染性胰壞死病病毒（IPNV）VP2基因的分子生物學(xué)研究姓名王芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士后專(zhuān)業(yè)海洋生物學(xué)指導(dǎo)教師楊衛(wèi)軍張傳溪20060601浙江大學(xué)博士后出站報(bào)告ATG密碼子位于BMNPV基因組97014NO上游26BP、假定的翻譯起始密碼子ATG上游20BP處的ATCATTMOTIF開(kāi)始轉(zhuǎn)錄。2BMNPV印鮒基因的表達(dá)PCR擴(kuò)增出1593BP的印靜基因，并分別克隆至原核表達(dá)載體PET28A和供體質(zhì)粒PFASTBACHTA中，在大腸桿菌ESCHECHIACOLDBL21和桿狀病毒BACTOBAE表達(dá)系統(tǒng)中分別進(jìn)行了表達(dá)。GP64基因在大腸桿菌表達(dá)量約占細(xì)菌總蛋白的10％，表達(dá)產(chǎn)物主要存在于包涵體中，將表達(dá)產(chǎn)物割膠回收后免疫家兔制備了高效價(jià)的多克隆抗體。用該抗體去檢測(cè)昆蟲(chóng)細(xì)胞中印甜基因的表達(dá)產(chǎn)物野生BMNPV感染的家蠶細(xì)胞，均產(chǎn)生與預(yù)期大小相符的特異性條帶，說(shuō)明GP64抗體具有較好的特異性，為以后進(jìn)一步利用PULLDOWN和免疫共沉淀IP技術(shù)從家蠶培養(yǎng)細(xì)胞總蛋白中分離出與BMNPVGP64囊膜糖蛋白相互作用的蛋白提供了重要的研究基礎(chǔ)。3缺失幾丁質(zhì)酶基因的BMNPVBACMID的構(gòu)建及外源基因的表達(dá)將EGFP基因、BMNPV曲“基因上游1550BP及下游1997BP的片段，依次克隆到PSK載體中，構(gòu)建缺失CHIA基因的轉(zhuǎn)移載體PEGFP△CHIA。將轉(zhuǎn)移載體PEGFPA幽以DNA和BMNPVBACMIDDNA共轉(zhuǎn)染，經(jīng)過(guò)兩輪空斑篩選，然后轉(zhuǎn)化大腸桿菌DHL0B菌株，經(jīng)PCR鑒定得到了EGO基因取代了CHIA基因的重組BACMID，其中曲糾基因編碼區(qū)終止密碼子上游497BP的片段被保留。將輔助質(zhì)粒PMON7124轉(zhuǎn)入含重組BACMID的DHL0B菌株中，得到了能進(jìn)行外源基因表達(dá)的缺失曲謝基因的BACTOBAE表達(dá)系統(tǒng)DHIOBMBAC△CHIA。在缺失和未缺失CHIA基因的BACTOBAE表達(dá)系統(tǒng)中對(duì)魚(yú)傳染性胰壞死病病毒IPNVVP2基因的抗原決定區(qū)VP2E分別進(jìn)行了表達(dá)。SDSPAGE電泳結(jié)果顯示RBMBAEVP2E和RBMBACACHIAVP2E感染家蠶細(xì)胞后與對(duì)照相比均無(wú)明顯的特異表達(dá)條帶，但用抗VP2E多克隆抗體及6HIS單克隆抗體對(duì)表達(dá)產(chǎn)物分別進(jìn)行WESTERNBLOT分析表明，在32KDA位置均出現(xiàn)一明顯條帶，比預(yù)期分子量約大了6KDA左右。證明VP2E在重組病毒RBRNBAEVP2E和RBMBAEACHIAVP2E感染的細(xì)胞中均得到了表達(dá)，且表達(dá)量無(wú)明顯的差異。RBMBAEVP2C和RBMBAE△如“VP2E感染的蛹血淋巴均能產(chǎn)生一條約32KDA左右的條帶，與細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)物大小一致，且條帶沒(méi)有明顯的差異。4IPNVVP2抗原決定區(qū)VP2E研究2

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)____________密級(jí)______________ＵＤＣ____________單位代碼______________碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文論文題目不同微藻對(duì)縊蟶稚貝脂質(zhì)組成和揮發(fā)性風(fēng)味的影響研究及微藻揮發(fā)性物質(zhì)產(chǎn)生的分子生物學(xué)研究學(xué)號(hào)_________________________姓名_________________________專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)_________________________學(xué)院_________________________指導(dǎo)教師__________________________________________________論文提交日期2016年05月17日周率116461311074020海洋生物學(xué)陳海敏教授海洋學(xué)院徐繼林教授獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果，也不包含為獲得寧波大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)所使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說(shuō)明并表示了謝意。若有不實(shí)之處，本人愿意承擔(dān)相關(guān)法律責(zé)任。簽名周率日期2016年5月21日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解寧波大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。（保密的論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定）（保密的論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定）簽名___________導(dǎo)師簽名日期____________

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多海水魚(yú)致病性弧菌的分子生物學(xué)鑒定和OmpK共同抗原性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：IIILLLIJIIJILLJIIIY3292317密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文偽狂犬病病毒高溫傳代毒株生物學(xué)特性改變的分子基礎(chǔ)MOLECULARBASISFORTHECHANGESOFBIOLOGICALCHARACTERISTICOFHIGHTEMPERATUREPASSAGINGPSEUDORABIESVIRUS碩士研究生武吉強(qiáng)指導(dǎo)教師李國(guó)新研究員申請(qǐng)學(xué)位類(lèi)別獸醫(yī)碩士專(zhuān)業(yè)領(lǐng)域名稱(chēng)獸醫(yī)培養(yǎng)單位上海獸醫(yī)研究所研究生院2017年5月SECRECYNOCHINESEACADEMYOFAGRICULTURALSCIENCESDISSERTATIONMOLECULARBASISFORTHECHANGESOFBIOLOGICALCHARACTERISTICOFHIGHTEMPERATUREPASSAGINGPSEUDORABIESVIRUSMSCANDIDATEJIQIANGWUSUPERVISORPROFGUOXINLIDEGREEMASTEROFVETERINARYSCIENCESPECIALTYVETERINARYMEDICINEMAY2017

簡(jiǎn)介：西南大學(xué)博士學(xué)位論文HARPINECC蛋白對(duì)園藝植物的生物學(xué)效應(yīng)及其誘導(dǎo)抗性的分子機(jī)制解析姓名湯承申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)園藝學(xué)指導(dǎo)教師李名揚(yáng)吳伯驥20060601塑塑查蘭塑主堂竺堡塞原菌激發(fā)子相互作用的研究?jī)?nèi)容，同時(shí)為探討利用HARPINEEC蛋白開(kāi)發(fā)生物農(nóng)藥提供理論依據(jù)。1，通過(guò)構(gòu)建ERWINIACHRYSANTHEMICSCL006菌株的DNA文庫(kù)，克隆出CSCL006的HRPNECH基因，該基因全長(zhǎng)1020BP，GC含量5716％，編碼339個(gè)氨基酸，其中甘氨酸含量最高，為1593％，推導(dǎo)的蛋白等電點(diǎn)PI為607，分子量MW為34IKDAGENBANK登錄號(hào)為AY999000。氨基酸序列比較表明該基因編碼的HARPINECH與E刑INIACHRYSANTHEMIECL6和3937編碼的HARPIN蛋白同源性高，但與ERWINIACAROTOVORASUBSPECIES的HARPIN蛋白同源性較低。將CSCL006的HRPNECH基因克隆到表達(dá)載體PET28A，轉(zhuǎn)染大腸桿菌，高效表達(dá)出分子量為34KDA的蛋白，與預(yù)期大小一致，以抗HARPINECE豹抗體為探針做WESTERNBLOT，證實(shí)該蛋白確為HARPIN蛋白，并能引起煙葉的過(guò)敏反應(yīng)。2對(duì)從國(guó)內(nèi)息軟腐病的作物中分離鑒定出的ERWINIACHROTOVOIHSUBSPCHROTOV02一ACSDS001和CSDS008菌株，用半定量平板法檢測(cè)了CSDS001和CSDS008菌株的果膠酶、多聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶和纖維紊酶活性，兩個(gè)菌株均能產(chǎn)生上述四種胞外酶，但CSDS001胞外酶的活性明顯高于CSDS008；兩個(gè)菌株均能在48H內(nèi)引起歐芹軟腐病癥，CSDSOOL弓L起的病斑明顯較CSDS008大；二者的菌體均能引起煙草出現(xiàn)典型的HR，這與野生型的ERWINIACATOTOVOFASUBSPCAROT0VOR8ECC71明顯不同。通過(guò)構(gòu)建DNA文庫(kù)分別從CSDS001和CSDS008中克隆至UHRPN基因，CSDS001和CSDS008的例基因編碼區(qū)長(zhǎng)度均為1068雛，GENBANK登錄號(hào)分別為AY939927和AY999004。推導(dǎo)的CSDS001、CSDS008和ECC71的HRPN基因編碼356個(gè)氨基酸。但與ECC71相比，HARPINCSDSOOL有6個(gè)氨基酸不同，HARPINCSDS008有4個(gè)氨基酸不同；HARPINCSDS001和HARPINCSDS008相比僅有2個(gè)氨基酸差異，BPCSDS001的113位氨基酸為S，CSDS008為G，CSDS001的352位氨基酸為Q，CSDS008為K。對(duì)3個(gè)菌株的HARPINECC蛋白的高級(jí)結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，HARPINCSDS001的高級(jí)結(jié)構(gòu)與CSDS008和ECC71有較大的差別，主要體現(xiàn)在A螺旋和B折疊、TUM區(qū)、COIL區(qū)及抗原指數(shù)等。構(gòu)建了高效表達(dá)載體在大腸桿菌JML09中成功表達(dá)TCSDS001和CSDS008菌株的HRPN，重組HARPINECC蛋白經(jīng)與ECC71的抗體做WESTERNBLOT確認(rèn)。重組的CSDS001和CSDS008的的HARPINECC蛋白均能引起煙草和玻璃海棠典型的HR癥狀，均能促進(jìn)海棠的生長(zhǎng)發(fā)育，但兩種蛋白質(zhì)促進(jìn)海棠生長(zhǎng)發(fā)育的能力存在顯

簡(jiǎn)介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文小麥中間偃麥草抗銹病易位系的創(chuàng)制及分子生物學(xué)鑒定姓名高海波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)作物遺傳育種指導(dǎo)教師于卓馬有志20060501CREATIONANDMOLECULARBIOLOGICALIDENTIFICATIONOFWHEATTHINOPYRUM切TERMEDIUM1HNSLOCATIONLINEWITHRESISTANCETOWHEATRUSTABSTRAOTWHEATRUSTYELLOWRUST，STEMRUSTANDLEAFRUSTCAUSEDBYPUCCINIASTRIIFORMISFSPNITICI，PUCCINIARECONDITAFSPTITIEIANDPUCCINIAGRAMINIS￡SPTRITICIRESPECTIVELYISONEOFTHEMOSTSERIORSDISEASESINMANYREGIOILSOFTHEWODDBREEDINGANDUSEOFRESISTANTEULTIVARSISTHEMOSTECONOMICALANDEFFECTIVEAPPROACHTOCENTRELTHISDISEASE111ETHINOPYRUMINTERME擊RMWITHIMMUNERUSTRESISTANCE，AWHEATWILDRELATIVE，ISANIMPORTANTGENESSOURCEFORWHEATIMPROVEMENTINTHISSTUDYAWHEATTHINOPYRUMINTERMEDIUMALIENTRANSLOCATIONLINEWITHRUSTRESISTANCEC076Z4WASUSEDTOHYBRIDIZEWITHCOMMONWHEATTHEHFIREGENERANTSWEREOBTAINEDTHROUGHIMMATUREEMBRYOCULTURETWUSTRESISTANCETRANSLOCATIONLINESWEREISOLATEDFROMTHEBCF3OFFSPRINGWHICHWASDEVELOPEDBVSUCCESSIVEBACKCROSSBETWEENHFIANDCOMMONWHEATTHROUGHIDENTIFICATIONOFRUSTRESISTANCEANDCYTOGENETIES111EPRIMARILYRESULTSOFGISHANDCBANDINGSHOWEDTHATTHETRANSLOCATIONFRAGMENTWASLOCATEDON7DOR2DCHROMOSOMETWOMOLECULARMARKERSSPECIFICALLYFORTHINOPYRUMINTERMEDIUMCHROMATINWEREALSOSCREENEDINTHESEALIENTRANSLOCAFIONLINESBYSSRANDRAPDMETHODS1INTHETWOTRANSLOCATIONLINESWITHRUSTRESISTANCEDEVELOPEDFROMOFFSPRINGOFBCF3BYGISH，ONEWASSMALLHOMOZYGOTIEFRAGMENTTRANSLOCATIONWJ5TRANSLOCATION；ANOTHERWASACROSSTRANSLOEATIONFRWTMNSLOCATION2N嵋RESULTSOFRUSTRESISTANCEIDENTIFICATIONINDICATEDTHATTHESMALIFRAGMENTLRANSLOEATIONWASSTEMRUSTANDLCARRUSTRESISTANTANDTHEHETERZYGOTICACROSSTRANSLOCATIONWASYELLOWRUSTRESISTANT3THECHROMOSOMECOMPOSITIONOFSMAILFRAGMENTTRANSLOCATIONWASPRESUMEDTHROUGHSEQUENCEDGISHCBANDINGANDSSRMETHODSTHERESDTSHOWEDTHATABOUT55％OFREGIONATTERMINATIONALPARTOFSHORTARMBELONGEDTO7ASCHROMOSOMEOFCOMMONWHEATABOUT55％OFREGIONATTERMINATIONALPARTOFLONGARNLBELONGEDTOJ3CHROMOSOMEOFINTERMEDIATETHENOROPYREMAININGPARTSMAYBELONGTO7DOR2DCHROMOSOMEOFCOMMONWHEAT4111ROUGHRAPDANALYSISOFSMAILFRAGMENTTRANSLOCATIONLINEANDACROSSTRANSLOCATIONLINE。TWOMOLECULARMARKERSS一9ANDS3SPECIFICFORALIENTHINOPYRUMT掰ERME硪L冊(cè)EHROMATINWEREDEVELOPEDRESPECTIVELYFROMTHETWOTRANSLOCATIONLINESANOTHERMARKERS一8WASSHAREDBYTHETWOTRANSLOCATIONLINES’AMOLECULARMARKERX6SPECIFICFORALIENTHINOPYRUMINTERMEDIUMCHROMATINWASALSOOBTAINEDFROMTHESMALLFRAGMENTTRANSLOCATIONLINEKEYWORDSWHEATRUSTDISEASE；THINOPYRUMINTERMEDIUM；TRANSLOCATIONLINE；CHROMOSOMELOCATIONRAPDSSRDIRECTEDBYPROFYUZHUOPROFMAYOUZHIAPPIICANTFORMASTERDEGREEGAOHAIBOGENETICSANDBREEDINGOFCROPAGRONOMYCOLLEGE，INNERMONGOLIAA鰣CULTURALUNIVERSITYHOHHOT010019，CHINA

簡(jiǎn)介：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文一粒系小麥種質(zhì)資源分子生物學(xué)研究姓名馬昭才申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師鄭有良20060601一粒系小麥種質(zhì)資源分子生物學(xué)研究在栽培一粒小麥、野生一粒小麥和烏拉爾圖小麥中，RAMP標(biāo)記的多態(tài)性分別為906％、930％和945％。利用RAMP擴(kuò)增的條帶計(jì)算材料間的遺傳相似性系數(shù)，發(fā)現(xiàn)一粒系小麥內(nèi)整體遺傳多樣性為O3317。其中，烏拉爾圖小麥的遺傳多樣性最高為03219，而栽培一粒小麥的遺傳多樣性則最低為O1437。遺傳聚類(lèi)分析表明，一粒系小麥很明顯地分為兩大類(lèi)。其中，栽培一粒小麥和野生一粒小麥聚為一類(lèi)，烏拉爾圖小麥則聚為另一類(lèi)。4通過(guò)基因組PCR方法，從栽培一粒小麥和野生一粒小麥中分離出2個(gè)I型低分子量谷蛋白亞基基因，分別命名為L(zhǎng)MWEM登錄號(hào)DQ234068和LMWEB登錄號(hào)DQ234069。LMWEM和LMWEB編碼區(qū)長(zhǎng)度分別為1041BP和885BP，相應(yīng)可編碼345和293個(gè)氨基酸殘基的多肽，均無(wú)N末端區(qū)而具有信號(hào)肽、富含脯氨酸和谷氨酰胺的中部重復(fù)區(qū)、C末端非重復(fù)區(qū)的典型I型低分子量谷蛋白亞基結(jié)構(gòu)。進(jìn)一步分析表明，LMWEM基因與已報(bào)道的一個(gè)基因序列完全相同，而LMWEB為新基因。對(duì)已知的所有I型低分子量谷蛋白基因基因系統(tǒng)進(jìn)化分析表明，這些基因可分為兩大類(lèi)，其中的一類(lèi)又可分為5個(gè)亞類(lèi)。而且，目前所已知的I型低分子量谷蛋白亞基基因均定位于1A染色體上，從B和D基因組中尚未得到I型低分子量谷蛋白亞基基因。5應(yīng)用基因組PCR方法，從一粒系小麥中分離出8個(gè)A醇溶蛋白基因序列，其中2個(gè)源自烏拉爾圖小麥、2個(gè)源自栽培一粒小麥、4個(gè)源自野生一粒小麥。這些基因分別定名為砂一UL、GTIU2、砂一ML、GLIM2、砂一BL、GLIB2、GHB3和砂一64，其基因登錄號(hào)依次為DQ401696至DQ401703。這8個(gè)A一醇溶蛋白基因均具有典型曠醇溶蛋白的一般結(jié)構(gòu)，由信號(hào)肽、N一端重復(fù)區(qū)，兩個(gè)多聚谷氨酰胺區(qū)和兩個(gè)特征區(qū)組成，其中DQ401696，DQ401698和DQ401700為功能基因，其它5個(gè)為假基因。研究表明，在多倍體小麥形成前，高比例的旺醇溶蛋白假基因在二倍體小麥中已經(jīng)存在，而且栽培和野生一粒小麥可能參與了普通小麥的形成。關(guān)鍵詞一粒系小麥；種質(zhì)資源；遺傳多樣性；分子標(biāo)記；基因克隆2

簡(jiǎn)介：刪㈣㈣㈣川Y335214‘R圈海島棉H276A雄性不育的細(xì)胞學(xué)與分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究孔?！跈巍?。零凄西大學(xué)二。一七年六月廣西大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)聲明本人聲明所呈交的論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除己特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果，也不包含本人或他人為獲得廣西大學(xué)或其它單位的學(xué)位而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同事對(duì)本論文的研究工作所做的貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確說(shuō)明。本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所完成的學(xué)位論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬?gòu)V西大學(xué)。本人授權(quán)廣西大學(xué)擁有學(xué)位論文的部分使用權(quán)，即學(xué)校有權(quán)保存并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于口保密?；夭槐Ｃ?。請(qǐng)?jiān)谝陨舷鄳?yīng)方框內(nèi)打“√”論文作者簽名名乙群軍指導(dǎo)教師簽名／乳名約陽(yáng)作者聯(lián)系電話(huà)J／55％島侈侈日期矽門(mén)∥易秒日期功，7莎、勱電子郵箱汐G而弩J協(xié)∥I汐／0／口秒／錳歷從

簡(jiǎn)介：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文禾谷鐮刀菌（FUSARIUMGRAMINEARUM）致病力鑒定、毒素檢測(cè)及其分子生物學(xué)研究姓名武愛(ài)波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)作物遺傳育種指導(dǎo)教師廖玉才20050501禾谷鐮刀菌FUSARIUMGRAMINEARUM致病力鑒定、毒素檢測(cè)及其分子生物學(xué)研究摘要由鐮刀菌引起的赤霉病是危害多種糧食作物的一種重要病害，廣泛分布于世界溫暖潮濕地區(qū)。赤霉病不僅造成產(chǎn)量損失，而且產(chǎn)生的真菌毒紊嚴(yán)重威脅人畜健康。在我國(guó)，禾谷鐮刀菌FUSARIUMGRAMINEARUMSCHWABE是小麥赤霉病的主要致病菌種，其有性階段為玉蜀黍赤霉GIBBERELLAZEAE。因此，全面分析來(lái)自我國(guó)不同地區(qū)的小麥禾谷鐮刀菌的致病力及產(chǎn)毒類(lèi)型，將為深入分析病菌致病機(jī)理，揭示禾谷鐮刀菌一小麥互作機(jī)制，建立毒素分析和食品安全檢測(cè)新方法提供資料。本研究以364個(gè)中國(guó)禾谷鐮刀菌菌株、39個(gè)國(guó)外禾谷鐮刀菌菌株為材料，主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下1選擇地理來(lái)源不同的58個(gè)禾谷鐮刀菌菌株，連續(xù)兩年在田間花期接種3個(gè)抗赤霉病性不同的小麥品種，鑒定其致病力。結(jié)果表明，供試菌株在不同品種中的致病力均表現(xiàn)出極顯著差異，說(shuō)明禾谷鐮刀菌菌株的致病力受其自身的遺傳物質(zhì)控制而同一菌株的致病力在高感品種和高抗品種中的高度相關(guān)性，表明這兩類(lèi)小麥品種更適合在田問(wèn)花期接種鑒定禾谷鐮刀菌的致病力。2選用強(qiáng)、中、弱致病力的3個(gè)禾谷鐮刀菌菌株，接種6個(gè)小麥品種的胚芽鞘，探索用禾谷鐮刀菌接種小麥胚芽鞘的方法和條件。用蘸有分生孢子的濾紙片接種剪去芽尖的胚芽鞘，七天后調(diào)查褐色病斑長(zhǎng)度，用禾谷鐮刀菌特異引物進(jìn)行PCR檢測(cè)證實(shí)接種病菌確已侵入幼芽。進(jìn)一步用同樣一套58個(gè)禾谷鐮刀菌菌株，接種高感小麥品種安農(nóng)8455胚芽鞘，不同菌株形成的病斑長(zhǎng)度差異極顯著，胚芽鞘接種結(jié)果與花期接種結(jié)果之間呈極顯著相關(guān)性。這些結(jié)果說(shuō)明小麥胚芽鞘接種是一種快速、簡(jiǎn)便、可靠的禾谷鐮刀菌致病力鑒定方法。3通過(guò)系統(tǒng)比較6種不同接種結(jié)果，篩選了10個(gè)代表性中國(guó)禾谷鐮刀菌菌株，并用于國(guó)外禾谷鐮刀菌菌株的致病力鑒定和小麥品種抗赤霉病性鑒定。這些菌株將適用于致病力相關(guān)分子水平研究，其各種參數(shù)指標(biāo)可以作為中國(guó)禾谷鐮刀菌群體分析的依據(jù)。4在室內(nèi)胚芽鞘接種試驗(yàn)中，花期抗病的品種表現(xiàn)比感病的品種更為感病，說(shuō)明小麥抗赤霉病性中可能存在成株期抗性機(jī)制。5用HPLC法，分析檢測(cè)了禾谷鐮刀菌在體外培養(yǎng)及病麥粒中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇DON毒素，結(jié)果表明，毒素DON的檢測(cè)譜峰峰形清晰明顯，無(wú)干擾，保留時(shí)間為95分鐘左右，這說(shuō)明該HPLC法可準(zhǔn)確檢測(cè)液體和固體樣品中的DON毒素。

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文土壤消毒及土傳病原真菌的分子生物學(xué)鑒定姓名李園申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)農(nóng)藥學(xué)指導(dǎo)教師曹坳程20060601ABSTRACT’I’HEPUIPOSEOFTHERESEARCHLSTOSCREENOUTSOMEE丘EC“VEMETHYLBMINLDEAITEMATIVESARIDDEVEL叩A(chǔ)R叩IDAILDRELIABLEMOLECULARMEMODTOIDENTIFYANDQUANTIFYSOILBOME凡N百SOMEIMPONAILISOILBOMEFUNGIWEREISOLATEDBY噸DILIONALMECHODANDTHEITSREGIONSOFTHEISOLATEDFUIL西WEREC10NEDAILDSEQUENCED，SP。CIESSPEC訊C塒M∞B船EDTHERDNAITSWEREDESIGILEDTHENWEILSEDREAL砸MEPCRTOQUANTI母SOILBOME缸垂INTLLESOILS帥PLESWHICHWERET|CATED誦TTLDI肫咒N(xiāo)TDOSAGEOFSUI鼬YLNUORIDENEFOLLO咖G∞SULTSWE代0BIAINED1SOILFIIMIGATION訂鞠TED誦ⅡLDI毹MNTDOSAGEOFSULFIL叫NUOME，THERESULTSOFPRELIMIIL研EXP酬MELLTSSHOWED111ATSUI岫LNUO謝EAT山ERATCOF5“LO。G幾■352LO。班，PR髂廿LTED900DCONTMLE掃丘CACYTOFHJDRF啪DJ筘PDⅢM，戈P(guān)卅E，0NITHERESU№WEREIDENTICAL、ⅣITLLMER齬EARCHR囂柚TSWHICHWE陀DONEIILMEFIELDBYOURLDBONTORYATLLERESUHSSHOWMATSULFHRYLFLUOFIDEISAPROMISINGSOIL血MIG蛐T2SONLEIMPARTALLTSOIIBOMEFLLIL百I(mǎi)NCLUDING腳印聃。陽(yáng)C刪LCF，P妙￡叩FOR口帆船細(xì)昭，F(xiàn)細(xì)啪。礙E￡P(guān)O，硼，局柚F刪F驢口H正口K塒LDM肌，一，F(xiàn)EM口，婦∞，口州WE托IS01ATED，鋤DSOMEOMEF∞LATEDPATHO學(xué)％FILNGI，INDUDINGP歸P腩OMPD坩SFM’廿，PYFOP曲O，口60曲肌P，如E，腑一肼VEMC曲M，F(xiàn)塒DRIUM酗【ONI，OME，F(xiàn)心口RTUM鏟DMIN∞NLM，F(xiàn)淞口R沁M(jìn)SOLNNI。YERNCILLIUM如HLI口E，肋掃俯CMP陀口WERECOIKCTED，3FUNGI’SDNAW黜EX拉ACTEDBYUSINGIMPMVEDCTABMEMOD，NLEITS州∞SOFF憾M’UMSOLANI，F(xiàn)啦D∽TSPPPHYT叩H￡HOMC叩SICI，PHYTOPHTHORNINJ酞TNM。V每R畦DMUM出?？贓，刪F“M口P硎FD魯，州口N刪WE∞D(zhuǎn)ONED艄DSEQUTMOED’THELENGTHOFT11E劬GM曲TSWCRE544咄5螄，793BP，884BP，54LBP，866BP麟PECTIVCIYTHE瞄UNSOFSEQU％咄蛐L燦SHOWLH砒，如口，缸M∞，D耐鋤DF婦口“M點(diǎn)島PA托LIKELYTOBELONGTOF如口一肼LN|掣PDN棚，點(diǎn)PM獸，0戚OM盯TILNGI’88鄲L曲倦WE∞ALLID咖6∞L謝IH山EIFN蛐囂4SP∞I黯唧∞I6C呻L粥KFIIL，K魁，UYILLL慟M2，DLLZL佃L吐BASEDTHERDNARRSOFF細(xì)礎(chǔ)刪卿瞄PO帆P蛐叩FOM唧，塒蛐D腸恤F胍刪如柚鐘WEREDESI印ED叫DHAVEBEEFICON缶MCDGOODSP∞近CITY蛐DSENSMVI竹WH釩ME鋤刪T鋤PEMTIL∞IS65℃5USIIIGR飴LDMEPCRAND扛?jìng)僆TIO蛆LMCLLLODTOQ啪D母LLLESOIL‰IEFILN茸ILIME∞ILSALNPLE8WHICH、VERE撇D訊LLLDIFFBR∞TDO鈾GCOFSUL如RYLNUORIDE，THER囂ULLSSHO、VEDMATSUL血RYLNU嘶DEH舔GOODCON咖L疆酏TTO，K口一“M喲肇D蹦取姐ILILPONANCPATLLOGELIICORG蛐I啪ONS咖WT髓TYINM蚰CHENGCOILLLTYANDAR叩ID肌DRELIABLCMOLCCULARMETHODT0ID衄D母鋤DQILAND母∞ILBOMEFILNGI蛐D冊(cè)LU8FETHEE懂酏TOFSONFILLNIG鰣ONW酗DAVCIOPED1TEALDMEPCR啪QIL蛐D母DNAT鋤PLCTQUICKIY，ACCU扭試Y蚰DS∞SIDVELY11LEMINGOF脅1虹MEPATTOEVAILLATETLLEE岱∞TOF踟L鯽LNUORIDEC蛆A曬RDANEWTOOLF研THEFKLDOFP∞6CIDE咒S翻幢HKEY州8SOILDISITI觸協(xié)TIONS；SO訂BOMEFLLN百；C10NEALLDSEQU肌CE畔I丘CP咖∞；REAL坷MEPR

簡(jiǎn)介：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文江浙部分地區(qū)不同禽源新城疫病毒的分子流行病學(xué)及其生物學(xué)特性姓名張青嫻申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師鮑恩東李銀20060601生窯摘要江浙部分地區(qū)不同禽源新城疫病毒的分子流行病學(xué)及其生物學(xué)特性摘要新城瘦N【是由新城疫病毒NIV引起的一一種禽類(lèi)的急性、高度接觸性、毀滅性疾病，被列為A類(lèi)動(dòng)物傳染病，給世界各地養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)巨大威脅。由于NDV是單股負(fù)鏈RNA病毒，有很高的變異能力，其基因型的變化非常迅速，因而近年來(lái)不同禽源8IF的致貊力也明顯增強(qiáng)。目前對(duì)病毒的分子流行病學(xué)研究主要有三種方法，利用單克隆抗體技術(shù)進(jìn)行的基因分型，限制性核酸內(nèi)切酶分析，特定基因片段的體外擴(kuò)增及序列測(cè)定和繪制系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)。女口果加強(qiáng)ND流行毒株分子流行病學(xué)研究，并篩選出不同禽源均適用的具有優(yōu)良免疫原性的毒株作為良好的疫苗株，則可以一定程度上防止該病的流行。本試驗(yàn)從江蘇及其周?chē)貐^(qū)分離到源于三黃雞、烏骨雞、鴨、鵝、孔雀等禽類(lèi)的12株NDV，取其具有代表性的7株進(jìn)行了基因分型、生物學(xué)特性研究和免瘦原性比較。選擇F基IZ1起始密碼子開(kāi)始的卜38JBP核苷酸序列，對(duì)其進(jìn)行克隆及核苷酸序列分析。測(cè)定結(jié)果表明，其中6個(gè)毒株F蛋白的裂解位點(diǎn)氮基酸組成為”2R／KROK／RR’，具有強(qiáng)毒株裂解位點(diǎn)氨基酸組成特點(diǎn)，5ICPI和IVPI測(cè)定結(jié)果相吻合核苷酸序列同源性分析顯示，6株分離毒株核苷酸序列具有959YO一100％的同源性，與F。。E，的核苷酸序列同源性達(dá)858FO893YO。對(duì)本試驗(yàn)的6個(gè)毒株和國(guó)內(nèi)現(xiàn)已克隆測(cè)序的NDV毒株以及國(guó)外部分毒株共23株繪制基因系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)，結(jié)果表明6株歸屬于基因VLI型。本試驗(yàn)測(cè)定了分離于三黃雞、烏骨雞、孔雀、鵝、鴨等不同禽源的7株NIV的血凝特性、血凝解脫時(shí)間、雞胚半數(shù)死亡量、腦內(nèi)致病指數(shù)、靜脈致病指數(shù)，并與NDV強(qiáng)毒株F。。E。進(jìn)行了比較，試驗(yàn)結(jié)果顯示，7株NDV的毒力除分離自鴨的一株Y01屬于弱毒株外，其余6株的毒力與一。E。相當(dāng)。采用分離的基因V型的NDV毒株和F。。E。制成滅活疫苗，免疫試驗(yàn)雞，進(jìn)行免疫保護(hù)力比較試驗(yàn)。結(jié)果表明8株NDV的免疫原性有很大差異，S“J00對(duì)8株NDV的D值均大于等于I，具有較高的攻毒保護(hù)率，故免疫原性最佳F。。E。、SHJ02、E01、KQ02、Y03、Y01依次降低，WGJ02對(duì)其它7株病毒的D值均小于1，攻毒保護(hù)率最低，免疫原性最差。SHJ00、SHJ02具有艮好的免疫原性，

簡(jiǎn)介：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文黑麥屬種質(zhì)資源分子生物學(xué)研究姓名尚海英申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師鄭有良200606011■●F影’四川農(nóng)業(yè)大學(xué)博士論文標(biāo)記獲得的聚類(lèi)圖能夠真實(shí)地反映黑麥屬種的水平上的系統(tǒng)親緣關(guān)系，但不能很有效地揭示不同地理來(lái)源的栽培黑麥材料的馴化過(guò)程。3從黑麥屬4個(gè)種10個(gè)亞種共23份材料中總共獲得129個(gè)5SRRNA基因序列，將這些序列分別劃歸入兩種長(zhǎng)度單元480BP的長(zhǎng)單元10NGR1和460BP的短單元SHORTRI依據(jù)5SRDNA序列差異不能有效區(qū)分黑麥屬各物種。利用BLAST搜索到分別與LONGR1和SHORTRI一致性高的兩套5SRDNA單元序列1LONGR1SECALE卜LONGP1AGROPYRON；KENGYILIALONGJ1THINOPYRUM；2SHORTRLSECALELONGS1PSEUDOROEGNERIA；KENGYILIASHORTJLTHINOPYRUMSHORTVIDASYPYRUM。每套序列分別用最大似然法進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果表明，黑麥屬5SRDNA單元以無(wú)分子鐘NONCLOCK模式分化。從最大似然樹(shù)上可以看／LLONGR1單元遵循HKY替換模式，而SHORTRI單元遵循HKYG替換模型。LONGRL與LONGPL的進(jìn)化關(guān)系最近，其次為L(zhǎng)ONGJL；而SHORTRI與LONGSL的關(guān)系最近，其次為SHORTJL，與SHORTV1的關(guān)系相對(duì)較遠(yuǎn)。貝葉斯統(tǒng)計(jì)分析也獲得了一致的結(jié)果。4利用根據(jù)已知LMWGS序列設(shè)計(jì)的一對(duì)引物對(duì)黑麥屬各物種基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果在3份SYLVESTRE中獲得了耳的片段。對(duì)SSYLVESTRE材料R955／90的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行回收、克隆、測(cè)序，共得到3個(gè)基因序列SSYT，SSY2和SSY3，GENBANK登錄號(hào)分別為AY829368、AY829369和AY829370。SSYL，SSY2和SSY3基因編碼的氨基酸序列均包含4個(gè)區(qū)段高度保守的20個(gè)氨基酸殘基組成的信號(hào)肽區(qū)域、由13個(gè)氨基酸殘基組成的N端保守區(qū)、由可重復(fù)短肽組成的高度變異的重復(fù)區(qū)和C一端保守區(qū)。由于N端保守區(qū)第一個(gè)氨基酸均為MET，所以SSYL，SSY2和SSY3均為L(zhǎng)MWM型。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明，所獲得的3個(gè)LMW谷蛋白類(lèi)似基因與小麥的LMWGS基因和大麥的BHORDEIN基因具較高的一致性。與小麥GLUA3、GLUB3和GIUD3位點(diǎn)LMWGS序列同源關(guān)系比較分析也取得了一致的結(jié)果。這些結(jié)果說(shuō)明，在SSYLVESTRE的R基因組上可能存在一位點(diǎn)具有小麥及其近緣物種GLU3位點(diǎn)的功能，該位點(diǎn)暫命名為GLUR3。關(guān)鍵詞黑麥屬，貯藏蛋白，SSR，5SRRNA，LMWGS●●LR；P，J

簡(jiǎn)介：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文15個(gè)塊菌菌株的形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定姓名方明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師姚方杰20060601ZHL和ZH一2歸為中國(guó)塊菌，但是通過(guò)ITS的序列分析發(fā)現(xiàn)，與印度塊菌于』NDICUMAFL06884同源性高達(dá)9982％，再結(jié)合中國(guó)塊菌同印度塊菌在子囊果的顏色、子囊果表面的疣狀結(jié)構(gòu)、產(chǎn)孢組織的顏色、菌脈的顏色、子囊孢子的顏色、子囊孢子的表面紋飾等諸多特征，推測(cè)中國(guó)塊菌同印度塊菌應(yīng)屬于同物異名。6對(duì)系統(tǒng)關(guān)系圖中進(jìn)行整體分析，并結(jié)合形態(tài)學(xué)上的特征可將供試菌株可分為三個(gè)類(lèi)群類(lèi)群A即分支IⅡⅢ。它們的子囊果表面顏色為褐色至黑褐色，子囊孢子表面均為刺狀紋飾。類(lèi)群B即分支Ⅳ，子囊果表面顏色較類(lèi)群A的顏色淺，為黃色至褐色，孢子表面紋飾為刺狀的擬凹陷塊菌類(lèi)。類(lèi)群C即分支V，除ZH一3外子囊果表面顏色為淺黃色至黃褐色，子囊孢子表面均為明顯的網(wǎng)格狀紋飾，而ZH一3的子囊果表面顏色較深，在形態(tài)上更接近印度塊菌。關(guān)鍵詞塊菌，形態(tài)學(xué)鑒定。分子生物學(xué)鑒定，線(xiàn)粒體DNA序列，核蝣列Ⅱ

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文斑嘴鴨源新城疫病毒的分離鑒定及分子生物學(xué)特性的研究姓名陳建霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師秦愛(ài)建20070501揚(yáng)州大學(xué)碩士論文2斑嘴鴨源新城疫病毒的分離鑒定及分子生物學(xué)特性的研究研究生陳建霞導(dǎo)師秦愛(ài)建教授摘要新城疫NEWCASTLEDISEASE，ND仍然是威脅養(yǎng)禽業(yè)的一種主要疾病，給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的損失，國(guó)際獸醫(yī)局OFFICEINTERNATIONDESEPIZOOTIES，OIE將其與高致病性禽流感一起列為危害養(yǎng)禽業(yè)的必須報(bào)告的疾病。自1997年以來(lái)，華南和華東地區(qū)部分省市發(fā)生了新城疫病毒NEWCASTLEDISEASEVIRUS，NDV感染鵝的病例，雖然各地采取了積極的防治措施，但該病仍然逐漸蔓延、流行。有不少學(xué)者對(duì)此進(jìn)行了研究，但有關(guān)病原的生物學(xué)特性及流行病學(xué)等方面，仍存在很多疑問(wèn)。I斑嘴鴨源新城疫病毒的分離純化與毒力鑒定本研究從鹽城國(guó)家自然保護(hù)區(qū)的斑嘴鴨群中，采集肛拭子，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)處理接種雞胚，收集24H后致死雞胚的尿囊液，采用病毒蝕斑純化技術(shù)純化病毒，結(jié)果分離獲得三株病毒；通過(guò)透射電鏡觀察，新分離病毒里典型的新城疫病毒粒子的形態(tài)結(jié)構(gòu)；以抗NDV雞多抗血清為一抗作制接免疫熒光試驗(yàn)IFA，結(jié)果觀察到特異性的亮綠色熒光，證明該病毒為新城疫病毒，分別命名為7XJS061、8XJS062、L2JS063。用這些病毒接種雞胚，結(jié)果雞胚死亡，胚體全身出血。病毒的主要致病指數(shù)如雞胚平均死亡時(shí)間MDT、1ET齡雛雞腦內(nèi)接種指數(shù)ICPI及組織培養(yǎng)半數(shù)感染量TCIDS0的檢測(cè)結(jié)果表明，3株病毒的MDT分別為52H、48H、46H，ICPI為1．523L2JS063，TCID50分別為105625／0．1ML、10725／0．1ML、108。625／0．1ML。試驗(yàn)結(jié)果證明來(lái)源于野生斑嘴鴨的3株NDV為新城疫強(qiáng)毒。22斑嘴鴨源新城疫病毒融合蛋白FUSIONPROTEIN基因的克隆及序列分析根據(jù)GENBANK上已發(fā)表的NDVF基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)擴(kuò)增F基因的引物，用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RTPCR擴(kuò)增。并經(jīng)克隆和測(cè)序，結(jié)果獲得了野鴨源NDV7XJS061、8XJS062、L2JS063F基因約1662BP的片段，序列分析結(jié)果表明，3株野鴨源NDVF蛋白的裂解序列為“2R／K．RQ．K／R．R．F¨7，與NDV強(qiáng)毒株的特征一

簡(jiǎn)介：THESISFORMASTER’SDEGREE，SHANXIUNIVERSITY,2012MOLECULARPROPERTIESANDBIOLOGICALFUNCTIONSOF刪TAND61Ⅳ么●T■●INLOCUSTAMTGRATORTASTUDENTNAMEHUANHUANZHANGSUPERVISORPROF．JIANZHENZHANGMAJORSPECIALTYPROF．EN．BOMAZOOLOGYANIMALBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYDEPARTMENTCOLLEGEOFLIFESCIENCERESEARCHDURATION2009．092012．06JUNE，20123．2．3飛蝗葡萄糖胺．6．磷酸Ⅳ乙酰轉(zhuǎn)移酶基因的RNA干擾結(jié)果???????．．353．3討論????????????????????????????????????????36第四章飛蝗葡萄糖胺6磷酸一臚乙酰轉(zhuǎn)移酶原核蛋白表達(dá)與酶活測(cè)定?????394．1材料與方法?????????????????????????????394．1．1材料與試劑????????????????????????????394．1．2飛蝗葡萄糖胺．6．磷酸．Ⅳ乙酰轉(zhuǎn)移酶重組蛋白的原核表達(dá)及純化?????．．394．1．3飛蝗葡萄糖胺．6．磷酸Ⅳ乙酰轉(zhuǎn)移酶的活性測(cè)定????????????．414．2結(jié)果??????????????????????????????????????????414．2．1飛蝗葡萄糖胺．6．磷酸Ⅳ乙酰轉(zhuǎn)移酶重組蛋白的原核表達(dá)結(jié)果??????．．414．2．2飛蝗葡萄糖胺．6．磷酸Ⅳ乙酰轉(zhuǎn)移酶的酶活性分析???????????．434．3討論??????????????????????????????????????????44全文總結(jié)???????????????????????????????．45參考文獻(xiàn)???????????????????????????????．47研究成果???????????????????????????????．55致{射???????????????????????????????????????????．．56個(gè)人簡(jiǎn)況及聯(lián)系方式??????????????????????????．57承諾書(shū)??????????????????????????????．58學(xué)位論文使用授權(quán)聲明?????????????????????????．59