簡介：四川農(nóng)業(yè)大學碩L學位論文小麥特殊材料R149的細胞生物學和分子生物學研究王翔指導教師廷止瞳越擐學科專業(yè)J目墅剛勤野生_一研兜方向鹽王細胞生塑生2005年5月ABSTRACTSTUDYONTHESPECIALWHEATMATIERIALR149BASEDONCYTOBIOLOGYANDMOLECULARBIOLOGYWANGXIANGPLANTGENETICSANDBREEDINGDIRECTEDBYPROF．RENZHENGLONGADVANCEDWHEATCULTIVARR149WHOSEPARENTSARECOPMONWHEAT伢ITICUMAESTLVUMANDRYESECALECEREALSISBREDBYNEWCHROMOSOMEENGINEERINGWAYS“THEUSEOFMONOSOMICRYEADDITION1INESFORTRANSFERRINGRYECHROMATININTOWHEAT”．USINGTHECBANDINGTECHNIQUE，GENOMEINSITUHYBRIDIZATION，ANDPROTEINSEPERATIONTECHNIQUEANDPCRSTUDIEDR149CULTIVARSYSTEMATICALLY．INORDERTOVERIFYTHETHEORY“INDUCTIONOFSMALL一SEGMENTTRANSLOCATION”．THESTUDIESSUBSTANTI8TEDFEASIBILITYOFTHETHEORY．1．THESTUDYRESULTSSUGGESTEDTHATTHEMONOSOMICADDEDRYECHROMOSOMESINWHEATCOULDINDUCETRANSLOCATIONBETWEENWHEATANDRYECHROMOSOMESEFFECTIVELYANDTHATTHEADDEDMONOSOMICCOULDINDUCESMAL1SEGMENTTRANSLOCATIONSSTRANSLOCATIONWITHHIGHFREQUENCY．THETHEORY“INDUCTIONOFSSTRANSLOCATION”ISSIGNIFICANTINPLANTBREEDINGCOMPAREWITHOTHERWAYSOFINDUCTIONOFTRANSLOCATION．2．THERESULTSOFTRADITIONALCYTOLOGYTECHNIQUESSHOWEDTHATR149HASANORMALCYTOLOGYBEHAVIORANDSTABLEGENETICSYSTEM．WHEREAS，THEPLANTSEXHIBITEDPHENOTYPICALTERATIONCOMPAREDWITHITSWHEATPARENT．3．THERESULTSOFTHEGISHINDICATEDTHATTHECONTROLMATERIALSSHOWEDALIENCHROMOSOMECLEARLYANDR149HADARELATIVEREGULARHYBRIDIZATIONSITEALONGTHESPECIALCHROMOSOMES．THEREFORE，WECOULDCONCLUDETHATITISPOSSIBLETHATR149HADSOMESEGMENTSOFTHERYECHROMOSOME．4．USINGTHEPRIMERSOFSPECIFICREPEATEDSEQUENCEFROMS．CEREALEAMPLIFIEDTHER149，THERESULTSSHOWEDTHATPSCLT9．1、PSCH20COULDAMPLIFIEDTHEPRODUCTSCORRECTLY．5．BASEDONSDSPAGEANALYSIS，R149SHOWEDNORYESPECIALGLUTENINPROTEIN．Ⅱ

簡介：浙江大學博士學位論文草莓果實磷脂酶D生理生化及分子生物學特性研究姓名袁海英申請學位級別博士專業(yè)果樹學指導教師陳力耕20050501分類號UDC密級單位代碼編號研究生學號草莓果實磷脂酶D生理生化及分子生物學特性研究論文答辯日期圣QQ量生魚目壘旦答辯委員會主席銎旦苤數(shù)攮墮昱蜇塹盤堂盔生瞳薟堂丕答辯委員會成員苤盈至數(shù)握擅昱逝塹太堂壅生院藍苤壓進墮鯉窺雖逝塹省壅科院園苧壓塍五塞麴援墟昱逝江態(tài)堂盛生瞳墨撾逝睦左塹麴攫擅昱浙江塞堂壅生瞳墨撾壓論文評閱人撻題拯數(shù)援擅昱垡直壅業(yè)盍堂園苧堂院奎道壺塾援蠖昱酉直壅、業(yè)太堂圄苧丕重焦熬援盟昱直立盤些盤堂國苧堂瞳彭扛顯熬援熊昱坐主盤塞園苧撻堂堂院萱窒撾麴攫擅昱逝江太堂壅生隧園苧丕

簡介：7761【3博士學位論文論文趔II型醫(yī)型坐E她鋤歪叫曲墊鹽建絲口2壁一鹽I塑堂生始F￡盈塾筐一一F1‘女I韓寡|』1一J一一指1，救『『『J垃衛(wèi)當盟控一學中IIIQH一～堋地J物翟一I巾牛L垸一二L趨11翌芒J逍一挺變I。IJ釘世五生互』JJ二』旦一浙江大學博士學位論文羅氏沼蝦兩種不同的熱休克蛋白70分子生物學特征和功能這種特殊的表達方式說明MARHSP70在羅氏沼蝦熱損傷保護中起著極其重要的作用，同時我們推測MARHSP70這種獨特的功能可能與其N一末端和C末端的缺失結(jié)構相關。為了進一步分析這兩種分子在胞內(nèi)的表達情況，我們采用原位雜交和免疫組織化學在中樞神經(jīng)和肝胰腺兩種組織中進行了表達定位研究，結(jié)果表明MARHSC70和熱誘導后的MARHSP70在絕大多數(shù)細胞都有表達，尤其是在神經(jīng)分泌細胞和肝胰腺的R和F細胞中表達水平較高，并且熱誘導后的MARHSP70的表達水平遠高于MARHSC70，這些結(jié)果進一步表明MARHSP70在熱應激保護中扮演著重要的角色，同時也說明熱應激條件下，絕大部分細胞快速啟動這種基因的表達。為了進一步探討羅氏沼蝦這種誘導型MAR_HSP70的功能，我們構建了MARHSP70一PET一28A原核表達系統(tǒng)，成功地表達了MARHSP70，發(fā)現(xiàn)在IPTG誘導5HR后，目的蛋白可達到細菌總蛋白的50％以上，同時通過免疫印跡技術證明了這種蛋白的免疫原性，而且通過優(yōu)化條件，采用低溫誘導，獲得了一定量可溶性MARHSP70。在MARHSP70功能分析中，我們建立了MARHSP70的活性檢測系統(tǒng)，在衛(wèi)COLIBL21DE3導入這一基因并誘導表達，發(fā)現(xiàn)能夠提高熱刺激后細菌的生存率，這說明M”一HSP70在一定程度上起到了對細菌的保護作用，這為誘導型HSP70S功能研究提供了很好的模型和思路?？傊?，這是第一次從蝦類中克隆到兩種熱休克蛋白70S基因，并研究了它們的表達特征及可能的功能，這兩個基因具有大多數(shù)物種HSP70S的共性，而更重要的是，它們自身的特殊性，這些特殊性對于認識水生無脊椎動物HSP70S的結(jié)構及功能有著重要的理論價值和研究前景。關鍵詞羅氏沼蝦，熱休克蛋白70KDA，熱休克，表達分析和定位，原核表達，活性檢測

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文象耳豆根結(jié)線蟲生物學和分子生物學特征的研究姓名劉昊申請學位級別碩士專業(yè)植物病理學指導教師徐建華20050601關鍵詞象耳豆根結(jié)線蟲；寄主范圍；MTDNA；RDNAITS；RDNAIGS2；序列比較PCR檢測法

簡介：中山大學博士學位論文R768138水稻第6染色體S5區(qū)基因克隆及分子生物學研究專業(yè)遺傳學博士生仲健導師王金發(fā)教授主席力膨≥委員釤7彩犯≠掀式釤澎吾五1皴力廣州中山大掌生命科掌掌院二00五年五月十八日仲健中山大學博士學位論文水稻第6染色體SS區(qū)基因克隆及分子生物學研究過RTPCR檢測發(fā)現(xiàn)這些轉(zhuǎn)基因株的OS6AP1基因的轉(zhuǎn)錄本在體內(nèi)的水平大大降低。RTPCR分析表明以硎尸』基因在野生型植株的多個組織中表達，但在花粉中未能檢測到其表達。這些結(jié)果表明OS6AP1基因的功能是調(diào)節(jié)水稻根系的發(fā)育，并影響株高和開花期。OSDUFL296基因由10個內(nèi)含子與11個外顯子組成，推算的編碼蛋白由854個氨基酸殘基組成，并預測在蛋白質(zhì)N一端含有一長約60個氨基酸的名為DUFL296的保守結(jié)構域，RTPCR分析表明該基因在所有檢測的組織中都有表達，包括花、葉、莖、根、幼穗等，而且表達量較為均勻。通過RNA沉默，發(fā)現(xiàn)經(jīng)RNA沉默的轉(zhuǎn)基因水稻表現(xiàn)出較慢的生長速率，目前轉(zhuǎn)化小苗表型變化仍在進一步觀察中。OSDSP基因序列分析表明OSDSPL基因克隆全長1119BP，推測的OSDSPL基因產(chǎn)物由225個氨基酸組成。EDNA序列與基因組序列分析表明該基因由5個外顯子及4個內(nèi)含子構成，多個在線分析工具表明該蛋白質(zhì)屬于雙特異蛋白磷酸酶家族。我們將該基因序列提交NCBI數(shù)據(jù)庫，得到接受并獲得序列號AY669072。關鍵詞水稻ORYZASATIVAL；廣親和品種WCVRNA沉默；OSGAP1GPI一錨定蛋白；LYSM結(jié)構域；OSDSP；OSDUFL296

簡介：委糾犬學碩士學位論文2005屆家蠶成品卵微粒子病分子生物學檢測技術的研究STUDYONTHEMETHODOFMOLECULARBIOLOGICALDETECTIONOFPEBLINCOFBOMBYXMORIEGGS研究生姓名指導教ⅡⅡ姓名專業(yè)名稱研究方向論史提交H期潘中華責成良教授特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)家蠶病理學廈病毒分子生物學2005年5月蘭塑堂竺坐竺些型墮嬰型竺皇塑型塑塑墮￡竺垡皇竺皇堅竺竺璺璺苧一竺坐型一STUDYONTHEMETHODOFMOLECULARBIOLOGICALDETECTIONOFPEBRINEOFBOMBYXMORIEGGSABSTRACTTHESTUDYFOCUSEDONSEQUENCEFEATURE，MOLECULAREVOLUTIONOF16SRRNAGENEOFNOSEMABOMBYCTS，ANDTHEREFORETHEPCRMETHODTODETECTPEBRINEOFBOMBYXMORLEGGSWASCREATEDTHE16SRRNAGENEWASCLONEDTHROUGHPERWITHNOSEMABOMBYCTSDNATEMPLATEANDASPECIALPAIROFPRIMERSFOR16SRPDQAGENEOFNOSEMABOMBYCTSSEQUENCEANALYSFSSHOWSTHATTHENUCLEOTLDECONSISTSOF1235BPLACKINGOFSEVERALREGIONSWHICHA∞CONSIDERED∞EUKARYOTICSEQUENCES。ANDITSSEQUENCESTRUCTUREFEATUREISMORESIMILARTOTHATOFPROKARYOTICITWASPRESUMEDTHATINVERYEARLYSTAGENOSEMABOMBYCIADIVERGEDFROMPROKARYOTESMOLECULAREVOLUTIONANALYSISSHOWSTHATMLCROSPORESBELONGSTOTHESAMEGENUSMAYLOCATEDIFFERENTBRANCHESONPHYLOGENTICTREETHERESULTSOFDNAEXTRACTIONSFROMPUREMLCROSPORESOFNOSEMABOMBYETSDEMONSTRATETHAT13XLO～PGDNACALLHEEXTRACTEDFROMONEMTCROSPORE。AND325XI釅PGDNA，SCILICET4MLCROSPURES，M25PLPCRSYSTEMISTHETHRESHOLDFORSUCCESSFULDETECTIONOFPCRTHERESULTSOFDNAEXTRACTIONFROMSILKWORMEGGSWITHPEBNNESHOWTHATTOTALDNANORMALLYEXTRACTEDFROMSILKWORMEGGSWLTHPEBNNECANHEUSEDTODETECTPEBNNEAMONGSDKWORMEGGSWHENINCUBATIONEGGSWEREPREPAREDWITH30％KOHPRACTICALEXAMINATIONRESEARCHILLUSTRATESTHATPCRCARLSENSITIVELYDETECTIⅪBRMEFROMONESILKWORMEGGANDTHEMOSTSENSITIVEFORPEBNNEDETECTMNISONEPEBRMEEGGMIXEDWITH300NORMALEGGSTHEPROBABILITYOFIDENTIFYINGONEPEBRMEEGGAMONG100NORMALEGGSISABOUT80％THEMANIPULATEREGULATIONANDEVALUATIONSTANDARDOFPCREXAMINATIONFORTHEPEBRLNERATIOAMONGSILKWORMEGGSWERECREATEDBASEDONALLOFTHEEXPERIMENTALDATAKEYWORDSSILKWORMBOMBYXMOLLNOSEMABOMBYCLS，THEPRODUCTEGG，RATEOFDISEASEEGG，16SRRNA，PCRDETECTIONUWRITTENBYPANZHONGHUASUPERVISEDBYGONGCHENGHANGAJ～，，、J一；；～。，孓，，L

簡介：安徽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文斑痣盤菌目莖生種的分類及針葉樹生散斑殼屬分子生物學研究姓名韓加軍申請學位級別碩士專業(yè)微生物學指導教師林英任20080601ABSTRACTRHYTISMATALSISANIMPORTANTPARTINFUNGIRESOURCESOFTHEWORLDSYSTEMATICSOFCAULINESPECIESOFRHYTISMATALSWASSTUDIEDFROMMORPHOLOGYDEVELOPMENTBIOLOGYECOLOGYDISTRIBUTIONETCTWENTYTWOLOPHODERMIUMSTRAINSONCONIFIERSWERECHARATERIZEDBYISSRPCRREACTIONWITH10RANDOMPRIMERSWHOSEGELELECTROERSISDIAGRAMSCANBEAMPLIFIEDREPEATEDLYANDCLEARLYBYTHECOMPARISONOFISSRANALYTICRESULTSANDTHEPHENOTYPICCHARACTERS，INDICATEDRELATIONSHIPSOFSOMEINTRASPECIFICANDINTERSPECIFICSTRAINSOFLOPHODERMUIMONCONIFIERSWEREAFFIRMEDTHEMAINRESULTISASFOLLOWS1SPECIMENSFROMTHESOUTHANDWESTMOUNTAINSOFANHUIPROVINCEANDANHUIAGRICULTURALUNIVERSITYFORESTPROTECTIONAUUFPWEREIDENTIFIEDACCORDINGTOTHETAXONOICPRINCIPLESOFDARKER1967，CANNONMINTER1986ANDKIRKETA120018SPECIESOFRHYTISMATALESWERESTUDIED，INCLUDINGARUGOSAOFASCODICHAENA，厶PUERARIAESPNOV，厶CAULINUMSPNOV，LCAMELLIICOLAAND厶CEPHALOTAXIOFLOPHODERMIUM，CLEPTIDEUSANDCTAIWANENSISOFCOCCOMYCESHSTEPHANANDRAEOFHYPODERMAARUGOSAISANEWRECORDSPECIESINCHINA，LPUERARIAESPNOVANDLCAULINUMSPNOVARENEWSPECIESAMONGTHEMDICHOTOMOUSKEYTOTHESESPECIESWERECOMPLIEDMORPHOLOGICALCHARACTERISTICSWEREDESCRIBEDANDILLUSTEATED，ANDHABITS，HOSTSANDDISTRIBUTIONSWRERECORDEDFORTHESPECIES2TEMPLATEDNAOF22LOPHODERMIUMSTRAINSANDONCONIFERSWEREEXTRACTEDBYBENZYLCHLORIDETHEISSRPCRAMPLIFIEDSYSTEMWASOPTIMIZEDFROMASPECTSOFTHECONCENTRATIONSOFDNATEMPLATES，PRIMERS，MG擴，DNTPSANDTAQDNAPOLYMERASE，ANDANNEALINGTEMPERATURETHERESULTSSHOWEDTHATTHEOPTIMALISSRPCRSYSTEMWERESUITABLEFORLOPHODERMIUMASFOLLOWSTEMPLATEDNA45NG’PL叫21AL，PRIMER10UMOLL。O6PL，M9225MMOLLT15PL，DNTPS10RAMOLLO3，TAQDNAPOLYMERASE5UPL。1O31AL，LOXBUFFER151AL，DDH2088TXLIN151XLREACTIONSYSTEM22LOPHODERMIUMSTRAINSONCONIFIERSWEREAMPLIFIEDUSINGINTERSIMPLESEQUENCEREPERTISSRMARKERSWHICHAMPLIFIED167SITESINCLUDING160POLYMORPHICSITES，ACCOUNTINGFOR958％ITSGENETICDISTANCECLUSTERFIGUREWASCONSTRACTEDUSINGUPGMAMETHODFROMTHECLUSTERINGFIGUREWECANFINDTHATTHEDISTANCEOFGENETICRANGEDFROM593TO74122STRAINSOFLOPHODERMIUMONEONIFIERSWERECLASSIFIEDTO5GROUPSBYTHECOMPARISONOFISSRANALYTICRESULTSANDTHEPHENOTYPICCHARACTERTHESTRAINSOFINTRASPECIESANDSIMILARINTERSPECIESCANCLUSTERVERYWELL，ANDTHESTRAINSOFDIFFERENTSPECIESALSOCANDISTINCTQUITEWELLFROMTHERESULTSWECANCONCLUDETHATISSRTECHNIQUEHASGOODAPPLICABILITYINTHE

簡介：分類號S667；Q785；Q812密級Y775044單位代碼10389學號1021620福建農(nóng)林大學碩士學位論文龍眼體胚發(fā)生過程中APX的生理學與分子生物學研究學科專業(yè)生物化學與分子生物學研究方囪檀物生能與分子生將學研究生李惠華指導教師賴鐘雄研究員完成時閩二OO五年四月汞經(jīng)伴鲞、導篩同意爨壘又公瘩早期的正常發(fā)育過程中有APX的主動表達，在一些生物和非生物的脅迫條件下可以不同程度地誘導APX的淡達．此時APX的表達處于～個撥動的過穩(wěn)。3舷眼體胚發(fā)繳過程中脆漿濺PX基因3’末端序列的間源克隆采用3’RACE的方法，首先在靠近基因的5。的保守區(qū)設計了簡并引物，并結(jié)臺通用GL物進行巢式PCR，結(jié)果得到了L條長為868BP的特異性穰強豹龍L羹疆譙2敷傷疆緩克隆豹鶼漿塑APX戇部分亭歹LGENBANK主登錄號為AY831398。結(jié)果表明這個克隧與GENBANK數(shù)據(jù)庫中已經(jīng)報道過的APX的MRNA序列脊商度的同源性。將克隆片段所編碼的氨基酸序列與NCBI上綴盤質(zhì)保守區(qū)數(shù)據(jù)庫比對，發(fā)耀克隆片段所編碼的氮基酸序列與APX的縑守區(qū)育攝高酌黼澈{生，磊置每忍種植勃弱APX氨釜酸序剜魄較氌其畜較高的同源性，從而可以確認克隆片段為龍眼APX的部分序列，并且包含了保鐸區(qū)的序列。胞漿型APX的EDNA全長為LKB多．離基因的CDNA全長述露200BP，可玨避過5’RACE避一步獲得該纂因雛EDNA念長。關鍵詞；龍眼；體細胞胚胎；抗壞血酸過氧化物酶；活性；胞漿型抗壞血酸過氧化物酶基因；同源克隆

簡介：博士學位論文驢4783472葡萄品種遺傳多樣性和霜霉病抗性鑒定的生化與分子生物學研究STUDIESONBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYOFGENETICDIVERSITYOFGRAPECULTIVARANDRESISTANTAPPRAISALOFDOWNYMILDEW專業(yè)名稱森林培育研究方向經(jīng)濟林培育博士生呂秀蘭指導教師張蕪倫教授抗霜霉病，其中京秀、信濃笑遺傳關系很近；第三類為克瑞森無核等9個品種，除8612、紅寶石無核表現(xiàn)中感霜霉病外，其余均感霜霉病。RAPD標記能將全部品種分開，且與盆栽接種鑒定分析結(jié)果基本一致，是葡萄品種鑒定和葡萄品種對霜霉病抗性鑒定的有效方法。4。在國內(nèi)首次用RAMP分子標記對18個葡萄品種進行了分析，結(jié)果表明，80個引物組合中有33個能產(chǎn)生152條DNA擴增片段，124條具有多態(tài)性，每個引物組合可擴增L～8條多態(tài)性帶，平均46條。18個葡萄品秘可聚為4類超藤單獨聚為I類，表現(xiàn)抗霜霉病；峰后等9個品種等聚為II類，表現(xiàn)中抗霜霉病，其中京秀、信濃笑遺傳關系很近；克瑞森無核、無核8612聚為III類，表現(xiàn)中感霜霉病；超級無核等6個品種聚為IV類，表現(xiàn)感霜霉病。聚類分析顯示，RAMP標記能將18個品種完全分開。RAMP與RAPD等分析一致，此方法可作為品種鑒定和品種抗感霜霉病鑒定的有效方法，且比RAPD重復性好，不需校正反應體系。5同時系統(tǒng)地對18個葡萄品種在南方溫熱生境下的植物學及栽培學特性、結(jié)果習性進行了調(diào)查研究，對漿果的內(nèi)外品質(zhì)進行分析、鑒定和評價。結(jié)果表明有17個品種生長勢強，12個適應性較強，7個適應性弱，主要表現(xiàn)在霜霉病發(fā)生嚴重。各個品種的花期均在5月上、中旬，成熟期7月上旬9月下旬；結(jié)果枝率為446V，89％結(jié)果系數(shù)為O62％189；果粒皆屬中到極大，果實顏色為紫紅、黃綠、藍黑色；SSC14。5T肛193％，總糖13，2％18，5％，總酸036％0∞％。多數(shù)品種具有結(jié)果枝率和結(jié)果系數(shù)商、橢圓或圓形、單粒重大、果穗大、顏色深艷、總糖含量高和總酸含量適度等優(yōu)良性狀。綜上所述，POD同工酶特征譜帶可作為葡萄品種抗、感霜霉病的輔助評價，但不能作為品種鑒別的有效方法。PPO、PAL的酶活和CAT的比活可作為葡萄品種霜霉病抗性鑒定的輔助標準。SOD的酶活不能作為鑒定標準。RAPD和RAMP分子標記均可作為葡萄品種和對霜霉病抗性鑒定的有效方法，此結(jié)果與田間鑒定結(jié)果基本一致。RAMP分子標記比RAPD更能揭示品種的遺傳關系，標記結(jié)果更準確，適合遺傳背景不太清楚的遺傳多樣性研究。關鍵詞葡萄品種鑒定霜霉病抗性鑒定生物化學水平分子生物學水平2

簡介：揚州大學博士學位論文J亞群禽白血病病毒ENV蛋白分子生物學特性研究姓名葉建強申請學位級別博士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師秦愛建20050501LI揚州大學睥士學位論文二、J亞群禽白血病病毒ENV蛋白功能與P13I相關穩(wěn)定表達ALVJ4817毒株ENV蛋白的PEDNA．EHV．DFI細胞的生長形態(tài)特性研究表明，該細胞形態(tài)與正常細胞相比明顯變圓、變大，提出其可能是一種類轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。利用3DPSSM軟件以及TLVLPRED軟件分別對4817毒株ENV蛋白進行了分析，結(jié)果表明4817毒株ENV蛋白具有信號轉(zhuǎn)導功能。而且發(fā)現(xiàn)4817毒株ENV蛋白胞漿區(qū)存在P13K信號激活結(jié)構域YXX／VL。用P13K特異性抑制劑對PCDNA．ENVDFL細胞處理后發(fā)現(xiàn)，該細胞類轉(zhuǎn)化形態(tài)能被逆轉(zhuǎn)，證明PCDNA．E／11I．DFL細胞類轉(zhuǎn)化現(xiàn)象直接與P13K信號有關，提示4817毒株ENV蛋白具有潛在的致瘤性，其機理可能通過胞漿區(qū)YXXM結(jié)構域激活P13K，引起PCDNAENVDFL細胞的類轉(zhuǎn)化，有關研究正在深入。三，J亞群禽白血病病毒BAY蛋白分類及其特性對不同ALVJENV蛋白胞漿區(qū)氨基酸序列進一步比較發(fā)現(xiàn)，ALVJ毒株ENV蛋白胞漿區(qū)除了YXXM結(jié)構域外，還存在ITIM和類ITAM結(jié)構域。根據(jù)YXXM、ITAM和ITI／VL作用和功能，作者提出將ALV．JENV蛋白分為抑制型、雙功能型以及激活型三類。根據(jù)這一分類原則，在檢索到的33個ALV．JENV蛋自中，有28個為雙功能型ENV蛋白，3個為抑制型ENV蛋白，只有4817和UD3毒株2個為激活型ENV蛋白；而檢索到的所有EAV．1IP均屬于抑制型ENV蛋白。ENV蛋白的抗原性分析發(fā)現(xiàn)，抑制型、雙功能型以及激活型ENV蛋白的胞漿區(qū)抗原性依次降低，但致病、致瘤能力越來越強，這種現(xiàn)象與其信號轉(zhuǎn)導基序直接相關。分析ITIM基序?qū)刂苹蛞种泼庖呒毎せ睢⒃鲋彻δ?，提示抑制型、雙功能型ENV蛋白中ITIM基序與ALV_J免疫抑制相關，抑制型ENV蛋自與EAVHP可能是ITIM受體，EAVHP可能為細胞內(nèi)原癌基因，ALVJ鯽R可能為病毒癌基因。四、J亞群禽白血病病毒雙功能型凹礦基因克隆及其表達通過組織病理檢查、組織切片特異性抗原檢測、細胞培養(yǎng)技術以及間接免疫熒光試驗呼A從一疑似ALV．J感染的祖代肉用型種雞群中分離、鑒定到～株ALV．J病毒，命名為JSNT毒株。隨后對該毒株的ENV基因進行了PCR擴增、克隆、序列分析、轉(zhuǎn)移表達質(zhì)粒構建以及表達。結(jié)果表明，該毒株ENV蛋白胞漿區(qū)存在YXXM和ITI／VL結(jié)構域，屬于ALVJ雙功能型ENV蛋白；用該毒株P胛V基因以及PCDNA3．1載體成功構建了轉(zhuǎn)移表達質(zhì)粒PCDNANTENV；通過PCDNA．NT，ER／V

簡介：浙江大學博士學位論文赤霉素誘導無蔓南瓜蔓伸長生理和分子生物學機制的研究姓名虞慧芳申請學位級別博士專業(yè)蔬菜學指導教師曹家樹20050531摘要顯差異外，其它被檢測的酶活性均比長蔓南瓜中的低長蔓南瓜中除了N淀粉酶活性受多效唑的抑制作用比無蔓南瓜中的弱以外，其它％炙檢測的生理酶活性表現(xiàn)與無蔓南瓜中的基本致；GA3均能消除多效唑?qū)o蔓和長蔓南瓜生長和被檢測生理酶活性的抑制作用。4赤霉素誘導無蔓南瓜蔓伸長基因表達的CDNAAFLP分析中，我LL、奠直過256對引物組合的選擇性擴增，共得到了約26000條大小在50600印之間的1IFSTMMCFIPTDERIVEDFRAGMENTS。其中有141條差異條帶受GA3E游調(diào)控達的有84條，其中表達豐度高的有30條；受GA3下游調(diào)控的有57條，其中表達豐度高的有42條。我們回收并克隆了其中的53條差異條帶其中受GAT游調(diào)控的有32條，受GA3下游調(diào)控的有21條。JMJ袁53個TDFS進行了BLAST分析，結(jié)果表明有31個TDFS序列和數(shù)據(jù)庫中已登入的基因或EST序列具有較高的相似性，其中20個TDFS分別和已知的基因序列相似，8個TDFS序列與數(shù)據(jù)庫中已登的未JMZJJ能基因相似。3個TDFS自鼬瞪9同源的FST序列；另有22個TDFS未嬲』墁藩同源的序列信息。我們對其中8個受GA3調(diào)節(jié)表達的TDFS表達模式進行KTPCR驗證，結(jié)果反映了CDNAAFLP的可靠性。對20個已知基因進行功能分類，結(jié)果表明這些基因可能與細胞骨架、植物抗病、細胞壁組分代謝、細胞膜抗氧化、信號傳導、物質(zhì)和能量代謝等相關。以E研究結(jié)果表明，本實驗材料無蔓南瓜可能與植株體內(nèi)GA缺陷有關；外源GA3堪過調(diào)節(jié)可能與細胞骨架、細胞壁組分代謝、細胞膜抗氧化及信號傳導等相關基因的表達，并影響植株體內(nèi)生理特性的，從而引起無蔓南瓜蔓晰申長生長。關鍵詞南瓜，矮化GA，O一淀粉酶，抗氧化酶，酸性磷酸酯酶，CDNAAFLP，基因表達

簡介：分類號S85831密級碩士學位論文IBV分子流行病學及TWI型毒株的生物學特征與傳代致弱封柯宇指導教指導教師謝青梅教授學院名學院名稱動物科學學院專業(yè)名專業(yè)名稱動物營養(yǎng)與飼料科學答辯委員會主席答辯委員會主席教授中國廣州2016年6月I摘要禽傳染性支氣管炎（INFECTIOUSBRONCHITIS，IB）是由禽傳染性支氣管炎病毒（INFECTIOUSBRONCHITISVIRUS，IBV）引起的雞的一種急性、高度接觸傳染性疾病。20世紀90年代以來，IB在國內(nèi)相繼爆發(fā)，流行十分廣泛，給養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失。IBV防控的難點在于血清型、基因型眾多，且不同血清型、基因型間沒有交叉保護或者交叉保護很弱，長期的流行病學監(jiān)控及選擇針對本地區(qū)流行毒株的疫苗對IB的防控具有重要的意義。本實驗室于20132015年期間從我國13個省市自治區(qū)發(fā)病雞場送檢病料中分離鑒定了290株IBV，并對分離株進行S1基因測序與分析，結(jié)果表明290株中除2株為變異株外，288株聚類與7個進化分支，即7個基因型。QX型和TWI型是我國目前主要的兩種IBV優(yōu)勢基因型，分別占分離毒株的44和264；其他五個基因型491型、CHIII型、CHIV型、CHVI型和MASS型分別占13、58、17、37和44。基因相似性分析發(fā)現(xiàn)，290株分離株之間核苷酸相似性在6310之間，氨基酸相似性在6020。TWI型分離株與國內(nèi)常用疫苗株（MASS型、LDT3A株、491株、YX10D90株）S1基因相似性較低。重組分析發(fā)現(xiàn)，分離株中存在大量重組毒株，形成新的亞分支、亞型和變異株。TWI型IBV于20世紀90年代后首先出現(xiàn)在我國臺灣地區(qū)，近幾年大陸地區(qū)TWI型分離株報道逐漸增多，但是對其生物學特征還不清楚。本研究選擇4株大陸TWI型分離株（ZS13、GZ14、ZZ15和LYG15株）進行研究，進行分離鑒定、全基因測序與分析、血清中和實驗及商用疫苗免疫保護試驗，并建立了QPCR檢測方法。研究發(fā)現(xiàn)4株TWI型毒株僅在S1基因與臺灣TWI型參考毒株序列相似度高，其他各基因及全基因與國內(nèi)參考毒株相似度高，與臺灣地區(qū)、國外參考毒株基因相似度低。全基因重組分析表明GZ14株并不是完全來源于臺灣TWI型毒株，而是臺灣TWI型分離株與大陸毒株重組產(chǎn)生。血清中和試驗表明ZS13株、GZ14株與國內(nèi)常用疫苗株血清型不同，ZS13株與GZ14株為同一血清型。商用疫苗免疫保護試驗表明目前國內(nèi)商用疫苗毒株對TWI型毒株的保護效果不佳。本研究采用37℃SPF雞胚傳代的方法對GZ14株進行致弱，以期獲得一株疫苗候選毒株。經(jīng)過一系列連續(xù)傳代，GZ14株傳代毒已適應雞胚，造成明顯的雞胚病變，

簡介：學校代碼10564學號2013101610分類號S6673密級博士學位論文枇杷花期調(diào)控的分子生物學研究張玲指導教指導教師林順權教授學院名學院名稱園藝學院專業(yè)名專業(yè)名稱果樹學答辯委員會主席答辯委員會主席盧永根院士中國廣州2016年5月I摘要枇杷ERIOBOTRYALINDL為薔薇科枇杷屬植物，該屬包含二三十種，不同種間花期差異明顯，并且有一些枇杷種類的花期是可變的，或稱可塑的。例如，普通枇杷在秋冬季節(jié)開花；臺灣枇杷為春季開花；而臺灣枇杷恒春變型在原產(chǎn)地臺灣春季開花，引種到廣州華南農(nóng)業(yè)大學枇杷種質(zhì)資源圃以及廣州市果樹所后卻變?yōu)榍锒_花。然而，迄今為止，關于枇杷花期的分子生物學方面的研究甚少，并且未見涉及野生枇杷及花期差異的研究。本研究一方面從枇杷成花的基礎方面入手，進行了枇杷花期相關基因的克隆、表達分析和功能驗證的初步探索；另一方面對花期不同的枇杷屬材料花芽分化前及花芽分化期間的葉片進行轉(zhuǎn)錄組測序，深入研究枇杷花芽分化起始過程中基因轉(zhuǎn)錄的動態(tài)變化，為花期調(diào)控的分子生物學研究提供了大量信息，希望為揭示枇杷花期調(diào)控的分子機理奠定基礎，為生產(chǎn)實踐中人工調(diào)控花果發(fā)育，以及培育不同成熟期新品種提供理論依據(jù)，并為其它木本果樹的成花機理研究提供借鑒。主要結(jié)果如下1對兩種不同花期野生枇杷臺灣枇杷EDEFLEXANAKAI和臺灣枇杷恒春變型EDEFLEXAFKOSHUNENSISNAKAI的莖頂端進行切片觀察，結(jié)果顯示臺灣枇杷恒春變型在9月底至10月初就已經(jīng)開始花芽分化，而臺灣枇杷11月才開始，表明不同枇杷種或變型之間花期不同是因為它們花芽分化開始的時間即已有不同。同時對普通枇杷開花時間不同的兩個品種‘早鐘6號’和‘解放鐘’的莖頂端在不同發(fā)育階段的觀察，發(fā)現(xiàn)‘早鐘6號’和‘解放鐘’開花時間差異則不是因為花芽分化起始時間的不同，而主要是因為它們花序發(fā)育快慢不同。2從臺灣枇杷恒春變型中成功得到FT、CO、GI、SOC1和PIF4同源基因各一個，及FD和SVP同源基因各兩個，分別命名為EDFT、EDCO、EDGI、EDSOC1、EDPIF4、EDFD1、EDFD2、EDSVP1和EDSVP2。對這些基因預測的氨基酸序列進行生物信息學分析，表明它們都具有各基因所特有的保守氨基酸殘基或結(jié)構域。3亞細胞定位顯示EDFT、EDSVP1和EDSVP2在細胞核和細胞質(zhì)中均有分布，而EDFD1、EDFD2、EDCO、EDGI、EDSOC1和EDPIF4只定位于細胞核。4在擬南芥中過表達EDFT、EDFD1、EDFD2、EDCO、EDGI和EDSOC1均表現(xiàn)出早花表型，說明它們具有保守的促進開花的功能。晝夜節(jié)律表達分析表明EDGI、EDCO和EDFT的表達均隨晝夜變化而變化，受光周期影響。BIFC實驗證明EDFT可以和EDFD12在體內(nèi)發(fā)生蛋白水平上的互作。這些都進一步證明這些基因是擬南芥相應基因的同源基因，可能具有類似的功能。

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學博士學位論文應用分子生物學技術解析不同處理狀況下土壤微生物群落結(jié)構的變化姓名趙勇申請學位級別博士專業(yè)微生物學指導教師潘迎捷趙立平20050801應用分子生物學技術解析不同處理狀況下土壤微生物群落結(jié)構的變化術，結(jié)合DNA產(chǎn)量、純度、片段大小以及所反映的微生物群落結(jié)構特性等指標評價了手提方法LABMETHOD得到的總DNA質(zhì)量，并將這些結(jié)果與兩種應用較廣的商業(yè)試劑盒MOBIOULTRACLEANSOILDNAKIT和BI0101FASTDNASPINKITFORSOIL所得DNA的各種指標進行了比較。結(jié)果表明，手提方法LABMETHOD的粗DNA產(chǎn)量低于BIO101KIT的，但高于MOBIOKIT的。這些方法所得DNA的長度都在21KB左右，LABMETHOD提取的DNA沒有嚴重被剪切現(xiàn)象，而兩種試劑盒提取的DNA都有不同程度的剪切。手提方法得到的DNA經(jīng)純化后，應用細菌及真菌特異引物進行PCR擴增，均能獲得目的片段，表明該方法能從土壤中同時有效提取細菌和真菌總基因組DNA。并且，手提方法所得DNA的細菌16SRDNA和真菌18SRDNA的PCRRFLP圖譜與兩種商業(yè)試劑盒的圖譜基本相似，但三種方法提取的DNA在細菌16SRDNAV3區(qū)和真菌28SRDNA片段的PCRTGGE圖譜上都存在一定差異，主要表現(xiàn)在一些弱勢條帶的有無或強弱上。這說明手提方法提取的總DNA與兩種商業(yè)試劑盒一樣，在一定程度上能反映土壤中微生物群落的多樣性和組成?？傊?，手提DNA方法LABMETHOD所用試劑普通，價格便宜，能在4小時以內(nèi)獲得夠質(zhì)夠量的土壤DNA用于微生物分子生態(tài)學研究，較適合于廣大普通實驗室進行土壤DNA提取工作。二、應用PCRRFLP及PCRTGGE技術監(jiān)測農(nóng)田土壤微生物短期動態(tài)變化在一塊農(nóng)田里于一個月內(nèi)連續(xù)采集5次土樣，提取土樣微生物總DNA，應用PCRRFLP及PCRTGGE技術監(jiān)測土壤微生物在自然狀況下的短期動態(tài)變化。初步結(jié)果表明，細菌16SRDNA和真菌18SRDNA的PCRRFLP圖譜在5個采樣時間點上基本一致；細菌的PCRTGGE圖譜平均有40條帶，其相似性在90％以上，真菌的平均有20條帶，其相似性在70％以上。這說明被研究的這塊農(nóng)田土壤細菌區(qū)系短期內(nèi)變化不大，而真菌區(qū)系存在一定幅度的動態(tài)變化，并且細菌多樣性遠遠高于真菌多樣性。比較兩種分子方法的結(jié)果表明，PCRTGGE技術比PCRRFLP技術更能精確地反映土壤微生物的動態(tài)變化，并且能同時陜速地對多個樣品進行有效區(qū)分。三、兩種外源微生物制劑加入后農(nóng)田土壤中微生物群落結(jié)構及纖維素水解活性動態(tài)變化的研究土壤微生物群落結(jié)構及纖維素水解活性的變化可以反映不同改良或管理措施對土壤的影響。在實驗室條件下，應用濾紙條埋片法和不依賴于培養(yǎng)的分子方法研究了Ⅱ

簡介：Y959359分類號Q12Q墜UDC學位論文密級學號壁2QQ3虬I2小麥對條銹病、白粉病和衰老抗性的分子細胞生物學研究指導教師姓名申請學位級別專業(yè)名稱論文提交日期論文答辯日期學位授予單位學位授予時間論文答辯委員會主席論文答辯委員會成員論文評閱人羅培高任正隆教授四川農(nóng)業(yè)大學博士生物化學與分予生物學2006年5月2006年6月19日刪川農(nóng)業(yè)大學2006年7月榮廷晤院士四川農(nóng)業(yè)大學余撼群研究員成都生物所趙云教授四川大學葉華智教授四川農(nóng)業(yè)大學黃玉碧教授凹JIL農(nóng)業(yè)大學賈繼增研究員中國農(nóng)業(yè)科學研究員廖玉才教授華中農(nóng)業(yè)大學吳為人教授浙江大學張義正教授四川1大學余懋群研究員成都生物所2006年6月個R單株構成的F2群體進行了連鎖分析，結(jié)果表明該基因位于2BS上，與GW耐LO標記共分離，并繪制了該基因的連鎖圖從系譜、遺傳、分子標記、和抗性鑒定等多方面分析，發(fā)現(xiàn)小麥品系種川農(nóng)17、愛民5號、愛民6號中的抗條銹病基因是一個新基因，暫命名為YRCNIG微衛(wèi)星標記XGWM410就是YRCNL9的診斷標記，它的發(fā)現(xiàn)必將加快小麥的分子標記輔助選擇育種的進程3、小麥抗條銹病基因YRCNL9的診斷檢測和遺傳分析用小麥條銹病抗性基因YRCNL9的診斷標記XG礬N410對19個小麥品種或品系進行PCR篩選，其中川農(nóng)19、新抗5號、愛民5號和愛民6號擴增出與條銹病抗性基因YRCNL9共分離的特征片斷。其大小為391個堿基。而在其它的小麥品種或品系中未能檢測到該片斷。系譜分析和抗性鑒定結(jié)果表明川農(nóng)19、新抗5號、愛民5號和愛民6號含有小麥條銹病基因YRCNL9抗性遺傳分析發(fā)現(xiàn)小麥條銹病抗性在川農(nóng)19，新抗5號和愛民5號中的遺傳符合單個顯性基因的遺傳規(guī)律3抗I感；雜交組合煙輻188／愛民6號的抗性遺傳也符合單個顯性基因的遺傳規(guī)律，而另外一些雜交組合如R25／愛民6號。魯955159／愛民6號和蘇3110／愛民6號中的抗性分離則符合兩對基因互補的遺傳規(guī)律9抗7感本研究揭示了小麥條銹病抗性基因刪9在不同遺傳背景和雜交組合的抗性表達和分離有差異，從而加速YRCNL9在小麥抗條銹病育種中的開發(fā)與利用4、基因?qū)蚣僬f分析和鑒定一個來自中問偃麥草的小麥條銹病新抗源用當前流行的小麥條銹菌生理小種CYR32對含廳基因和不確定是否含紛基因的小麥品系進行接種鑒定，結(jié)果顯示在正式發(fā)表的條銹病抗性基因中只有很少數(shù)幾個對條銹菌生理小種CYR32是有效的。本研究用遠源雜交的方法將中間偃麥草點1YTRIGINTERMEDIUM，中的抗小麥條銹病基因?qū)肫胀ㄐ←湣Ｔ谥虚g偃麥草與普通小麥川麥107的雜交后代中選育的原24和原25對條銹病是近免疫的抗性鑒定表明原24和原25對小麥條銹菌生理小種CYR32的反應型與其它所有報道的抗性基因的反應型是不同的系譜分析表明該抗性基因是一個新的抗性基因，因此將其被命名為YRYE250小麥條銹病抗性基因仔，蝴成功鑒定和導入小麥遺傳背景將對小麥抗條銹病育種起到巨大的推動作用5、鑒定一個來自黑麥的小麥抗條銹病新基因YRR212通過接種當前流行的條銹菌生理小種CYR32，發(fā)現(xiàn)來自于中國西南地區(qū)的一個小麥品系R212對其具有高度的抗性將抗病的R212與感病的小麥品系雜交，并進行了