分子印跡固相萃取-高效液相色譜法在食品危害殘留物分析的應(yīng)用研究.pdf

1、食品安全是一個日趨重要的公共衛(wèi)生議題，食品中化學(xué)污染是近幾年來國際社會開始研究的公共衛(wèi)生問題之一。食品中化學(xué)污染物殘留的特點是樣品中殘留物水平很低，樣品基質(zhì)復(fù)雜，干擾物質(zhì)多，不易從樣品中分離、純化殘留物。分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymer,MIP)由于具有高度交聯(lián)的結(jié)構(gòu)，穩(wěn)定性好，能夠在高溫、高壓、有機(jī)溶劑、酸、堿等苛刻環(huán)境中使用，造價低廉，是分子識別領(lǐng)域的理想敏感材料。分子印跡固相萃取(mole

2、cularly imprinted solidphase extraction，MISPE)不僅適用于復(fù)雜基體樣品的凈化，還適用于需要大量富集的樣品前處理。本課題基于分子印跡技術(shù)的樣品快速前處理方法，開展了水產(chǎn)品中的孔雀石綠(MG)、結(jié)晶紫(GV)及其代謝產(chǎn)物和辣椒制品中水溶性、脂溶性合成色素分子印跡固相萃取-高效液相色譜分析方法的研究，主要研究內(nèi)容如下：
　　 1.概述了MISPE技術(shù)的特點，綜述了MISPE原理、制備技術(shù)的研

3、究進(jìn)展。介紹了分子印跡技術(shù)的原理，簡介了MIP的制備條件和制備方法，綜述了分子印跡技術(shù)在食品樣品前處理的應(yīng)用進(jìn)展。
　　 2.建立了柱后衍生-高效液相色譜法測定水產(chǎn)品中的孔雀石綠(MG)及其代謝產(chǎn)物的分析方法。對水產(chǎn)品樣品的提取和凈化條件進(jìn)行了改進(jìn)，建立了一種新的衍生反應(yīng)方法，采用了環(huán)保且易獲得的碘溶液為衍生劑，隱性孔雀石綠的在線衍生實驗效率取決于碘衍生劑條件。通過實驗，對碘衍生劑的濃度、pH值及溫度條件進(jìn)行了優(yōu)化，尋找信號/噪

4、音比(S/N)最大值。方法評價按照歐盟2002/657/EC號文件的規(guī)定對回收率、準(zhǔn)確度、精密度、實驗室重現(xiàn)性、穩(wěn)定耐用性進(jìn)行實驗驗證，實現(xiàn)了草魚、蝦和貝殼類不同種水產(chǎn)品中孔雀石綠和隱性孔雀石綠及其代謝產(chǎn)物多殘留的篩選。
　　 3.建立了柱后衍生-高效液相色譜法測定水產(chǎn)品中的孔雀石綠和隱性孔雀石綠的分析方法。利用分子印跡固相萃取柱，離線處理樣品，采用高效液相色譜法測定了水產(chǎn)品中的孔雀石綠結(jié)晶紫及其代謝物。通過沉淀聚合法，以甲基丙

5、烯酸(MAA)為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)為交聯(lián)劑，合成了一種新型的印跡材料，并用于固相萃取柱填料。利用洗脫實驗評價印跡固相萃取柱的效果和選擇性。結(jié)果表明：印跡固相萃取柱對孔雀石綠和結(jié)晶紫及其代謝物具有很高的萃取選擇性。用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線計算孔雀石綠結(jié)晶紫及其代謝物在草魚中的平均回收率為89.89％～99.1％，在蝦中的平均回收率為90.6％～101.2％，貝殼中的平均回收率為91.3％～96.3％。這三種水產(chǎn)品中的檢測限(

6、CCα))為0.11μg k-1～0.14μg kg-1，檢測能力(CCβ)為0.19μg kg-1～0.24μg kg-1。
　　 4.建立了辣椒制品中的水溶性和脂溶性合成色素高效液相分析方法。利用沉淀聚合法合成了分子印跡聚合物，用4-乙基吡啶(4-VP)用為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)為交聯(lián)劑，甲酸-甲醇為洗脫劑研究了洗脫效果。由于分子印跡聚合物與水溶性、脂溶性合成色素之間存在疏水作用和離子交換作用，因此具有很

7、高的萃取選擇性。利用上述材料對于辣椒制品中的3種水溶性和6種脂溶性色素進(jìn)行樣品凈化處理，高效液相色譜法對辣椒制品中的9種合成色素進(jìn)行了測定。結(jié)果表明，平均加收率為：辣椒醬72.1％～95.6％，辣椒粉72.1％～92.3％，樣品中的檢測限(CCα)為1.2μg kg-1～1.6μg kg-1，檢測能力(CCβ)為1.9μg kg-1～2.4μg kg1。
　　 5.建立了對位紅、蘇丹紅G、蘇丹Ⅰ、蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ等六種脂溶

8、性蘇丹紅染料的檢測方法。利用甲酸提取樣品中的脂溶性蘇丹紅染料，用氯仿萃取凈化，建立了高效液相色譜測定六種脂溶性蘇丹紅染料的方法，并將所建立的方法應(yīng)用于辣椒制品中合成色素的測定，辣椒粉在日內(nèi)和日間平均回收分別為94.9％～101.2％和94.9％～100.3％，精密度為2.9％～4.0％和3.7％～4.9％；辣椒醬在日內(nèi)和日間平均回收分別為94.1％～99.2％和94.2％～98.6％，精密度為2.8％～3.8％和3.3％～4.2％。方法