新型微量復(fù)雜樣品連續(xù)電泳預(yù)分離方法研究.pdf

1、蛋白質(zhì)作為后基因組時(shí)代生命科學(xué)的重要研究?jī)?nèi)容，已成為當(dāng)今的研究重點(diǎn)及熱點(diǎn)。目前對(duì)于蛋白質(zhì)的研究還存在著一定的挑戰(zhàn)，其主要原因在于待檢測(cè)樣品中所含有的蛋白質(zhì)組成復(fù)雜，且其中某些蛋白質(zhì)含量低，給分析檢測(cè)帶來(lái)了很大困難。解決如上困難的途徑之一是對(duì)蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行分離及濃集。自由流電泳是一種獨(dú)特的電泳分離方法，不僅分離條件溫和，還可進(jìn)行連續(xù)分離，十分適用于蛋白等復(fù)雜生物樣品的預(yù)處理。本文介紹了一種新型芯片自由流電泳裝置，通過引入離子交換膜為電泳分

2、離的同時(shí)利用濃度極化效應(yīng)進(jìn)行濃集提供了條件。
　　第一章對(duì)自由流電泳分離原理及其應(yīng)用以及微納流控及渦流現(xiàn)象，離子交換膜和蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行了介紹和綜述。
　　第二章利用聚甲基丙烯酸甲酯（有機(jī)玻璃，PMMA）基材制作了一種自由流電泳芯片系統(tǒng)，并對(duì)芯片結(jié)構(gòu)進(jìn)行了一系列改進(jìn)。利用改進(jìn)后的芯片對(duì)三種熒光探針分子混合物進(jìn)行了分離，分離效果良好。對(duì)該芯片分離濃集性能進(jìn)行了表征，包括緩沖液濃度、電壓、加電方式、分離室高度等對(duì)分離濃集現(xiàn)象的影響

3、，并對(duì)分離時(shí)電流-電壓曲線進(jìn)行了測(cè)定及對(duì)分離組分的電導(dǎo)率及pH進(jìn)行了測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該芯片裝置在正向加電（陽(yáng)極-陽(yáng)離子交換膜-陰離子交換膜-陰極）時(shí)具有良好的分離效果，反向加電（陰極-陽(yáng)離子交換膜-陰離子交換膜-陽(yáng)極）時(shí)在離子交換樹脂界面出現(xiàn)離子耗盡和渦流現(xiàn)象。系統(tǒng)在如上兩種加電模式下均表現(xiàn)出一定的濃集能力。用所建立的分離濃集裝置對(duì)蛋白質(zhì)混合樣品（胃蛋白酶pI1.5-2.5、牛血紅蛋白pI6.9及溶菌酶pI11.0）進(jìn)行了分離，并在