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1、黃蘑多糖(PolysaccharideofHuangmo,HMP)是一種藥用價(jià)值很高的活性真菌多糖,具有抗癌、抑癌及防輻射等作用。迄今為止,國(guó)內(nèi)外很少有關(guān)于黃蘑多糖分離純化的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)對(duì)黃蘑多糖除蛋白的方法及其提取純化工藝進(jìn)行了初步研究,確定了除蛋白的最佳方法和條件,并對(duì)提取純化工藝作了優(yōu)化。本文對(duì)HMP的成分進(jìn)行分析,旨在進(jìn)一步了解其化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性,為進(jìn)一步研究黃蘑多糖的分離打下基礎(chǔ)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到以下結(jié)論: 1、對(duì)黃蘑多
2、糖提取的工藝進(jìn)行研究,采用L9(34)正交設(shè)計(jì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確定熱水提取多糖的最佳條件:料液比為1∶25,提取溫度為90℃,提取時(shí)間3小時(shí)。按最佳條件測(cè)得黃蘑粗多糖產(chǎn)率為21.32﹪。 2、在除蛋白時(shí),對(duì)Sevag法、三氯乙酸法(TCA)、乙酸鋅和亞鐵氰化鉀法(以下簡(jiǎn)稱為鐵-鋅法)三種方法的除蛋白效果進(jìn)行了比較。結(jié)果表明用TCA法除蛋白后,多糖純度最高,達(dá)到了81.5﹪,冷凍干燥后多糖為灰白色。對(duì)TCA的用量進(jìn)行了選擇,實(shí)驗(yàn)確定出,
3、當(dāng)m1(粗多糖的質(zhì)量)∶m2(三氯乙酸的質(zhì)量)=1∶6時(shí),TCA脫蛋白效果最好,多糖純度為83.7﹪。 3、用紫外分光光度法和高效液相色譜法對(duì)黃蘑多糖的純度進(jìn)行鑒定,從譜圖可看出,除蛋白后,黃蘑多糖中基本無(wú)雜質(zhì),純度較高,進(jìn)一步證明了TCA除黃蘑多糖中的蛋白是可行的。 4、除蛋白后的HMP依次經(jīng)過(guò)901大孔樹(shù)脂層析柱、陰離子交換層析柱(SephadexDEAE-A25)后,分離得到兩個(gè)組分HMP-Ⅰ和HMP-Ⅱ。HMP-
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