微流控芯片單細胞分析.pdf

1、青島科技大學碩士學位論文微流控芯片單細胞分析姓名：何鵬申請學位級別：碩士專業(yè)：有機化學指導教師：孫雪梅20090415微流控芯片單細胞分析驗條件是，緩沖液為pH90的1010。2toolL。1的硼酸緩沖溶液，分離電壓為11kV，檢測電勢為O8V(vsAg／AgCl)，進樣方式為1OkV電遷移進樣5S。在此實驗條件下，得到了抗壞血酸的線性范圍(80x1050x104molL1)，線性回歸系數(shù)為09985，，并以電泳峰電流與噪聲比值(S／N

2、)為3時得到濃度檢測限為2710擊molL1。將5O104molL1抗壞血酸標準溶液連續(xù)進樣7次，得到抗壞血酸的遷移時間‰和峰電流乇的相對標準偏差(RSD)分別為O57％和21％，并將該方法用于檢測大鼠肥大細胞溶膜液中的抗壞血酸含量，加標回收率在9497％之間。第五章，研制了一種新型的碳納米管／納米普魯士藍修飾的碳纖維簇微盤電極，并將其用于微流控芯片電化學檢測，測定了單個大鼠肥大細胞中的抗壞血酸。與未經(jīng)修飾的碳纖維微盤電極相比，這種碳納

3、米管／納米普魯士藍碳纖維微盤修飾電極在相對較低的檢測電位下(O4V凇Ag／AgCl)具有較好的催化氧化特性，靈敏度顯著提高。在最佳實驗條件下，得到抗壞血酸的線性范圍為80xlff750x104molL1，檢測限為2710～molL～(S／N3)。將5O10～molL1抗壞血酸標準溶液連續(xù)進樣7次，得到抗壞血酸的遷移時間‰和峰電流乇的相對標準偏差(RSD)分別為086％和23％。在這一方法中，單個細胞通過電遷移導入芯片的雙T交叉點，在10

4、l(v的電壓下肥大細胞迅速溶膜，溶膜后細胞中的組分在微流控芯片中得到分離并檢測。用上述方法測得單個大鼠腹腔肥大細胞中抗壞血酸的含量為25—73fmol，這是使用碳纖維修飾電極在微流控芯片上對單個大鼠肥大細胞中組分含量測定的首次報道。第六章研制了一種集成化微芯片毛細管電泳電化學發(fā)光檢測系統(tǒng)，并在該系統(tǒng)上，以碳纖維簇微盤電極為工作電極，Ru(bpy)3z作為發(fā)光試劑，考察了發(fā)光試劑的濃度、緩沖液的pH值、緩沖液濃度、分離電壓、檢測電勢等實驗

5、參數(shù)對檢測谷胱甘肽的影響，得到的最佳檢測條件為：Ru(bpy)32的濃度為10x104molL～，38x10～toolL_1NaH2P04168x10～molL1Na2HP04(pH74)，分離電壓為12kV，檢測電勢為14V(vsAg／AgCl)，進樣電壓1OkV，進樣時間5S。在此實驗條件下，將1O104molL1谷胱甘肽標準溶液連續(xù)進樣7次，得到谷胱甘肽的遷移時間島和峰電流J的相對標準偏差(RSD)分別為092％和21％。這是首次